CIN 研究系列 5.0 的预测因子：阴道自身样本的稳定性研究 (Predictors50)

背景 宫颈癌是由高危型人乳头瘤病毒 (Hr-HPV) 的持续感染引起的，但如果及早发现则可以预防。 通过常规宫颈筛查进行预防传统上是通过液基细胞学取样来完成的，临床医生收集的细胞将被检查以识别异常特征。 另一种方法是对与细胞学相同的液体样本进行 HPV 检测。 HPV DNA 检测比用于宫颈筛查的细胞学检测更敏感，但特异性较低，并且这两种检测都被女性广泛接受（Forrest、McCaffery 等人 2004 年；Waller、McCaffery 等人 2006 年；Szarewski、Cadman 等人 2009 年）。 尽管临床医生采集的样本是金标准，但自行采样可能是一种有用的替代方法。 与临床医生采集的样本相比，使用自行收集 (SC) 样本的 HPV DNA 检测已被证明具有可接受的 HPV 检测灵敏度和特异性（Petignat、Faltin 等人 2007 年；Szarewski、Cadman 等人 2007 年；Arbyn、Verdoodt 等人等人，2014 年）。 HPV DNA 检测的自我样本和临床医生样本之间的高度一致性为 0.87（95% 置信区间 (CI)，0.82-0.91） Petignat 的系统回顾和荟萃分析显示了这一点（Petignat、Faltin 等人，2007 年）。 HPV DNA 检测已经很成熟，但更新的 HPV 检测技术正在出现。

HPV DNA 检测最常在液体培养基（通常是标本运输培养基 (STM) 或 PreservCyt）中收集的宫颈样本上进行。 然而，这对于家庭 SC 样品来说并不理想，因为液体生物样品的邮寄通常有限制，与运输介质本身有关的风险（尽管很低）以及液​​体冷藏问题。 消除对液体运输介质（尤其是任何后续制冷）的必要性将大大提高 SC 采样的可及性并降低成本。 这也将增加在可能存在后勤困难（例如缺乏定期、频繁的邮政收集或冷藏设施）的地区进行宫颈筛查的可能性。

已经有几项研究调查了用于 HPV DNA 检测的干样本采集（Shah、Daniel 等人，2001 年；Krech、Castriciano 等人，2009 年；Feng、Cherne 等人，2010 年；Cerigo、Coutlee 等人，2012 年；Darlin， Borgfeldt 等人，2013 年；Eperon、Vassilakos 等人，2013 年）。 然而，不同的制冷方法和要求限制了结果的普遍性。 他们也没有解决干式收集装置上的样本能存活多长时间的问题，尤其是在较高温度下。

基本原理和风险/收益 越来越多的证据表明，至少在温带气候下，使用干拭子从 SC 样本中检测 HPV DNA 的灵敏度与湿拭子（SC 样本放置在液体样本传输介质中）相似（Wolfrum， Koutsky 等人，2012 年）。 干式运输可以使 SC 样本的 HPV DNA 检测更容易获得和广泛使用。 例如在英国，当不涉及液体时，邮政包装就被简化了。 HPV 初级筛查正在临床试验中探索，甚至被引入一些筛查项目。 例如，在荷兰，初级筛查计划中的 SC HPV DNA 检测计划在 2016 年引入未参加者（Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014）。

这项稳定性研究的基本原理是确定在干燥条件下保存的 SC 样品如果在温暖条件下放置一段时间后是否仍然有用。 这在宫颈癌发病率和死亡率最高的许多低收入和中等收入国家尤其有用。 由于缺乏基础设施、无法获得高效冷藏和邮政服务，这些国家经常发现很难制定国家宫颈筛查计划。

Bart's Health National Health Service (NHS) Trust 为来自伦敦市中心不同社会经济和种族背景的不同人群提供服务。 阴道镜检查诊所（位于巴特医院，但于 2015 年春季搬迁至皇家伦敦医院）每年约有 1050 名新女性就诊和 1900 名女性接受随访。 参与该项目不会影响任何同意参与的女性的持续护理。 在之前的研究和英国其他基于联合王国 (UK) 的筛查项目中，例如沙眼衣原体，女性自己使用拭子已被证明是可行且安全的。

将收集访问前三个月内和访问后最多六个月的组织学和细胞学结果。 根据疾病的等级，结果可能会有所不同，这将通过此信息得到确认或排除。

试验设计 本研究是一个小型预备项目，旨在从阴道镜检查服务中招募 60 名女性，并比较使用两个干植绒拭子和带有 CE 标记的设备 HerSwabTM（Eve Medical，加拿大多伦多）采集的 SC 样本。 每个女人将采取所有三个样本。 拭子将全部立即冷藏，然后立即冷冻在 -20ºC (SR0) 以保存样本，或在 25ºC 孵育一周 (SA1) 或两周 (SA2)。 HerSwab 样本将包含在研究的孵育部分（HA1 和 HA2）。 采样顺序将随机化以消除与测试顺序相关的任何偏差，并且将大致相等数量的第一、第二和第三拭子分配给每个拭子管理方案。 该研究将在多阶段研究之前进行并为其提供信息，其总体目标是比较使用不同设备、不同条件下和使用不同 HPV 检测方法进行的 SC HPV 检测。

可行性 在 2013 年 1 月 1 日至 2013 年 12 月 31 日期间，有 1052 名新患者参加了 Bart 的阴道镜检查单元。 在同一时间段内，有 1930 名女性参加了阴道镜检查或治疗，这意味着在 12 个月的时间段内，有 2982 名女性参加了阴道镜检查。 因此，有足够数量的女性可能被招募到该研究中。 该服务在搬迁到皇家伦敦医院后仍将收到这些转介。

随机化程序 随机化将使用内部计算机应用程序进行。 癌症预防中心将生成一个随机列表，将参与者编号 (PNO) 与包装编号和识别采样顺序的代码联系起来。 订单将按 1:1:1 随机分配至干植绒拭子（用于在抵达实验室时冷冻）(SR0)、干植绒拭子（用于在抵达实验室时在 25ºC 孵育一周 (SA1) 或两周 (SA2)实验室）或 HerSwab（到达实验室后在 25ºC 孵育一 (HA1) 或两周 (HA2)）（请参阅研究方案图）。 PNO 将被分配到包含三个自行采样套件的编号包中，标签上显示采样的顺序。 60 名同意参加的女性将尽可能按顺序获得下一包，因为她们会去诊所并同意研究。 所有样品将立即在诊所冷藏在 2-8ºC，直到转移到实验室。

每次访视的干预时间表 评估访视 1 三个自取样本 x

研究设备 女性将被要求使用两个干燥的植绒拭子和带有 CE 标记的设备 HerSwabTM（Eve Medical，多伦多，加拿大）自行收集三个阴道样本。 HerSwab 使用包含在塑料涂抹器中的植绒拭子，目的是让女性更容易进行自我采样。

收集数据的程序 宫颈或阴道细胞学和组织学数据将从转诊细胞学结果中收集，这导致他们在预约日期后最多六个月内参加阴道镜检查服务。 所有研究数据的输入和管理都将在癌症预防中心进行。

所有 HPV、细胞学和组织学结果都将由癌症预防中心 (CCP) 研究小组输入或导入该研究的 ORACLE 数据库。 所有数据库都受到保护，只有指定人员才能访问。

同意书将安全地存储在 CCP。

实验室评估 通过定量聚合酶链反应 (qPCR) 从所有样本中提取和检测人类 DNA。

通过 qPCR 分析从所有样本中提取和检测 HPV DNA（主要是 HPV 16）。

从所有产生 CT 或 RLU 值的样本中验证 HPV 测试。

研究结束定义 研究结束将被定义为为最后招募的参与者收集最终组织学和细胞学数据的时间。 这大约是最后一名新兵来访之日后八个月。 八个月的时间可以将数据输入医院数据库。