Prédicteurs de la série d'études CIN 5.0 : Étude de stabilité dans des auto-échantillons vaginaux (Predictors50)

Contexte Le cancer du col de l'utérus est causé par une infection persistante par des types de papillomavirus humains à haut risque (Hr-HPV), mais peut être prévenu s'il est détecté à un stade précoce. La prévention par le dépistage cervical de routine est traditionnellement effectuée avec un échantillonnage cytologique à base de liquide où les cellules collectées par les cliniciens sont examinées pour identifier les caractéristiques anormales. Une autre méthode est le test HPV effectué sur les mêmes échantillons à base de liquide que pour la cytologie. Le test ADN du VPH est plus sensible, mais moins spécifique, que la cytologie pour le dépistage cervical et les deux tests sont généralement acceptables pour les femmes (Forrest, McCaffery et al. 2004 ; Waller, McCaffery et al. 2006 ; Szarewski, Cadman et al. 2009). Bien que les échantillons prélevés par des cliniciens soient l'étalon-or, l'auto-échantillonnage peut être une alternative utile. Il a été démontré que les tests d'ADN du VPH utilisant des échantillons auto-prélevés (SC) ont une sensibilité et une spécificité acceptables pour le test du VPH par rapport aux échantillons prélevés par les cliniciens (Petignat, Faltin et al. 2007 ; Szarewski, Cadman et al. 2007 ; Arbyn, Verdoodt et al. 2014). Un niveau élevé de concordance entre l'échantillon personnel et l'échantillon du clinicien pour la détection de l'ADN du VPH de 0,87 (intervalles de confiance (IC) à 95 %, 0,82-0,91) a été démontré dans la revue systématique et la méta-analyse de Petignat (Petignat, Faltin et al. 2007). Le test ADN du VPH est bien établi, mais de nouvelles technologies de test du VPH sont disponibles et émergentes.

Le test ADN HPV a été le plus souvent effectué sur des échantillons cervicaux prélevés dans un milieu liquide (généralement Specimen Transport Medium (STM) ou PreservCyt). Cependant, ce n'est pas idéal pour les échantillons SC à domicile car il existe souvent des restrictions sur l'affranchissement des échantillons biologiques dans le liquide, des risques (bien que faibles) liés au milieu de transport lui-même et des problèmes liés à la réfrigération du liquide. La suppression de la nécessité d'un milieu de transport liquide (et en particulier de toute réfrigération ultérieure) améliorerait considérablement l'accessibilité de l'échantillonnage SC et réduirait les coûts. Cela augmenterait également le potentiel de dépistage cervical dans les zones où il peut y avoir des difficultés logistiques telles que le manque de collectes postales régulières et fréquentes ou d'installations de stockage réfrigérées.

Plusieurs études ont porté sur la collecte d'échantillons secs pour la détection de l'ADN du VPH (Shah, Daniel et al. 2001 ; Krech, Castriciano et al. 2009 ; Feng, Cherne et al. 2010 ; Cerigo, Coutlee et al. 2012 ; Darlin, Borgfeldt et al. 2013 ; Eperon, Vassilakos et al. 2013). Cependant, les différentes méthodologies et exigences en matière de réfrigération ont limité la généralisation des résultats. Ils n'ont pas non plus abordé la question de savoir combien de temps l'échantillon sur le dispositif de collecte à sec resterait viable, en particulier à des températures plus élevées.

Justification et risques/avantages Les preuves suggèrent de plus en plus que, du moins dans les climats tempérés, le test d'ADN du VPH à partir d'un échantillon de SC à l'aide d'un écouvillon sec offre une sensibilité similaire à un écouvillon humide (où l'échantillon de SC est placé dans un milieu de transport d'échantillon liquide) (Wolfrum, Koutsky et al. 2012). Le transport sec pourrait rendre les tests ADN HPV à partir d'échantillons SC plus accessibles et largement disponibles. Au Royaume-Uni par exemple, l'emballage postal est simplifié lorsqu'aucun liquide n'est impliqué. Le dépistage primaire du VPH est exploré dans des essais cliniques et même introduit dans certains programmes de dépistage. Aux Pays-Bas, par exemple, le test ADN SC HPV dans le cadre du programme de dépistage primaire devrait être introduit pour les non-participants en 2016 (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014).

La raison d'être de cette étude de stabilité est de déterminer si les échantillons de SC conservés dans des conditions sèches seront toujours utiles s'ils sont laissés pendant un certain temps dans des conditions chaudes. Cela serait particulièrement utile dans les nombreux pays à revenu faible ou intermédiaire où l'incidence et la mortalité du cancer du col de l'utérus sont les plus élevées. Ces pays ont souvent eu beaucoup de mal à mettre en place des programmes nationaux de dépistage du col de l'utérus en raison du manque d'infrastructures, d'accès à une réfrigération efficace et à un service postal.

Le National Health Service (NHS) Trust de Bart's Health dessert une population diversifiée de divers milieux socio-économiques et ethniques dans le centre de Londres. La clinique de colposcopie (qui se trouvait au Bart's Hospital mais déménage au Royal London Hospital au printemps 2015) compte environ 1 050 nouvelles femmes et 1 900 femmes pour un suivi par an. La participation à ce projet n'aura aucune incidence sur les soins continus de toute femme qui accepte de participer. Dans des études précédentes et dans d'autres programmes de dépistage basés au Royaume-Uni (Royaume-Uni), comme pour Chlamydia trachomatis, l'utilisation d'écouvillons par les femmes elles-mêmes s'est avérée réalisable et sûre.

Les résultats histologiques et cytologiques des trois mois précédant la visite et jusqu'à six mois après la visite seront recueillis. Il peut y avoir une différence dans les résultats en fonction du grade de la maladie et cela sera confirmé ou exclu avec cette information.

Conception de l'essai Cette étude est un petit projet préparatoire visant à recruter 60 femmes d'un service de colposcopie et à comparer leurs échantillons SC prélevés avec deux écouvillons floqués secs et le dispositif marqué CE HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Canada). Chaque femme prélèvera les trois échantillons. Les écouvillons seront tous immédiatement réfrigérés puis congelés immédiatement à -20 °C (SR0) pour conserver l'échantillon ou incubés à 25 °C pendant une (SA1) ou deux semaines (SA2). Les échantillons HerSwab seront inclus dans la partie incubation de l'étude (HA1 et HA2). L'ordre d'échantillonnage sera randomisé pour éliminer tout biais associé à l'ordre des tests et des nombres à peu près égaux de premier, deuxième et troisième écouvillons seront attribués à chaque régime de gestion des écouvillons. L'étude précédera et informera une étude en plusieurs phases dans le but général de comparer les tests SC HPV à l'aide de différents dispositifs, dans différentes conditions et à l'aide de différents tests de test HPV.

Faisabilité Dans la période du 1er janvier 2013 au 31 décembre 2013, 1052 nouveaux patients ont fréquenté l'unité de colposcopie de Bart. Au cours de la même période, 1930 femmes ont assisté à une colposcopie ou à un traitement de suivi. Cela signifierait que sur une période de 12 mois, 2982 femmes ont assisté à une colposcopie. Il y a donc un nombre suffisant de femmes qui peuvent potentiellement être recrutées pour l'étude. Le service recevra toujours ces références lorsqu'il déménagera au Royal London Hospital.

Procédures de randomisation Les randomisations seront effectuées à l'aide d'une application informatique interne. Le Centre de prévention du cancer générera une liste aléatoire reliant les numéros de participants (PNO) à un numéro de pack et à un code identifiant l'ordre d'échantillonnage. La commande sera randomisée 1:1:1 pour écouvillon floqué sec (pour congélation à l'arrivée au laboratoire) (SR0), écouvillon floqué sec (pour incubation à 25°C pendant une (SA1) ou deux semaines (SA2) à l'arrivée dans le laboratoire), ou HerSwab (pour une incubation à 25 °C pendant une (HA1) ou deux semaines (HA2) à l'arrivée au laboratoire) (veuillez vous référer au schéma du schéma d'étude). Les PNO seront affectés à des packs numérotés contenant trois kits d'auto-échantillonnage, étiquetés pour indiquer l'ordre dans lequel les échantillons doivent être prélevés. 60 femmes consentant à participer recevront le pack suivant dans l'ordre séquentiel dans la mesure du possible au fur et à mesure qu'elles se présentent à la clinique et consentent à l'étude. Tous les échantillons seront immédiatement réfrigérés à 2-8°C dans la clinique jusqu'au transfert au laboratoire.

Calendrier d'intervention pour chaque visite Évaluation Visite 1 Trois auto-échantillons prélevés x

Dispositifs d'étude Les femmes seront invitées à prélever elles-mêmes trois échantillons vaginaux à l'aide de deux écouvillons floqués secs et du dispositif marqué CE HerSwabTM (Eve Medical, Toronto, Canada). HerSwab utilise un écouvillon floqué contenu dans un applicateur en plastique, dans le but de faciliter l'auto-échantillonnage pour les femmes.

Procédure de collecte des données Les données de cytologie et d'histologie cervicales ou vaginales seront recueillies à partir du résultat de la cytologie de référence, qui a conduit à leur participation au service de colposcopie, jusqu'à six mois après la date de rendez-vous. Toute la saisie et la gestion des données de l'étude seront effectuées au Centre de prévention du cancer.

Tous les résultats HPV, cytologiques et histologiques seront saisis ou importés dans la base de données ORACLE de l'étude par l'équipe d'étude du Center for Cancer Prevention (CCP). Toutes les bases de données sont protégées et accessibles uniquement au personnel nommé.

Les formulaires de consentement seront stockés en toute sécurité au CCP.

Évaluations de laboratoire Extraction et détection de l'ADN humain par un test quantitatif de réaction en chaîne par polymérase (qPCR) à partir de tous les échantillons.

Extraction et détection de l'ADN du VPH (principalement du VPH 16) par un test qPCR à partir de tous les échantillons.

Test HPV validé à partir de tous les échantillons produisant des valeurs CT ou RLU.

Définition de la fin de l'étude La fin de l'étude serait définie comme le moment où les données histologiques et cytologiques finales ont été recueillies pour le dernier participant recruté. Ce serait environ huit mois après la date de visite de la dernière recrue. Huit mois laisseraient le temps d'entrer les données dans la base de données de l'hôpital.