CIN 研究シリーズ 5.0 の予測因子: 膣自己サンプルの安定性研究 (Predictors50)

背景 子宮頸がんは、高リスク型ヒトパピローマウイルス (Hr-HPV) の持続感染によって引き起こされますが、早期に検出できれば予防できます。 定期的な子宮頸部スクリーニングによる予防は、伝統的に、臨床医が採取した細胞を検査して異常な特徴を特定する液体ベースの細胞診サンプリングによって行われてきました。 別の方法は、細胞診と同じ液体ベースのサンプルに対して実行される HPV 検査です。 HPV DNA検査は、子宮頸部スクリーニングのための細胞診よりも感度は高いが、特異性は低く、どちらの検査も女性に広く受け入れられている(Forrest, McCaffery et al. 2004; Waller, McCaffery et al. 2006; Szarewski, Cadman et al. 2009)。 臨床医が採取したサンプルがゴールドスタンダードですが、自己サンプリングも有用な代替手段となる可能性があります。 自己採取（SC）サンプルを使用した HPV DNA 検査は、臨床医が採取したサンプルと比較して、HPV 検査として許容できる感度と特異性を有することが示されています（Petignat, Faltin et al. 2007; Szarewski, Cadman et al. 2007; Arbyn, Verdoodt et al. al. 2014)。 HPV DNA 検出に関する自己サンプルと臨床医サンプル間の高レベルの一致率 0.87 (95% 信頼区間 (CI)、0.82-0.91) は、Petignat の体系的レビューとメタ分析で示されました (Petignat, Faltin et al. 2007)。 HPV DNA 検査は十分に確立されていますが、より新しい HPV 検査技術が利用可能になり、出現しています。

HPV DNA 検査は、液体培地 (通常は標本輸送培地 (STM) または PreservCyt) で収集された子宮頸部サンプルに対して行われるのが最も一般的です。 ただし、これは家庭用 SC サンプルには理想的ではありません。液体の生体サンプルの郵送には制限があることが多く、輸送媒体自体に関するリスク (低いとはいえ)、液体の冷蔵に関する問題などが考えられます。 液体輸送媒体（特にその後の冷却）の必要性がなくなると、SC サンプリングの利用しやすさが大幅に向上し、コストが削減されます。 これにより、定期的かつ頻繁な郵便集荷や冷蔵保管施設が不足しているなど、物流上の問題がある地域で子宮頸がん検診が行われる可能性も高まるでしょう。

HPV DNA 検出のための乾燥サンプル収集を調査した研究がいくつかあります (Shah, Daniel et al. 2001; Krech, Castriciano et al. 2009; Feng, Cherne et al. 2010; Cerigo, Coutlee et al. 2012; Darlin, Borgfeldt et al. 2013; Eperon、Vassilakos et al. 2013)。 ただし、冷凍に関する方法論と要件が異なるため、結果の一般化が制限されています。 彼らはまた、乾式収集装置上のサンプルが、特に高温下でどのくらいの期間生存可能であるかという問題にも取り組んでいない。

理論的根拠とリスク/利点 少なくとも温帯気候で​​は、乾いた綿棒を使用した皮下サンプルからの HPV DNA 検査は、湿った綿棒 (皮下サンプルが液体の検体輸送媒体に置かれている場合) と同様の感度を提供することを示す証拠が増えています (Wolfrum、 Koutsky 他、2012)。 乾式輸送により、SCサンプルからのHPV DNA検査がより利用しやすく、広く利用可能になる可能性があります。 たとえば英国では、液体が含まれない場合は郵便梱包が簡素化されます。 HPV 一次スクリーニングは臨床試験で研究されており、一部のスクリーニング プログラムにも導入されています。 例えばオランダでは、一次スクリーニングプログラムにおけるSC HPV DNA検査が2016年に不参加者に導入される予定である(Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014)。

この安定性研究の理論的根拠は、乾燥条件下で保管された SC サンプルが、暖かい条件下に一定期間放置された場合でも依然として有用であるかどうかを確認することです。 これは、子宮頸がんの発生率と死亡率が最も高い多くの低・中所得国で特に役立つと考えられます。 これらの国では、インフラ、効率的な冷蔵設備、郵便サービスの不足により、国家的な子宮頸がん検診プログラムを立ち上げることが非常に困難であることがよくあります。

Bart's Health National Health Service (NHS) Trust は、ロンドン市内のさまざまな社会経済的および民族的背景を持つ多様な人々にサービスを提供しています。 コルポスコピークリニック (以前はバーツ病院にありましたが、2015 年春にロイヤル ロンドン病院に移転) には、年間約 1,050 人の新規女性が来院し、1,900 人の女性がフォローアップのために来院しています。 このプロジェクトへの参加は、参加に同意した女性の継続的なケアに影響を与えるものではありません。 これまでの研究や、英国におけるクラミジア・トラコマチスなどの他の英国ベースのスクリーニングプログラムでは、女性自身による綿棒の使用は実現可能で安全であることが示されています。

訪問前の3か月以内および訪問後最大6か月以内の組織学および細胞学の結果が収集されます。 疾患のグレードに応じて結果に違いが生じる可能性があり、この情報によって確認または除外されます。

試験設計 この研究は、膣鏡検査サービスから 60 人の女性を登録し、2 つの乾燥植毛綿棒と CE マーク付きデバイス HerSwabTM (Eve Medical、トロント、カナダ) で採取した SC サンプルを比較することを目的とした小規模な準備プロジェクトです。 各女性は 3 つのサンプルすべてを採取します。 スワブはすべて直ちに冷蔵され、サンプルを保存するために -20°C (SR0) で即座に凍結されるか、または 25°C で 1 週間 (SA1) または 2 週間 (SA2) 培養されます。 HerSwab サンプルは、研究のインキュベーション部分 (HA1 および HA2) に含まれます。 サンプリングの順序は、検査順序に関連するバイアスを除去するためにランダム化され、ほぼ同数の 1 番目、2 番目、および 3 番目のスワブが各スワブ管理レジメンに割り当てられます。 この研究は、異なる装置、異なる条件下、異なる HPV 検査アッセイを使用した SC HPV 検査を比較することを全体的な目的とした多段階研究に先立って情報を提供します。

実現可能性 2013 年 1 月 1 日から 2013 年 12 月 31 日までの期間に、1,052 人の新規患者が Bart のコルポスコピー ユニットを受診しました。 同じ期間に 1930 人がフォローアップの膣鏡検査または治療を受けました。これは、12 か月間で 2982 人の女性が膣鏡検査を受けたことを意味します。 したがって、研究に参加できる可能性のある十分な数の女性が存在する。 ロイヤル・ロンドン病院に移転しても、このサービスは引き続きこれらの紹介を受け取ります。

無作為化手順 無作為化は社内のコンピュータ アプリケーションを使用して実行されます。 がん予防センターは、参加者番号 (PNO) とパック番号およびサンプリングの順序を識別するコードをリンクするランダム化リストを生成します。 順序は、乾燥植毛綿棒（研究室到着時に凍結用）（SR0）、乾燥植毛綿棒（研究室到着時に 25℃で 1 週間（SA1）または 2 週間インキュベート用（SA2））に 1:1:1 でランダム化されます。研究室）、または HerSwab（研究室到着後 25 ℃で 1 週間（HA1）または 2 週間（HA2）インキュベート）（研究スキーム図を参照）。 PNO は、サンプルを採取する順序を示すラベルが付いた 3 つのセルフサンプル キットを含む番号付きパックに割り当てられます。 参加に同意した60人の女性には、クリニックに通い、研究に同意した限り、可能な限り順番に次のパックが投与されます。 すべてのサンプルは、臨床検査室に移送されるまで直ちにクリニック内で 2 ～ 8°C で冷蔵されます。

各訪問の介入スケジュール 評価 訪問 1 3 つの自己サンプルを採取 x

研究機器 女性は、2 つの乾燥植毛綿棒と CE マーク付き機器 HerSwabTM (Eve Medical、トロント、カナダ) を使用して 3 つの膣サンプルを自己採取するように求められます。 HerSwab は、女性にとってセルフサンプリングを容易にすることを目的として、プラスチックのアプリケーター内に収められた植毛綿棒を利用しています。

データ収集手順 子宮頸部または膣の細胞診および組織学のデータは、コルポスコピーサービスを受けるきっかけとなった紹介細胞診の結果から、予約日から最長 6 か月以内に収集されます。 すべての研究データの入力と管理はがん予防センターで行われます。

すべての HPV、細胞学、および組織学の結果は、がん予防センター (CCP) 研究チームによって研究の ORACLE データベースに入力またはインポートされます。 すべてのデータベースは保護されており、指名されたスタッフのみがアクセスできます。

同意書は CCP で安全に保管されます。

研究室評価 すべてのサンプルからの定量的ポリメラーゼ連鎖反応 (qPCR) アッセイによるヒト DNA の抽出と検出。

すべてのサンプルからの qPCR アッセイによる HPV DNA (主に HPV 16) の抽出と検出。

すべてのサンプルからの検証済み HPV 検査により CT または RLU 値が得られます。

研究終了の定義 研究終了は、最後に募集された参加者について最終的な組織学および細胞学データが収集された時点として定義されます。 これは、最後の新入社員が訪問した日から約 8 か月後になります。 8 か月あれば、データが病院のデータベースに入力されるまでに時間がかかります。