브라질의 풍토병 지역에서 말라리아 진단을 위한 RealAmp 방법 검증

전 세계적으로 약 20억 명의 사람들이 말라리아 위험 지역에 살고 있으며 이환율은 2억 5천만 건이 넘고 매년 약 80만 명이 사망합니다. 인간 감염을 유발하는 4종의 말라리아 기생충 중에서 P. falciparum이 P. vivax에 이어 심각한 말라리아 사례의 대부분을 담당합니다. 신속하고 정확한 치료를 위해서는 조기에 정확한 진단이 필수적이며, 이는 사망률을 줄이고 전염을 차단할 수 있습니다. 현재 말라리아 진단을 위한 기존 방법에는 얇고 두꺼운 혈액 도말 및 신속 진단 테스트(RDT)의 현미경 검사가 포함됩니다. 실제로 광학 현미경은 일반적으로 100 기생충/µl만큼 낮은 기생충혈증을 감지하고 종을 구별할 수 있습니다. 현미경 검사의 장점은 기생충혈증을 추정하는 능력, gametocytes를 포함한 기생충 단계를 식별할 수 있는 가능성 및 저렴한 비용을 포함합니다. 그러나 이 방법은 노동 집약적이고 표준화하기 어려우며 잘 훈련된 현미경 전문가가 필요합니다. 대부분의 RDT는 P. falciparum histidine-rich protein 2(HRP-2) 항원의 검출을 기반으로 하며 모든 말라리아 종을 검출하지는 않습니다. 유당 탈수소효소(LDH)와 알돌라아제를 검출하는 RDT는 일반적으로 4종의 말라리아 기생충 모두와 광범위하게 반응하므로 종 검출 성능을 개선하기 위한 노력이 진행 중이지만 종을 구별할 수 없습니다. 여러 말라리아 종이 함께 순환하는 환경에서 낮은 기생충혈증을 가진 말라리아 기생충 종을 정확하게 진단하는 데 있어 분자적 방법이 현미경 및 RDT보다 더 신뢰할 수 있습니다. 그러나 중첩된 중합효소 연쇄 반응(중첩된 PCR) 또는 실시간 PCR과 같은 기존의 분자 방법은 기술적으로 어렵고 자원 집약적이며 일반적으로 잘 갖추어진 실험실이 필요하기 때문에 참조 실험실로 제한됩니다. 최근 현장 설정에서 사용할 수 있는 새로운 분자 방법이 개발되었으며 이는 발병 국가에서 말라리아 진단을 위한 분자 도구를 탐색할 수 있는 새로운 기회를 열어줍니다. 말라리아 제어 프로그램을 위한 분자 도구의 사용을 용이하게 하기 위해 미국 애틀랜타에 있는 질병 통제 예방 센터(CDC)의 말라리아 연구소는 실시간 형광 루프 매개 등온 증폭(RealAmp)이라는 간단한 등온 분자 방법을 개발했습니다. ) 말라리아 진단을 위해. 현재 Plasmodium 속 검출과 P. falciparum 및 P. vivax 종 검출을 위한 RealAmp 프라이머가 존재합니다. RealAmp 방법은 현장에서 말라리아(및 HIV 및 결핵과 같은 주요 공중 보건 영향의 기타 감염) 진단을 위한 분자 도구로서 큰 잠재력을 가지고 있습니다. 임상 및 운영 프로그램에서 현장 사용을 위한 기존의 PCR 기반 진단 방법에 대한 대안을 제공할 수 있습니다. 이 제안의 목적은 P. falciparum 및 P. vivax의 동시 순환을 통해 브라질의 두 풍토병 상태에서 말라리아 임상 진단을 받은 환자의 혈반에서 말라리아 기생충을 검출하기 위한 RealAmp의 감도를 검증하는 것입니다. 이 평가에서는 RealAmp와 현미경 검사를 기준 검사로 Real-Time PCR 방법과 비교합니다.