CIN-tutkimussarjan ennustajat 5.0: Vaginaalisten omanäytteiden vakaustutkimus (Predictors50)

Tausta Kohdunkaulan syövän aiheuttaa jatkuva infektio korkean riskin ihmisen papilloomavirustyypeillä (Hr-HPV), mutta se voidaan estää, jos se havaitaan varhaisessa vaiheessa. Ennaltaehkäisy rutiininomaisella kohdunkaulan seulonnalla tehdään perinteisesti nestepohjaisella sytologisella näytteenotolla, jossa kliinikon keräämät solut tutkitaan poikkeavien piirteiden tunnistamiseksi. Toinen menetelmä on HPV-testaus, joka suoritetaan samoilla nestepohjaisilla näytteillä kuin sytologiassa. HPV-DNA-testaus on herkempi, mutta vähemmän spesifinen kuin sytologia kohdunkaulan seulonnassa, ja molemmat testit ovat yleisesti ottaen hyväksyttäviä naisille (Forrest, McCaffery ym. 2004; Waller, McCaffery ym. 2006; Szarewski, Cadman ym. 2009). Vaikka kliinikon ottamat näytteet ovat kultastandardi, itsenäyte voi olla hyödyllinen vaihtoehto. HPV-DNA-testauksella itse kerätyillä (SC) näytteillä on osoitettu olevan hyväksyttävä herkkyys ja spesifisyys HPV-testaukseen verrattuna kliinikon ottamiin näytteisiin (Petignat, Faltin ym. 2007; Szarewski, Cadman ym. 2007; Arbyn, Verdoodt et al. al. 2014). Korkea vastaavuustaso oman ja lääkärin näytteen välillä HPV DNA:n havaitsemiseksi 0,87 (95 %:n luottamusvälit (CI), 0,82-0,91) Se esitettiin Petignatin systemaattisessa katsauksessa ja meta-analyysissä (Petignat, Faltin et al. 2007). HPV-DNA-testaus on vakiintunutta, mutta uudempia HPV-testaustekniikoita on saatavilla ja niitä on tulossa.

HPV DNA-testaus on yleisimmin tehty kohdunkaulan näytteille, jotka on kerätty nestemäiseen väliaineeseen (yleensä näytteenkuljetusalusta (STM) tai PreservCyt). Tämä ei kuitenkaan ole ihanteellinen kodin SC-näytteille, koska nesteessä olevien biologisten näytteiden postittamiseen liittyy usein rajoituksia, itse kuljetusväliaineeseen liittyvät riskit (vaikkakin vähäiset) ja nesteen jäähdyttämiseen liittyvät ongelmat. Nestemäisen kuljetusväliaineen (ja erityisesti myöhemmän jäähdytyksen) tarpeen poistaminen parantaisi huomattavasti SC-näytteenoton saatavuutta ja alentaisi kustannuksia. Tämä lisäisi myös kohdunkaulan seulonnan mahdollisuuksia niillä alueilla, joilla saattaa olla logistisia vaikeuksia, kuten säännöllisten ja toistuvien postinkeräysten tai jäähdytettyjen varastotilojen puute.

On tehty useita tutkimuksia, joissa on tutkittu kuivanäytteen ottoa HPV DNA:n havaitsemiseksi (Shah, Daniel ym. 2001; Krech, Castriciano ym. 2009; Feng, Cherne ym. 2010; Cerigo, Coutlee ym. 2012; Darlin, Borgfeldt ym. 2013; Eperon, Vassilakos ym. 2013). Erilaiset menetelmät ja jäähdytysvaatimukset ovat kuitenkin rajoittaneet tulosten yleistettävyyttä. He eivät myöskään ole käsitelleet kysymystä siitä, kuinka kauan kuivakeräyslaitteessa oleva näyte säilyy elinkelpoisena, etenkään korkeammissa lämpötiloissa.

Perustelut ja riskit/hyödyt Todisteet viittaavat yhä useammin siihen, että ainakin lauhkeissa ilmastoissa HPV-DNA-testaus SC-näytteestä kuivalla vanupuikolla tarjoaa samanlaisen herkkyyden kuin märkä vanupuikko (jossa SC-näyte asetetaan nestemäiseen näytteensiirtoalustaan) (Wolfrum, Koutsky ym. 2012). Kuivakuljetus voisi tehdä HPV-DNA-testauksesta SC-näytteistä helpommin saatavilla ja laajemmin saatavilla. Esimerkiksi Isossa-Britanniassa postipakkaus on yksinkertaistettu, kun mukana ei ole nestettä. HPV:n primääriseulontaa tutkitaan kliinisissä tutkimuksissa ja se on jopa sisällytetty joihinkin seulontaohjelmiin. Esimerkiksi Hollannissa SC HPV:n DNA-testaus ensisijaisen seulontaohjelman puitteissa suunnitellaan otettavaksi käyttöön osallistumattomille vuonna 2016 (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014).

Tämän stabiilisuustutkimuksen tarkoituksena on varmistaa, ovatko kuivissa olosuhteissa pidetyt SC-näytteet edelleen hyödyllisiä, jos ne jätetään jonkin aikaa lämpimiin olosuhteisiin. Tämä olisi erityisen hyödyllistä monissa matala- ja keskituloisissa maissa, joissa kohdunkaulan syövän ilmaantuvuus ja kuolleisuus ovat korkeimmat. Näissä maissa on usein ollut erittäin vaikeaa perustaa kansallisia kohdunkaulan seulontaohjelmia infrastruktuurin, tehokkaan jäähdytyksen ja postipalvelujen puutteen vuoksi.

Bart's Health National Health Service (NHS) Trust palvelee monenlaista väestöä erilaisista sosioekonomisista ja etnisistä taustoista Lontoon sisäosassa. Kolposkopiaklinikalla (joka oli Bartin sairaalassa, mutta joka siirtyy Royal London Hospitaliin keväällä 2015) on vuosittain noin 1 050 uutta naista ja 1 900 naista seurannassa. Osallistuminen tähän hankkeeseen ei vaikuta minkään osallistumaan suostuvan naisen jatkuvaan hoitoon. Aiemmissa tutkimuksissa ja muissa Yhdistyneessä kuningaskunnassa (Yhdistynyt kuningaskunta) perustuvissa seulontaohjelmissa Yhdistyneessä kuningaskunnassa, kuten Chlamydia trachomatis, on osoitettu, että naiset itse käyttävät vanupuikkoja on mahdollista ja turvallista.

Histologiset ja sytologiset tulokset kerätään kolmen kuukauden ajalta ennen käyntiä ja kuuden kuukauden ajalta käynnin jälkeen. Tuloksissa voi olla eroja sairauden asteesta riippuen, ja tämä vahvistetaan tai suljetaan pois näillä tiedoilla.

Kokeen suunnittelu Tämä tutkimus on pieni valmisteleva projekti, jonka tavoitteena on ottaa mukaan 60 naista kolposkopiapalvelusta ja vertailla heidän SC-näytteitään, jotka on otettu kahdella kuivalla flokoidulla vanupuikolla ja CE-merkityllä laitteella HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Kanada). Jokainen nainen ottaa kaikki kolme näytettä. Kaikki pyyhkäisynäytteet jäähdytetään välittömästi ja sitten joko pakastetaan välittömästi -20 ºC:seen (SR0) näytteen säilyttämiseksi tai inkuboidaan 25 ºC:ssa joko yhden (SA1) tai kahden viikon ajan (SA2). HerSwab-näytteet sisällytetään tutkimuksen inkubointiosaan (HA1 ja HA2). Näytteenottojärjestys satunnaistetaan testausjärjestykseen liittyvien poikkeamien poistamiseksi, ja suunnilleen yhtä suuri määrä ensimmäistä, toista ja kolmatta vanupuikkoa jaetaan kullekin vanupuikkokäsittelyohjelmalle. Tutkimus edeltää ja pohjautuu monivaiheiseen tutkimukseen, jonka yleisenä tavoitteena on verrata SC HPV-testausta eri laitteilla, eri olosuhteissa ja erilaisilla HPV-testausmäärityksillä.

Toteutettavuus Ajanjaksolla 1.1.2013-31.12.2013 Bartin kolposkopiaosastolla kävi 1052 uutta potilasta. Samaan aikaan vuonna 1930 osallistui kolposkopiaan tai hoitoon. Tämä tarkoittaisi, että 12 kuukauden aikana 2982 naista osallistui kolposkopiaan. Siksi on olemassa riittävä määrä naisia, jotka voidaan mahdollisesti värvätä tutkimukseen. Palvelu saa edelleen nämä lähetteet, kun se siirtyy Royal London Hospitaliin.

Satunnaistusmenettelyt Satunnaistukset suoritetaan käyttämällä talon sisäistä tietokonesovellusta. Syövänehkäisykeskus luo satunnaistetun luettelon, joka yhdistää osallistujanumerot (PNO:t) pakkausnumeroon ja näytteenottojärjestyksen tunnistavaan koodiin. Tilaus satunnaistetaan suhteessa 1:1:1 kuivaan flokoituun vanupuikkoon (pakastettaviksi laboratorioon saapuessaan) (SR0), kuivaan flokoituun vanupuikkoon (inkubointiin 25 ºC:ssa yhden (SA1) tai kahden viikon ajan (SA2) saapuessa laboratorioon. laboratorio) tai HerSwab (inkubointiin 25 ºC:ssa yhden (HA1) tai kahden viikon (HA2) ajan laboratorioon saapumisen jälkeen) (katso tutkimuskaaviokaavio). PNO:t osoitetaan numeroituihin pakkauksiin, jotka sisältävät kolme omanäytesarjaa, jotka on merkitty osoittamaan näytteenottojärjestyksen. 60 naiselle, jotka suostuvat osallistumaan, annetaan seuraava pakkaus peräkkäisessä järjestyksessä, mikäli mahdollista, kun he käyvät klinikalla ja suostuvat tutkimukseen. Kaikki näytteet jäähdytetään välittömästi 2-8 ºC:seen klinikalla laboratorioon siirtämiseen asti.

Interventioaikataulu jokaiselle käynnille Arviointikäynti 1 Kolme omaa näytettä x

Tutkimuslaitteet Naisia ​​pyydetään ottamaan itse kolme emättimen näytettä käyttämällä kahta kuivaa flokoitua vanupuikkoa ja CE-merkittyä HerSwabTM-laitetta (Eve Medical, Toronto, Kanada). HerSwab käyttää muovisessa applikaattorissa olevaa vanupuikkoa, jonka tarkoituksena on helpottaa naisten omaa näytteenottoa.

Tietojen keräämismenettely Kohdunkaulan tai emättimen sytologia- ja histologiset tiedot kerätään lähetesytologian tuloksista, jotka johtivat heidän osallistumiseensa kolposkopiapalveluun kuuden kuukauden kuluessa vastaanottopäivästä. Kaikki tutkimustietojen syöttö ja hallinta suoritetaan Syövänehkäisykeskuksessa.

Center for Cancer Prevention (CCP) -tutkimusryhmä syöttää kaikki HPV-, sytologia- ja histologian tulokset tutkimuksen ORACLE-tietokantaan tai tuodaan siihen. Kaikki tietokannat ovat suojattuja, ja niihin pääsevät vain nimetyt henkilöt.

Suostumuslomakkeet säilytetään turvallisesti CCP:ssä.

Laboratorioarvioinnit Ihmisen DNA:n uuttaminen ja havaitseminen kvantitatiivisella polymeraasiketjureaktiomäärityksellä (qPCR) kaikista näytteistä.

HPV-DNA:n (ensisijaisesti HPV 16:n) uuttaminen ja havaitseminen qPCR-määrityksellä kaikista näytteistä.

Validoitu HPV-testi kaikista näytteistä, jotka tuottavat CT- tai RLU-arvot.

Tutkimuksen lopun määritelmä Tutkimuksen lopuksi määritettäisiin silloin, kun lopulliset histologiset ja sytologiset tiedot kerättiin viimeisestä rekrytoidusta osallistujasta. Tämä olisi noin kahdeksan kuukautta viimeisen värvätyn vierailun jälkeen. Kahdeksan kuukautta antaisi aikaa tietojen syöttämiselle sairaalan tietokantaan.