Precisión diagnóstica de la reacción en cadena de la polimerasa para Mycobacterium tuberculosis usando muestras EBUS-TBNA
16 de julio de 2015 actualizado por: Jung Seop Eom, Pusan National University Hospital
Comparación de la precisión diagnóstica de la reacción en cadena de la polimerasa anidada y en tiempo real para Mycobacterium tuberculosis utilizando muestras EBUS-TBNA en pacientes con linfadenopatía intratorácica aislada
El propósito de este estudio es comparar la eficacia diagnóstica de la reacción en cadena de la polimerasa anidada y en tiempo real para Mycobacterium tuberculosis utilizando muestras EBUS-TBNA en pacientes con linfadenopatía intratorácica aislada.
Descripción general del estudio
Estado
Desconocido
Condiciones
Descripción detallada
Aunque la aspiración con aguja transbronquial guiada por ecografía endobronquial (EBUS-TBNA) se ha utilizado ampliamente para realizar muestras de ganglios linfáticos mediastínicos, hay poca información disponible sobre la reacción en cadena de la polimerasa para Mycobacterium tuberculosis (TB-PCR) utilizando muestras EBUS-TBNA en pacientes con infección intratorácica aislada. linfadenopatía. Además, están disponibles dos métodos de TB-PCR (PCR anidada y PCR en tiempo real) para la detección de Mycobacterium tuberculosis y no se ha establecido qué método es superior para la detección de Mycobacterium tuberculosis en pacientes con linfadenopatía intratorácica aislada.
Por lo tanto, este estudio fue diseñado para comparar la eficacia diagnóstica de TB-PCR anidada y en tiempo real usando muestras EBUS-TBNA en pacientes con linfadenopatía intratorácica aislada en Corea del Sur, donde la incidencia de tuberculosis es intermedia (97/100,000 por año).
Tipo de estudio
Intervencionista
Inscripción (Anticipado)
100
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Esta sección proporciona los datos de contacto de quienes realizan el estudio e información sobre dónde se lleva a cabo este estudio.
Ubicaciones de estudio
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Busan, Corea, república de, 602-739
- Reclutamiento
- Pusan National University Hospital
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Contacto:
- Jung Seop Eom, Master
- Número de teléfono: +821020810859
- Correo electrónico: ejspulm@gmail.com
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Contacto:
- Jeong Ha Mok, Master
- Número de teléfono: +820185196183
- Correo electrónico: mokgamokga@gmail.com
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Criterios de participación
Los investigadores buscan personas que se ajusten a una determinada descripción, denominada criterio de elegibilidad. Algunos ejemplos de estos criterios son el estado de salud general de una persona o tratamientos previos.
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
18 años y mayores (Adulto, Adulto Mayor)
Acepta Voluntarios Saludables
No
Géneros elegibles para el estudio
Todos
Descripción
Criterios de inclusión:
- Pacientes con adenopatías intratorácicas aisladas
Criterio de exclusión:
- Sospecha de cáncer de pulmón primario en la tomografía computarizada o la tomografía por emisión de positrones
- Sospecha de tuberculosis pulmonar en TAC o PET
- Sospecha de sarcoidosis de parénquima pulmonar en TAC o PET
Plan de estudios
Esta sección proporciona detalles del plan de estudio, incluido cómo está diseñado el estudio y qué mide el estudio.
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Diagnóstico
- Asignación: No aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación de un solo grupo
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Experimental: PCR anidada para tejidos fijados en formalina
En todos los pacientes, la reacción en cadena de la polimerasa anidada para Mycobacterium tuberculosis se realiza con muestras incluidas en parafina y fijadas con formalina obtenidas mediante aspiración con aguja transbronquial guiada por ecografía endobronquial.
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Para la PCR anidada, los tejidos incluidos en parafina y fijados con formalina se incubaron en 1 ml de xileno a 60 °C durante 30 min y luego se centrifugaron durante 10 min.
La parafina y el sobrenadante se eliminaron de las muestras después de la centrifugación.
Se repitieron los mismos procedimientos hasta completar la desparafinización.
Después de agregar 1 mL de alcohol, las muestras se centrifugaron durante 5 min y se eliminó el sobrenadante.
A continuación, la muestra se secó al aire como un sedimento.
El ADN se extrajo usando QIAamp (Qiagen, Valencia, CA, EE. UU.).
Las amplificaciones por PCR se realizaron utilizando cebadores de Mycobacterium tuberculosis IS6110.
La primera ronda con cebadores externos y la segunda ronda con cebadores internos amplificaron un fragmento de 256 y 181 pb, respectivamente.
Finalmente, los productos de la PCR se visualizaron en un gel de agarosa al 2%.
Otros nombres:
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Experimental: PCR anidada para tejidos frescos
En todos los pacientes, la reacción en cadena de la polimerasa anidada para Mycobacterium tuberculosis se realiza con muestras en solución salina estéril obtenida mediante aspiración con aguja transbronquial guiada por ecografía endobronquial.
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Para la PCR anidada con muestras en solución salina estéril, el ADN se extrajo con QIAamp (Qiagen, Valencia, CA, EE. UU.).
Las amplificaciones por PCR se realizaron utilizando cebadores de Mycobacterium tuberculosis IS6110.
La primera ronda con cebadores externos y la segunda ronda con cebadores internos amplificaron un fragmento de 256 y 181 pb, respectivamente.
Finalmente, los productos de la PCR se visualizaron en un gel de agarosa al 2%.
Otros nombres:
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Experimental: PCR en tiempo real para tejidos frescos
En todos los pacientes, la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real para Mycobacterium tuberculosis se realiza con muestras en solución salina estéril obtenida mediante aspiración con aguja transbronquial guiada por ecografía endobronquial.
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Para la PCR en tiempo real, las muestras en solución salina estéril se filtraron y se añadió 1 ml de solución salina a base de fosfato.
Después de centrifugar durante 3 min, se eliminó el sobrenadante.
A continuación, se añadieron a la muestra 50 μL de tampón de extracción y la muestra se calentó a 100 °C durante 20 min.
Después de centrifugar durante 3 min, el sobrenadante se usó en PCR.
La PCR en tiempo real se realizó con el kit de PCR en tiempo real AdvanSure TB/NTM.
Se utilizaron tres canales en la reacción de PCR en tiempo real (complejo Mycobacterium tuberculosis, micobacterias y control interno).
Se midieron las señales de FAM, HEX y Cy5 en cada canal.
Se consideró Mycobacterium tuberculosis presente si el umbral de ciclo de rpoB era inferior a 35 en cada señal y superior o equivalente al de IS6110.
Otros nombres:
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Número de participantes que detectaron cada reacción en cadena de la polimerasa para Mycobacterium tuberculosis
Periodo de tiempo: 6 meses
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En todos los participantes con linfadenopatía intratorácica aislada, se realizan tres modalidades de TB-PCR (PCR anidada para tejidos incluidos en parafina y fijados con formalina, PCR anidada para tejidos frescos y PCR en tiempo real para tejidos frescos) utilizando muestras EBUS-TBNA.
Se recopilan los números de participantes que informaron como positivos para cada modalidad de TB-PCR.
A partir de estos datos, se calculará la sensibilidad, la especificidad y la precisión diagnóstica de cada modalidad de TB-PCR para diagnosticar la linfadenitis tuberculosa.
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6 meses
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Colaboradores e Investigadores
Aquí es donde encontrará personas y organizaciones involucradas en este estudio.
Patrocinador
Investigadores
- Investigador principal: Jeong Ha Mok, Master, Pusan National University Hospital
- Investigador principal: Jung Seop Eom, Master, Pusan National University Hospital
Publicaciones y enlaces útiles
La persona responsable de ingresar información sobre el estudio proporciona voluntariamente estas publicaciones. Estos pueden ser sobre cualquier cosa relacionada con el estudio.
Publicaciones Generales
- Sun J, Teng J, Yang H, Li Z, Zhang J, Zhao H, Garfield DH, Han B. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in diagnosing intrathoracic tuberculosis. Ann Thorac Surg. 2013 Dec;96(6):2021-7. doi: 10.1016/j.athoracsur.2013.07.005. Epub 2013 Sep 12.
- Statement on sarcoidosis. Joint Statement of the American Thoracic Society (ATS), the European Respiratory Society (ERS) and the World Association of Sarcoidosis and Other Granulomatous Disorders (WASOG) adopted by the ATS Board of Directors and by the ERS Executive Committee, February 1999. Am J Respir Crit Care Med. 1999 Aug;160(2):736-55. doi: 10.1164/ajrccm.160.2.ats4-99. No abstract available.
- Navani N, Lawrence DR, Kolvekar S, Hayward M, McAsey D, Kocjan G, Falzon M, Capitanio A, Shaw P, Morris S, Omar RZ, Janes SM; REMEDY Trial Investigators. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration prevents mediastinoscopies in the diagnosis of isolated mediastinal lymphadenopathy: a prospective trial. Am J Respir Crit Care Med. 2012 Aug 1;186(3):255-60. doi: 10.1164/rccm.201203-0393OC. Epub 2012 May 31.
- Navani N, Molyneaux PL, Breen RA, Connell DW, Jepson A, Nankivell M, Brown JM, Morris-Jones S, Ng B, Wickremasinghe M, Lalvani A, Rintoul RC, Santis G, Kon OM, Janes SM. Utility of endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in patients with tuberculous intrathoracic lymphadenopathy: a multicentre study. Thorax. 2011 Oct;66(10):889-93. doi: 10.1136/thoraxjnl-2011-200063. Epub 2011 Aug 3.
- Bezabih M, Mariam DW, Selassie SG. Fine needle aspiration cytology of suspected tuberculous lymphadenitis. Cytopathology. 2002 Oct;13(5):284-90. doi: 10.1046/j.1365-2303.2002.00418.x.
Fechas de registro del estudio
Estas fechas rastrean el progreso del registro del estudio y los envíos de resultados resumidos a ClinicalTrials.gov. Los registros del estudio y los resultados informados son revisados por la Biblioteca Nacional de Medicina (NLM) para asegurarse de que cumplan con los estándares de control de calidad específicos antes de publicarlos en el sitio web público.
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio
1 de julio de 2015
Finalización primaria (Anticipado)
1 de diciembre de 2018
Finalización del estudio (Anticipado)
1 de diciembre de 2018
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
8 de julio de 2015
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
13 de julio de 2015
Publicado por primera vez (Estimar)
14 de julio de 2015
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Estimar)
20 de julio de 2015
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
16 de julio de 2015
Última verificación
1 de julio de 2015
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
- Infecciones
- Trastornos linfoproliferativos
- Enfermedades linfáticas
- Infecciones bacterianas
- Infecciones bacterianas y micosis
- Infecciones por bacterias grampositivas
- Infecciones por Actinomycetales
- Infecciones por micobacterias
- Tuberculosis
- Linfadenopatía
- Sarcoidosis
- Agentes antiinfecciosos
- Desinfectantes
- Formaldehído
Otros números de identificación del estudio
- PNUH-P-1
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
No
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
No
producto fabricado y exportado desde los EE. UU.
No
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