A CIN 5.0-s vizsgálati sorozat előrejelzői: Stabilitási vizsgálat hüvelyi önmintában (Predictors50)

Háttér A méhnyakrákot a magas kockázatú humán papillomavírus típusok (Hr-HPV) tartós fertőzése okozza, de megelőzhető, ha korai stádiumban észlelik. A rutin méhnyakszűréssel történő megelőzés hagyományosan folyadékalapú citológiai mintavétellel történik, ahol a klinikusok által gyűjtött sejteket megvizsgálják a kóros jellemzők azonosítása érdekében. Egy másik módszer a HPV-teszt, amelyet ugyanazokon a folyadékalapú mintákon végeznek, mint a citológiai vizsgálatot. A HPV DNS-teszt érzékenyebb, de kevésbé specifikus, mint a méhnyakszűrés citológiája, és mindkét teszt nagyjából elfogadható a nők számára (Forrest, McCaffery et al. 2004; Waller, McCaffery et al. 2006; Szarewski, Cadman és mtsai 2009). Bár a klinikus által vett minták az arany standard, az önmintavétel hasznos alternatíva lehet. Az önállóan gyűjtött (SC) mintákkal végzett HPV DNS-teszt elfogadható szenzitivitással és specificitással rendelkezik a HPV-teszthez képest a klinikusok által vett mintákhoz képest (Petignat, Faltin és mtsai 2007; Szarewski, Cadman és mtsai 2007; Arbyn, Verdoodt et al. al. 2014). Magas szintű konkordancia a saját és a klinikus minta között a HPV DNS kimutatására: 0,87 (95%-os konfidencia intervallum (CI), 0,82-0,91) Petignat szisztematikus áttekintésében és metaanalízisében mutatkozott meg (Petignat, Faltin et al. 2007). A HPV DNS-tesztelés jól bevált, de újabb HPV-tesztelési technológiák állnak rendelkezésre és kialakulóban vannak.

A HPV DNS-tesztelést leggyakrabban folyékony közegben (általában Specimen Transport Medium (STM) vagy PreservCyt) gyűjtött méhnyakmintákon végezték. Ez azonban nem ideális otthoni SC-mintákhoz, mert gyakran korlátozások vannak a biológiai minták folyadékban történő postázásával kapcsolatban, magával a szállítóközeggel kapcsolatos kockázatok (bár alacsonyak), valamint a folyadék hűtésével kapcsolatos problémák. A folyékony szállítóközeg (és különösen az azt követő hűtés) szükségességének megszüntetése nagymértékben javítaná az SC mintavétel elérhetőségét és csökkentené a költségeket. Ez növelné a méhnyakszűrés lehetőségét azokon a területeken, ahol logisztikai nehézségek adódhatnak, például hiányzik a rendszeres, gyakori postai átvétel vagy a hűtött raktározás.

Számos tanulmány végezte a HPV DNS kimutatására szolgáló száraz mintagyűjtést (Shah, Daniel és mtsai. 2001; Krech, Castriciano és mtsai. 2009; Feng, Cherne és mtsai. 2010; Cerigo, Coutlee és mtsai. 2012; Darlin, Borgfeldt és mtsai 2013; Eperon, Vassilakos és mtsai 2013). Az eltérő hűtési módszerek és követelmények azonban korlátozták az eredmények általánosíthatóságát. Nem foglalkoztak azzal a kérdéssel sem, hogy a száraz gyűjtőeszközön lévő minta meddig marad életképes, különösen magasabb hőmérsékleten.

Indoklás és kockázatok/előnyök A bizonyítékok egyre inkább azt sugallják, hogy legalábbis mérsékelt éghajlaton az SC-mintából, száraz tampon használatával végzett HPV DNS-teszt hasonló érzékenységet biztosít, mint a nedves tampon (ahol az SC-mintát folyékony mintahordozó közegbe helyezik) (Wolfrum, Koutsky et al. 2012). A száraz szállítás elérhetőbbé és szélesebb körben elérhetővé teheti az SC-mintákból származó HPV DNS-tesztet. Az Egyesült Királyságban például a postai csomagolás egyszerűsödik, ha nincs benne folyadék. A HPV elsődleges szűrését klinikai vizsgálatok során kutatják, sőt egyes szűrőprogramokba is bevezetik. Hollandiában például az elsődleges szűrési programon belüli SC HPV DNS-tesztet 2016-ban tervezik bevezetni a nem részt vevők számára (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014).

Ennek a stabilitási vizsgálatnak az az oka, hogy megbizonyosodjon arról, hogy a száraz körülmények között tartott SC-minták hasznosak lesznek-e, ha egy ideig meleg körülmények között hagyják őket. Ez különösen hasznos lenne a sok alacsony és közepes jövedelmű országban, ahol a méhnyakrák előfordulása és halálozása a legmagasabb. Ezeknek az országoknak az infrastruktúra, a hatékony hűtéshez való hozzáférés és a postai szolgáltatások hiánya miatt gyakran nagyon nehézkesnek találták nemzeti méhnyak-szűrési programok létrehozását.

A Bart's Health National Health Service (NHS) Trust sokféle társadalmi-gazdasági és etnikai hátterű lakosságot szolgál ki London belső részén. A kolposzkópiás klinikán (amely a Bart's Kórházban volt, de 2015 tavaszán átköltözik a Royal London Kórházba) évente körülbelül 1050 új nő és 1900 nő vesz részt nyomon követésben. A projektben való részvétel semmilyen hatással nem lesz a részvételre hajlandó nők folyamatos gondozására. Korábbi tanulmányok és más, az Egyesült Királyságon (Egyesült Királyság) alapú szűrési programokban, például a Chlamydia trachomatis esetében kimutatták, hogy a tamponok használata a nők által megvalósítható és biztonságos.

A szövettani és citológiai eredményeket a látogatást megelőző három hónapon belül, valamint a látogatást követő hat hónapon belül összegyűjtik. A betegség súlyosságától függően eltérések lehetnek az eredményekben, és ezt ez az információ megerősíti vagy kizárja.

Próbatervezés Ez a tanulmány egy kis előkészítő projekt, amelynek célja 60 nő bevonása egy kolposzkópiás szolgálatból, és összehasonlítja a két száraz, bolyhos tamponnal és a CE-jelöléssel ellátott HerSwabTM készülékkel (Eve Medical, Toronto, Kanada) vett SC mintáikat. Minden nő mindhárom mintát veszi. A tamponokat azonnal lehűtik, majd vagy azonnal lefagyasztják -20 °C-ra (SR0) a minta megőrzése érdekében, vagy 25 °C-on inkubálják egy (SA1) vagy két hétig (SA2). A HerSwab minták a vizsgálat inkubációs részében (HA1 és HA2) szerepelnek. A mintavételi sorrendet véletlenszerűen választják ki, hogy kiküszöböljék a vizsgálati sorrendhez kapcsolódó torzításokat, és nagyjából azonos számú első, második és harmadik tampon kerül kiosztásra az egyes tamponkezelési rendekhez. A tanulmány egy többfázisú vizsgálatot előz meg, és egy többfázisú vizsgálatot alapoz meg, amelynek általános célja az SC HPV-teszt összehasonlítása különböző eszközökkel, különböző körülmények között és különböző HPV-tesztek alkalmazásával.

Megvalósíthatóság A 2013. január 1. és 2013. december 31. közötti időszakban 1052 új beteg vett részt a Bart kolposzkópos osztályán. Ugyanebben az időszakban 1930-ban kolposzkópiát vagy kezelést végeztek. Ez azt jelentené, hogy egy 12 hónapos időszak alatt 2982 nő vett részt kolposzkópián. Ezért elegendő számú nő van, akit potenciálisan be lehet vonni a vizsgálatba. A szolgálat továbbra is megkapja ezeket a beutalókat, amikor átköltözik a Royal London Kórházba.

Randomizálási eljárások A véletlenszerű besorolásokat egy belső számítógépes alkalmazás segítségével hajtják végre. A Rákmegelőzési Központ véletlenszerű listát hoz létre, amely összekapcsolja a résztvevői számokat (PNO-k) a csomagszámmal és a mintavételi sorrendet azonosító kóddal. A rendelést 1:1:1 arányban véletlenszerűen osztják ki száraz pelyhes törlőkendőre (a laboratóriumba érkezéskor fagyasztásra) (SR0), száraz pelyhes tamponra (25ºC-on történő inkubálásra egy (SA1) vagy két hétig (SA2) a laboratóriumba érkezéskor. laboratórium), vagy HerSwab (25ºC-on történő inkubáláshoz egy (HA1) vagy két hétig (HA2) a laboratóriumba érkezéskor) (lásd a Vizsgálati séma diagramot). A PNO-kat három önminta-készletet tartalmazó, számozott csomagokhoz rendelik, amelyek címkével jelzik a mintavétel sorrendjét. 60 nő, aki beleegyezik a részvételbe, megkapja a következő csomagot sorrendben, amennyire csak lehetséges, a klinikán járva és a vizsgálatba beleegyezésével. Minden mintát azonnal le kell hűteni 2-8ºC-ra a klinikán a laboratóriumba való szállításig.

A beavatkozás ütemezése minden látogatáshoz Értékelő látogatás 1. Három önminta vétele x

Vizsgálati eszközök A nőket arra kérik, hogy vegyenek maguktól három hüvelyi mintát két száraz, pelyhesített tampon és a CE-jelöléssel ellátott HerSwabTM készülék (Eve Medical, Toronto, Kanada) segítségével. A HerSwab egy műanyag applikátorban elhelyezett pelyhes törlőkendőt használ, azzal a szándékkal, hogy megkönnyítse az önmintavételt a nők számára.

Az adatgyűjtés menete A méhnyak- vagy hüvelycitológiai és szövettani adatokat a beutaló citológiai eredményből gyűjtik, amely a kolposzkópiás szolgálaton való részvételt eredményezte, az időpontot követő hat hónapig. Minden vizsgálati adatbevitel és kezelés a Rákmegelőzési Központban történik.

A Center for Cancer Prevention (CCP) vizsgálati csoportja minden HPV-vel, citológiai és szövettani eredményt beviszi vagy importál a tanulmány ORACLE adatbázisába. Minden adatbázis védett, és csak a megnevezett munkatársak számára érhető el.

A hozzájárulási űrlapokat a CCP biztonságosan tárolja.

Laboratóriumi értékelések Humán DNS kinyerése és kimutatása kvantitatív polimeráz láncreakciós (qPCR) vizsgálattal minden mintából.

A HPV DNS (elsősorban a HPV 16) extrakciója és kimutatása qPCR vizsgálattal minden mintából.

Validált HPV-teszt minden mintából, amely CT vagy RLU értékeket eredményez.

A vizsgálat végének meghatározása A vizsgálat végén a végső szövettani és citológiai adatokat gyűjtötték össze az utoljára felvett résztvevővel kapcsolatban. Ez körülbelül nyolc hónappal az utolsó toborzott látogatása után történik. Nyolc hónap engedne időt arra, hogy az adatok bekerüljenek a kórházi adatbázisba.