Predictores de CIN Study Series 5.0:Estudio de estabilidad en automuestras vaginales (Predictors50)

Fondo El cáncer de cuello uterino es causado por una infección persistente con tipos de virus del papiloma humano de alto riesgo (Hr-HPV), pero se puede prevenir si se detecta en una etapa temprana. La prevención a través de la detección sistemática del cuello uterino se realiza tradicionalmente con muestras de citología de base líquida, donde las células recolectadas por los médicos se examinan para identificar características anormales. Otro método es la prueba de VPH realizada en las mismas muestras de base líquida que para la citología. La prueba de ADN del VPH es más sensible, pero menos específica, que la citología para la detección del cuello uterino y ambas pruebas son ampliamente aceptables para las mujeres (Forrest, McCaffery et al. 2004; Waller, McCaffery et al. 2006; Szarewski, Cadman et al. 2009). Aunque las muestras tomadas por el médico son el estándar de oro, el automuestreo puede ser una alternativa útil. Se ha demostrado que las pruebas de ADN del VPH que utilizan muestras auto-recolectadas (SC) tienen una sensibilidad y especificidad aceptables para las pruebas de VPH en comparación con las muestras tomadas por los médicos (Petignat, Faltin et al. 2007; Szarewski, Cadman et al. 2007; Arbyn, Verdoodt et al. otros 2014). Un alto nivel de concordancia entre la muestra propia y la del médico para la detección de ADN del VPH de 0,87 (intervalos de confianza (IC) del 95 %, 0,82-0,91) se mostró en la revisión sistemática y el metanálisis de Petignat (Petignat, Faltin et al. 2007). La prueba de ADN del VPH está bien establecida, pero las nuevas tecnologías de prueba del VPH están disponibles y están surgiendo.

La prueba de ADN del VPH se ha realizado con mayor frecuencia en muestras de cuello uterino recolectadas en un medio líquido (generalmente medio de transporte de muestras (STM) o PreservCyt). Sin embargo, esto no es ideal para las muestras caseras de SC porque a menudo hay restricciones en el envío de muestras biológicas en líquido, riesgos (aunque bajos) relacionados con el medio de transporte en sí y problemas relacionados con la refrigeración del líquido. La eliminación de la necesidad de un medio de transporte líquido (y especialmente cualquier refrigeración posterior) mejoraría en gran medida la accesibilidad del muestreo SC y reduciría los costos. Esto también aumentaría el potencial para el tamizaje cervical en aquellas áreas donde puede haber dificultades logísticas, como la falta de recolecciones postales regulares y frecuentes o instalaciones de almacenamiento refrigerado.

Ha habido varios estudios que han investigado la recolección de muestras secas para la detección de ADN del VPH (Shah, Daniel et al. 2001; Krech, Castriciano et al. 2009; Feng, Cherne et al. 2010; Cerigo, Coutlee et al. 2012; Darlin, Borgfeldt et al. 2013; Eperon, Vassilakos et al. 2013). Sin embargo, las diferentes metodologías y requisitos para la refrigeración han restringido la generalización de los resultados. Tampoco han abordado la cuestión de cuánto tiempo permanecería viable la muestra en el dispositivo de recolección en seco, especialmente a temperaturas más altas.

Justificación y riesgos/beneficios La evidencia sugiere cada vez más que, al menos en climas templados, la prueba de ADN del VPH de una muestra SC con un hisopo seco proporciona una sensibilidad similar a la de un hisopo húmedo (donde la muestra SC se coloca en un medio de transporte de muestras líquido) (Wolfrum, Koutsky et al. 2012). El transporte en seco podría hacer que las pruebas de ADN del VPH a partir de muestras SC sean más accesibles y ampliamente disponibles. En el Reino Unido, por ejemplo, el embalaje postal se simplifica cuando no se trata de líquido. La detección primaria del VPH se está explorando en ensayos clínicos e incluso se está introduciendo en algunos programas de detección. En los Países Bajos, por ejemplo, la prueba de ADN SC HPV dentro del programa de detección primaria está planificada para su introducción para los no asistentes en 2016 (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014).

El fundamento de este estudio de estabilidad es determinar si las muestras SC conservadas en condiciones secas seguirán siendo útiles si se dejan durante un período de tiempo en condiciones cálidas. Esto sería de particular utilidad en muchos países de ingresos bajos y medianos donde la incidencia y la mortalidad por cáncer de cuello uterino son más altas. Estos países con frecuencia han tenido muchas dificultades para establecer programas nacionales de tamizaje cervical debido a la falta de infraestructura, acceso a refrigeración eficiente y un servicio postal.

Bart's Health National Health Service (NHS) Trust atiende a una población diversa de una variedad de orígenes socioeconómicos y étnicos en el centro de Londres. La clínica de colposcopia (que estaba en el Bart's Hospital pero se traslada al Royal London Hospital en la primavera de 2015) tiene aproximadamente 1050 mujeres nuevas que asisten y 1900 mujeres que asisten para seguimiento por año. La participación en este proyecto no tendrá implicaciones para el cuidado continuo de cualquier mujer que acepte participar. En estudios anteriores y en otros programas de detección basados ​​en el Reino Unido (RU), como para Chlamydia trachomatis, se ha demostrado que el uso de hisopos por parte de las propias mujeres es factible y seguro.

Se recopilarán los resultados de histología y citología dentro de los tres meses anteriores a la visita y hasta seis meses después de la visita. Puede haber una diferencia en los resultados según el grado de la enfermedad y esto se confirmará o excluirá con esta información.

Diseño del ensayo Este estudio es un pequeño proyecto preparatorio que tiene como objetivo inscribir a 60 mujeres de un servicio de colposcopia y comparar sus muestras SC tomadas con dos hisopos flocados secos y el dispositivo con marca CE HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Canadá). Cada mujer tomará las tres muestras. Todos los hisopos se refrigerarán inmediatamente y luego se congelarán inmediatamente a -20 ºC (SR0) para conservar la muestra o se incubarán a 25 ºC durante una (SA1) o dos semanas (SA2). Las muestras de HerSwab se incluirán en la parte de incubación del estudio (HA1 y HA2). El orden de muestreo será aleatorio para eliminar cualquier sesgo asociado con el orden de las pruebas y se asignará un número aproximadamente igual de primeros, segundos y terceros hisopos a cada régimen de manejo de hisopos. El estudio precederá e informará un estudio de varias fases con el objetivo general de comparar las pruebas de VPH SC utilizando diferentes dispositivos, en diferentes condiciones y usando diferentes ensayos de prueba de VPH.

Viabilidad En el período del 1 de enero de 2013 al 31 de diciembre de 2013, 1052 nuevos pacientes acudieron a la unidad de colposcopia de Bart. En el mismo período de tiempo, 1930 asistieron para una colposcopia de seguimiento o tratamiento. Esto significaría que durante un período de 12 meses, 2982 mujeres asistieron a una colposcopia. Por lo tanto, hay un número suficiente de mujeres que potencialmente pueden ser reclutadas para el estudio. El servicio seguirá recibiendo estas derivaciones cuando se traslade al Royal London Hospital.

Procedimientos de aleatorización Las aleatorizaciones se llevarán a cabo utilizando una aplicación informática interna. El Centro para la Prevención del Cáncer generará una lista aleatoria que vinculará los números de participantes (PNO) con un número de paquete y un código que identifique el orden de muestreo. El orden se aleatorizará 1:1:1 a hisopo flocado seco (para congelar a la llegada al laboratorio) (SR0), hisopo flocado seco (para incubar a 25ºC durante una (SA1) o dos semanas (SA2) a la llegada al laboratorio laboratorio) o HerSwab (para incubación a 25 ºC durante una (HA1) o dos semanas (HA2) al llegar al laboratorio) (consulte el Diagrama del esquema del estudio). Los PNO se asignarán a paquetes numerados que contengan tres kits de automuestra, etiquetados para mostrar el orden en que se deben tomar las muestras. A las 60 mujeres que den su consentimiento para participar se les entregará el siguiente paquete en orden secuencial en la medida de lo posible según asistan a la clínica y den su consentimiento para el estudio. Todas las muestras serán inmediatamente refrigeradas a 2-8ºC en clínica hasta su traslado al laboratorio.

Cronograma de intervención para cada visita Visita de evaluación 1 Toma de tres automuestras x

Dispositivos de estudio Se pedirá a las mujeres que recolecten por sí mismas tres muestras vaginales utilizando dos hisopos flocados secos y el dispositivo con la marca CE HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Canadá). HerSwab utiliza un hisopo flocado contenido dentro de un aplicador de plástico, con la intención de facilitar el auto-muestreo para las mujeres.

Procedimiento de Recolección de Datos Los datos de citología e histología cervicouterina o vaginal serán recolectados a partir del resultado de la citología de referencia, que motivó su asistencia al servicio de colposcopía, hasta seis meses después de la fecha de la cita. Toda la entrada y gestión de datos del estudio se llevará a cabo en el Centro para la Prevención del Cáncer.

Todos los resultados de VPH, citología e histología serán ingresados ​​o importados a la base de datos ORACLE del estudio por el equipo de estudio del Centro para la Prevención del Cáncer (CCP). Todas las bases de datos están protegidas y solo son accesibles para el personal designado.

Los formularios de consentimiento se almacenarán de forma segura en CCP.

Evaluaciones de laboratorio Extracción y detección de ADN humano mediante un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR) de todas las muestras.

Extracción y detección de ADN de VPH (principalmente VPH 16) mediante un ensayo qPCR de todas las muestras.

Prueba de VPH validada de todas las muestras que arrojan valores CT o RLU.

Definición del final del estudio El final del estudio se definiría como el momento en que se recolectaron los datos finales de histología y citología para el último participante reclutado. Esto sería aproximadamente ocho meses después de la fecha de visita del último recluta. Ocho meses darían tiempo para ingresar los datos en la base de datos del hospital.