Predittori della serie di studi CIN 5.0: studio sulla stabilità negli autocampioni vaginali (Predictors50)

Sfondo Il cancro cervicale è causato da un'infezione persistente con tipi di papillomavirus umano ad alto rischio (Hr-HPV), ma può essere prevenuto se rilevato in una fase precoce. La prevenzione attraverso lo screening cervicale di routine viene tradizionalmente eseguita con campionamento citologico a base liquida in cui le cellule raccolte dai medici vengono esaminate per identificare le caratteristiche anomale. Un altro metodo è il test HPV eseguito sugli stessi campioni a base liquida della citologia. Il test del DNA dell'HPV è più sensibile, ma meno specifico, della citologia per lo screening cervicale ed entrambi i test sono ampiamente accettabili per le donne (Forrest, McCaffery et al. 2004; Waller, McCaffery et al. 2006; Szarewski, Cadman et al. 2009). Sebbene i campioni prelevati dal medico siano il gold standard, l'autocampionamento può essere un'utile alternativa. È stato dimostrato che il test del DNA dell'HPV utilizzando campioni auto-raccolti (SC) ha una sensibilità e specificità accettabili per il test dell'HPV rispetto ai campioni prelevati dai medici (Petignat, Faltin et al. 2007; Szarewski, Cadman et al. 2007; Arbyn, Verdoodt et al.2014). Un alto livello di concordanza tra l'auto e il campione clinico per il rilevamento del DNA dell'HPV di 0,87 (intervalli di confidenza (CI) al 95%, 0,82-0,91) è stato mostrato nella revisione sistematica e nella meta-analisi di Petignat (Petignat, Faltin et al. 2007). Il test del DNA dell'HPV è ben consolidato, ma sono disponibili e stanno emergendo nuove tecnologie di test dell'HPV.

Il test del DNA dell'HPV è stato più comunemente eseguito su campioni cervicali raccolti in un mezzo liquido (generalmente mezzo di trasporto del campione (STM) o PreservCyt). Tuttavia, questo non è l'ideale per i campioni SC domestici perché spesso ci sono restrizioni sull'affrancatura di campioni biologici in liquido, rischi (sebbene bassi) relativi al mezzo di trasporto stesso e problemi relativi alla refrigerazione del liquido. L'eliminazione della necessità di un mezzo di trasporto liquido (e in particolare di qualsiasi successiva refrigerazione) migliorerebbe notevolmente l'accessibilità del campionamento SC e ridurrebbe i costi. Ciò aumenterebbe anche il potenziale per lo screening cervicale in quelle aree in cui potrebbero esserci difficoltà logistiche come la mancanza di raccolte postali regolari e frequenti o strutture di stoccaggio refrigerato.

Ci sono stati diversi studi che hanno studiato la raccolta di campioni secchi per il rilevamento del DNA dell'HPV (Shah, Daniel et al. 2001; Krech, Castriciano et al. 2009; Feng, Cherne et al. 2010; Cerigo, Coutlee et al. 2012; Darlin, Borgfeldt et al., 2013; Eperon, Vassilakos et al., 2013). Tuttavia, le diverse metodologie e requisiti per la refrigerazione hanno limitato la generalizzabilità dei risultati. Inoltre, non hanno affrontato la questione di quanto tempo il campione sul dispositivo di raccolta a secco rimarrebbe vitale, specialmente a temperature più elevate.

Razionale e rischi/benefici Le prove suggeriscono sempre più che, almeno nei climi temperati, il test del DNA dell'HPV da un campione SC utilizzando un tampone asciutto fornisce una sensibilità simile a un tampone umido (dove il campione SC è posto in un terreno di trasporto del campione liquido) (Wolfrum, Koutsky et al.2012). Il trasporto a secco potrebbe rendere il test del DNA dell'HPV dai campioni SC più accessibile e ampiamente disponibile. Nel Regno Unito, ad esempio, l'imballaggio postale è semplificato quando non sono coinvolti liquidi. Lo screening primario dell'HPV viene esplorato negli studi clinici e persino introdotto in alcuni programmi di screening. Nei Paesi Bassi, ad esempio, il test SC HPV DNA nell'ambito del programma di screening primario è previsto per l'introduzione per i non partecipanti nel 2016 (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014).

La logica di questo studio di stabilità è accertare se i campioni SC conservati in condizioni asciutte saranno ancora utili se lasciati per un periodo di tempo in condizioni calde. Questo sarebbe di particolare utilità nei molti paesi a basso e medio reddito dove l'incidenza e la mortalità del cancro cervicale sono più alte. Questi paesi hanno spesso trovato molto difficile istituire programmi nazionali di screening cervicale a causa della mancanza di infrastrutture, dell'accesso a un sistema di refrigerazione efficiente e di un servizio postale.

Bart's Health National Health Service (NHS) Trust serve una popolazione diversificata da una vasta gamma di background socio-economici ed etnici nel centro di Londra. La clinica di colposcopia (che era al Bart's Hospital ma si è trasferita al Royal London Hospital nella primavera del 2015) ha circa 1050 nuove donne che frequentano e 1900 donne che frequentano per il follow-up all'anno. La partecipazione a questo progetto non avrà implicazioni per l'assistenza continua di qualsiasi donna che accetti di partecipare. In studi precedenti e in altri programmi di screening basati nel Regno Unito (Regno Unito) nel Regno Unito, come per Chlamydia trachomatis, l'uso dei tamponi da parte delle donne stesse si è dimostrato fattibile e sicuro.

Verranno raccolti i risultati istologici e citologici entro tre mesi prima della visita e fino a sei mesi dopo la visita. Potrebbe esserci una differenza nei risultati a seconda del grado della malattia e questo sarà confermato o escluso con queste informazioni.

Disegno dello studio Questo studio è un piccolo progetto preparatorio che mira ad arruolare 60 donne da un servizio di colposcopia e confrontare i loro campioni SC prelevati con due tamponi floccati asciutti e il dispositivo con marchio CE HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Canada). Ogni donna prenderà tutti e tre i campioni. I tamponi saranno tutti immediatamente refrigerati e quindi congelati immediatamente a -20ºC (SR0) per preservare il campione o incubati a 25ºC per una (SA1) o due settimane (SA2). I campioni di HerSwab saranno inclusi nella parte di incubazione dello studio (HA1 e HA2). L'ordine di campionamento sarà randomizzato per rimuovere qualsiasi distorsione associata all'ordine dei test e un numero approssimativamente uguale di primo, secondo e terzo tampone sarà assegnato a ciascun regime di gestione del tampone. Lo studio precederà e informerà uno studio multifase con l'obiettivo generale di confrontare i test SC HPV utilizzando dispositivi diversi, in condizioni diverse e utilizzando diversi test HPV.

Fattibilità Nel periodo dal 1 gennaio 2013 al 31 dicembre 2013, 1052 nuovi pazienti hanno frequentato l'unità di colposcopia di Bart. Nello stesso periodo di tempo 1930 si sono sottoposte a colposcopia o trattamento di follow-up, ciò significherebbe che in un periodo di 12 mesi 2982 donne si sono sottoposte a colposcopia. Vi è quindi un numero sufficiente di donne che possono potenzialmente essere reclutate per lo studio. Il servizio continuerà a ricevere questi rinvii quando si trasferirà al Royal London Hospital.

Procedure di randomizzazione Le randomizzazioni saranno effettuate utilizzando un'applicazione informatica interna. Il Centro per la prevenzione del cancro genererà un elenco randomizzato che collega i numeri dei partecipanti (PNO) con un numero di confezione e un codice che identifica l'ordine di campionamento. L'ordine sarà randomizzato 1:1:1 in tampone floccato a secco (per il congelamento all'arrivo in laboratorio) (SR0), tampone floccato a secco (per l'incubazione a 25ºC per una (SA1) o due settimane (SA2) all'arrivo nel laboratorio) o HerSwab (per l'incubazione a 25ºC per una (HA1) o due settimane (HA2) all'arrivo in laboratorio) (fare riferimento al diagramma dello schema di studio). I PNO verranno assegnati a pacchi numerati contenenti tre kit di autocampionamento, etichettati per mostrare l'ordine in cui i campioni devono essere prelevati. 60 donne che acconsentono a partecipare riceveranno il pacchetto successivo in ordine sequenziale, per quanto possibile, mentre frequentano la clinica e acconsentono allo studio. Tutti i campioni saranno immediatamente refrigerati a 2-8ºC in clinica fino al trasferimento in laboratorio.

Calendario degli interventi per ciascuna visita Valutazione Visita 1 Tre autocampioni prelevati x

Dispositivi di studio Alle donne verrà chiesto di raccogliere autonomamente tre campioni vaginali utilizzando due tamponi floccati asciutti e il dispositivo con marchio CE HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Canada). HerSwab utilizza un tampone floccato contenuto in un applicatore di plastica, con l'intenzione di facilitare l'autocampionamento per le donne.

Procedura per la raccolta dei dati I dati di citologia e istologia cervicale o vaginale saranno raccolti dal risultato della citologia di riferimento, che ha portato alla loro partecipazione al servizio di colposcopia, fino a sei mesi dopo la data dell'appuntamento. Tutto l'inserimento e la gestione dei dati dello studio saranno effettuati presso il Centro per la prevenzione del cancro.

Tutti i risultati di HPV, citologia e istologia verranno inseriti o importati nel database ORACLE dello studio dal team dello studio del Centro per la prevenzione del cancro (CCP). Tutti i database sono protetti e accessibili solo al personale nominato.

I moduli di consenso saranno archiviati in modo sicuro presso CCP.

Valutazioni di laboratorio Estrazione e rilevamento del DNA umano mediante un'analisi quantitativa della reazione a catena della polimerasi (qPCR) da tutti i campioni.

Estrazione e rilevamento del DNA dell'HPV (principalmente HPV 16) mediante un test qPCR da tutti i campioni.

Test HPV convalidato da tutti i campioni che producono valori CT o RLU.

Fine dello studio Definizione La fine dello studio sarebbe definita come quando sono stati raccolti i dati istologici e citologici finali per l'ultimo partecipante reclutato. Questo sarebbe circa otto mesi dopo la data della visita dell'ultima recluta. Otto mesi consentirebbero di inserire i dati nel database dell'ospedale.