EBUS-TBNA サンプルを使用した結核菌のポリメラーゼ連鎖反応の診断精度
2015年7月16日 更新者：Jung Seop Eom、Pusan National University Hospital
孤立性胸腔内リンパ節症患者におけるEBUS-TBNAサンプルを用いた結核菌のネステッドポリメラーゼ連鎖反応とリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応の診断精度の比較
この研究の目的は、孤立性胸腔内リンパ節腫脹のある患者においてEBUS-TBNAサンプルを使用して、結核菌に対するネスト型ポリメラーゼ連鎖反応とリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応の診断効果を比較することです。
調査の概要
状態
わからない
詳細な説明
気管支内超音波ガイド下経気管支針吸引法（EBUS-TBNA）は縦隔リンパ節サンプリングの実施に広く使用されているが、胸腔内孤立性リンパ節患者におけるEBUS-TBNAサンプルを用いた結核菌ポリメラーゼ連鎖反応（TB-PCR）についてはほとんど情報が得られていない。リンパ節腫脹。 さらに、結核菌の検出には TB-PCR の 2 つの方法 (ネステッド PCR とリアルタイム PCR) が利用可能ですが、孤立性胸腔内リンパ節腫脹のある患者ではどちらの方法が結核菌の検出に優れているかは確立されていません。
したがって、この研究は、結核の発生率が中程度（年間10万人中97人）である韓国の孤立性胸腔内リンパ節腫脹患者を対象に、EBUS-TBNAサンプルを使用したネステッドTB-PCRとリアルタイムTB-PCRの診断有効性を比較するために設計された。
研究の種類
介入
入学 (予想される)
100
段階
- 適用できない
連絡先と場所
このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。
研究場所
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Busan、大韓民国、602-739
- 募集
- Pusan National University Hospital
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コンタクト：
- Jung Seop Eom, Master
- 電話番号：+821020810859
- メール：ejspulm@gmail.com
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コンタクト：
- Jeong Ha Mok, Master
- 電話番号：+820185196183
- メール：mokgamokga@gmail.com
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参加基準
研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。
適格基準
就学可能な年齢
18年歳以上 (大人、高齢者)
健康ボランティアの受け入れ
いいえ
受講資格のある性別
全て
説明
包含基準:
- 孤立性胸腔内リンパ節腫脹のある患者
除外基準:
- CTまたはPETスキャンで原発性肺がんの疑いがある
- CTまたはPETスキャンで肺結核の疑いがある
- CTまたはPETスキャンで肺実質のサルコイドーシスが疑われる
研究計画
このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：診断
- 割り当て：非ランダム化
- 介入モデル：単一グループの割り当て
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
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実験的：ホルマリン固定組織のネステッド PCR
すべての患者において、結核菌に対するネステッドポリメラーゼ連鎖反応は、気管支内超音波ガイド下経気管支針吸引によって得られたホルマリン固定パラフィン包埋標本を用いて実行される。
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ネステッド PCR の場合、ホルマリン固定パラフィン包埋組織を 1 mL のキシレン中で 60℃ で 30 分間インキュベートし、その後 10 分間遠心分離しました。
遠心分離後、サンプルからパラフィンと上清を除去しました。
脱パラフィンが完了するまで、同じ手順を繰り返しました。
アルコール 1 mL を加えた後、サンプルを 5 分間遠心分離し、上清を除去しました。
次いで、サンプルを空気乾燥させてペレットとした。
QIAamp (Qiagen、米国カリフォルニア州バレンシア) を使用して DNA を抽出しました。
PCR増幅は、Mycobacterium tuberculosis IS6110プライマーを使用して実行されました。
外側プライマーを使用した最初のラウンドと内側プライマーを使用した第 2 ラウンドでは、それぞれ 256 bp および 181 bp のフラグメントが増幅されました。
最後に、PCR 産物を 2% アガロースゲルで視覚化しました。
他の名前：
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実験的：新鮮な組織のネステッド PCR
すべての患者において、結核菌のネステッドポリメラーゼ連鎖反応は、気管支内超音波ガイド下経気管支針吸引によって得られた滅菌生理食塩水中の検体を用いて実行される。
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滅菌生理食塩水中の検体を用いたネステッド PCR では、QIAamp (Qiagen、米国カリフォルニア州バレンシア) を使用して DNA を抽出しました。
PCR増幅は、Mycobacterium tuberculosis IS6110プライマーを使用して実行されました。
外側プライマーを使用した最初のラウンドと内側プライマーを使用した第 2 ラウンドでは、それぞれ 256 bp および 181 bp のフラグメントが増幅されました。
最後に、PCR 産物を 2% アガロースゲルで視覚化しました。
他の名前：
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実験的：新鮮組織のリアルタイム PCR
すべての患者において、結核菌のリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応は、気管支内超音波ガイド下経気管支針吸引によって得られた滅菌生理食塩水中の検体を用いて実行される。
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リアルタイム PCR の場合、滅菌生理食塩水中の検体を濾過し、1 mL のリン酸塩ベースの生理食塩水を加えました。
3分間遠心分離した後、上清を除去した。
次に、50 μL の抽出バッファーをサンプルに添加し、サンプルを 100℃で 20 分間加熱しました。
3分間遠心分離した後、上清をPCRに使用した。
リアルタイム PCR は、AdvanSure TB/NTM リアルタイム PCR キットを使用して実行されました。
リアルタイム PCR 反応には 3 つのチャネル (結核菌群、マイコバクテリア、および内部対照) が使用されました。
FAM、HEX、および Cy5 のシグナルを各チャネルで測定しました。
rpoB のサイクル閾値が各シグナルで 35 未満、IS6110 のサイクル閾値以上である場合、結核菌が存在するとみなされました。
他の名前：
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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結核菌の各ポリメラーゼ連鎖反応を検出した参加者の数
時間枠：6ヵ月
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孤立性胸腔内リンパ節腫脹を有するすべての参加者において、EBUS-TBNA サンプルを使用して 3 つの TB-PCR 方式 (ホルマリン固定パラフィン包埋組織のネステッド PCR、新鮮組織のネステッド PCR、新鮮組織のリアルタイム PCR) が実行されます。
各 TB-PCR モダリティに対して陽性と報告した参加者の数が収集されます。
これらのデータから、結核性リンパ節炎を診断するための各 TB-PCR モダリティの感度、特異度、および診断精度が計算されます。
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6ヵ月
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協力者と研究者
ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。
捜査官
- 主任研究者：Jeong Ha Mok, Master、Pusan National University Hospital
- 主任研究者：Jung Seop Eom, Master、Pusan National University Hospital
出版物と役立つリンク
研究に関する情報を入力する責任者は、自発的にこれらの出版物を提供します。これらは、研究に関連するあらゆるものに関するものである可能性があります。
一般刊行物
- Sun J, Teng J, Yang H, Li Z, Zhang J, Zhao H, Garfield DH, Han B. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in diagnosing intrathoracic tuberculosis. Ann Thorac Surg. 2013 Dec;96(6):2021-7. doi: 10.1016/j.athoracsur.2013.07.005. Epub 2013 Sep 12.
- Statement on sarcoidosis. Joint Statement of the American Thoracic Society (ATS), the European Respiratory Society (ERS) and the World Association of Sarcoidosis and Other Granulomatous Disorders (WASOG) adopted by the ATS Board of Directors and by the ERS Executive Committee, February 1999. Am J Respir Crit Care Med. 1999 Aug;160(2):736-55. doi: 10.1164/ajrccm.160.2.ats4-99. No abstract available.
- Navani N, Lawrence DR, Kolvekar S, Hayward M, McAsey D, Kocjan G, Falzon M, Capitanio A, Shaw P, Morris S, Omar RZ, Janes SM; REMEDY Trial Investigators. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration prevents mediastinoscopies in the diagnosis of isolated mediastinal lymphadenopathy: a prospective trial. Am J Respir Crit Care Med. 2012 Aug 1;186(3):255-60. doi: 10.1164/rccm.201203-0393OC. Epub 2012 May 31.
- Navani N, Molyneaux PL, Breen RA, Connell DW, Jepson A, Nankivell M, Brown JM, Morris-Jones S, Ng B, Wickremasinghe M, Lalvani A, Rintoul RC, Santis G, Kon OM, Janes SM. Utility of endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in patients with tuberculous intrathoracic lymphadenopathy: a multicentre study. Thorax. 2011 Oct;66(10):889-93. doi: 10.1136/thoraxjnl-2011-200063. Epub 2011 Aug 3.
- Bezabih M, Mariam DW, Selassie SG. Fine needle aspiration cytology of suspected tuberculous lymphadenitis. Cytopathology. 2002 Oct;13(5):284-90. doi: 10.1046/j.1365-2303.2002.00418.x.
研究記録日
これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。
主要日程の研究
研究開始
2015年7月1日
一次修了 (予想される)
2018年12月1日
研究の完了 (予想される)
2018年12月1日
試験登録日
最初に提出
2015年7月8日
QC基準を満たした最初の提出物
2015年7月13日
最初の投稿 (見積もり)
2015年7月14日
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (見積もり)
2015年7月20日
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
2015年7月16日
最終確認日
2015年7月1日
詳しくは
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