Предикторы серии исследований CIN 5.0: исследование стабильности вагинальных самостоятельных образцов (Predictors50)

Предыстория Рак шейки матки вызывается персистирующей инфекцией вирусами папилломы человека высокого риска (Hr-HPV), но его можно предотвратить, если выявить его на ранней стадии. Профилактика с помощью рутинного скрининга шейки матки традиционно осуществляется с помощью жидкостной цитологии, когда клетки, собранные клиницистами, исследуются для выявления аномальных признаков. Другим методом является тестирование на ВПЧ, проводимое на тех же жидких образцах, что и для цитологического исследования. Анализ ДНК ВПЧ является более чувствительным, но менее специфичным, чем цитологическое исследование шейки матки, и оба теста в целом приемлемы для женщин (Forrest, McCaffery et al., 2004; Waller, McCaffery et al., 2006; Szarewski, Cadman et al., 2009). Хотя пробы, взятые врачом, являются золотым стандартом, самостоятельное взятие проб может быть полезной альтернативой. Тестирование ДНК ВПЧ с использованием самостоятельно собранных (SC) образцов показало приемлемую чувствительность и специфичность для тестирования на ВПЧ по сравнению с образцами, взятыми клиницистами (Petignat, Faltin et al. 2007; Szarewski, Cadman et al. 2007; Arbyn, Verdoodt et al. др. 2014). Высокий уровень соответствия между собственной и клинической пробой для обнаружения ДНК ВПЧ 0,87 (95% доверительный интервал (ДИ), 0,82-0,91) было показано в систематическом обзоре и метаанализе Петинья (Petignat, Faltin et al., 2007). Тестирование ДНК ВПЧ хорошо зарекомендовало себя, но доступны и появляются новые технологии тестирования ВПЧ.

Тестирование ДНК ВПЧ чаще всего проводят на образцах шейки матки, собранных в жидкой среде (как правило, в среде для транспортировки образцов (STM) или PreservCyt). Однако это не идеально для домашних образцов SC, потому что часто существуют ограничения на пересылку биологических образцов в жидкости, риски (хотя и низкие), связанные с самой транспортной средой, и проблемы, связанные с охлаждением жидкости. Устранение необходимости в жидкой транспортной среде (и особенно в любом последующем охлаждении) значительно улучшит доступность отбора проб SC и снизит затраты. Это также увеличило бы возможности скрининга шейки матки в тех районах, где могут возникнуть логистические трудности, такие как отсутствие регулярных и частых почтовых отправлений или холодильных складских помещений.

Было проведено несколько исследований, в которых изучался сбор сухих образцов для обнаружения ДНК ВПЧ (Shah, Daniel et al., 2001; Krech, Castriciano et al., 2009; Feng, Cherne et al., 2010; Cerigo, Coutlee et al., 2012; Darlin, Боргфельдт и др., 2013 г.; Эперон, Вассилакос и др., 2013 г.). Однако различные методологии и требования к охлаждению ограничивают возможность обобщения результатов. Они также не рассматривали вопрос о том, как долго образец на устройстве для сухого сбора будет оставаться жизнеспособным, особенно при более высоких температурах.

Обоснование и риски/преимущества Данные все больше свидетельствуют о том, что, по крайней мере, в умеренном климате, анализ ДНК ВПЧ из образца подкожно с использованием сухого тампона обеспечивает такую ​​же чувствительность, что и влажный тампон (где образец подкожно помещается в жидкую транспортную среду для образцов) (Wolfrum, Коутский и др., 2012). Сухая транспортировка может сделать тестирование ДНК ВПЧ из образцов подкожной клетчатки более доступным и широкодоступным. Например, в Великобритании почтовая упаковка упрощается, когда не используется жидкость. Первичный скрининг на ВПЧ изучается в клинических испытаниях и даже внедряется в некоторые программы скрининга. Например, в Нидерландах в 2016 г. планируется ввести тестирование ДНК ВПЧ на ПК в рамках программы первичного скрининга для лиц, не посещающих занятия (Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu 2014).

Обоснование этого исследования стабильности состоит в том, чтобы установить, будут ли образцы SC, хранящиеся в сухих условиях, по-прежнему полезными, если оставить их на некоторое время в теплых условиях. Это было бы особенно полезно во многих странах с низким и средним уровнем дохода, где заболеваемость раком шейки матки и смертность самые высокие. Этим странам часто бывает очень трудно создать национальные программы скрининга шейки матки из-за отсутствия инфраструктуры, доступа к эффективному охлаждению и почтовой службе.

Доверие Национальной службы здравоохранения (NHS) Bart's Health обслуживает разнообразное население из различных социально-экономических и этнических слоев в центре Лондона. Клиника кольпоскопии (которая находилась в больнице Барта, но весной 2015 года переезжает в Королевскую лондонскую больницу) ежегодно посещает около 1050 новых женщин и 1900 женщин для последующего наблюдения. Участие в этом проекте не повлияет на постоянный уход любой женщины, которая согласится участвовать. В предыдущих исследованиях и в других программах скрининга в Соединенном Королевстве (Великобритания), таких как Chlamydia trachomatis, было показано, что использование мазков самими женщинами достижимо и безопасно.

Будут собраны результаты гистологии и цитологии в течение трех месяцев до визита и до шести месяцев после визита. Могут быть различия в результатах в зависимости от степени заболевания, и это будет подтверждено или исключено с помощью этой информации.

Дизайн испытания Это исследование представляет собой небольшой подготовительный проект, целью которого является зачисление 60 женщин из службы кольпоскопии и сравнение их образцов подкожной клетчатки, взятых с помощью двух сухих флокированных тампонов и устройства HerSwabTM с маркировкой CE (Eve Medical, Торонто, Канада). Каждая женщина возьмет все три образца. Все мазки немедленно охлаждают, а затем либо немедленно замораживают при температуре -20ºC (SR0) для сохранения образца, либо инкубируют при 25ºC в течение одной (SA1) или двух недель (SA2). Образцы HerSwab будут включены в инкубационную часть исследования (HA1 и HA2). Порядок отбора проб будет рандомизированным, чтобы устранить любую систематическую ошибку, связанную с порядком тестирования, и примерно одинаковое количество первого, второго и третьего мазков будет выделено для каждого режима обработки мазков. Это исследование будет предшествовать многоэтапному исследованию, общей целью которого будет сравнение подкожного тестирования на ВПЧ с использованием различных устройств, в разных условиях и с использованием различных методов тестирования на ВПЧ.

Осуществимость В период с 1 января 2013 г. по 31 декабря 2013 г. 1052 новых пациента посетили отделение кольпоскопии Барта. За тот же период времени кольпоскопию или лечение посетили 1930 женщин. Это означает, что за 12-месячный период кольпоскопию посетили 2982 женщины. Таким образом, существует достаточное количество женщин, которые потенциально могут быть привлечены к участию в исследовании. Служба по-прежнему будет получать эти направления после переезда в Королевскую лондонскую больницу.

Процедуры рандомизации Рандомизация будет проводиться с использованием собственного компьютерного приложения. Центр профилактики рака создаст рандомизированный список, в котором номера участников (PNO) будут связаны с номером пакета и кодом, определяющим порядок отбора проб. Заказ будет рандомизирован в соотношении 1:1:1: сухой флокированный тампон (для замораживания по прибытии в лабораторию) (SR0), сухой флокированный тампон (для инкубации при 25ºC в течение одной (SA1) или двух недель (SA2) по прибытии в лабораторию. лаборатории) или HerSwab (для инкубации при 25ºC в течение одной (HA1) или двух недель (HA2) по прибытии в лабораторию) (см. схему схемы исследования). PNO будут присваиваться пронумерованным упаковкам, содержащим три комплекта для самостоятельного отбора проб, с маркировкой, указывающей порядок, в котором следует брать пробы. 60 женщин, согласившихся принять участие, получат следующую упаковку в последовательном порядке, насколько это возможно, по мере их посещения клиники и согласия на исследование. Все образцы будут немедленно охлаждены до температуры 2-8ºC в клинике до передачи в лабораторию.

График вмешательства для каждого визита Оценка Визит 1 Взятие трех самостоятельных проб x

Устройства для исследования Женщин попросят самостоятельно собрать три вагинальных образца с помощью двух сухих флокированных тампонов и устройства HerSwabTM с маркировкой CE (Eve Medical, Торонто, Канада). HerSwab использует флокированный тампон, содержащийся в пластиковом аппликаторе, с целью облегчить женщинам самостоятельное взятие проб.

Процедура сбора данных Цервикальные или вагинальные цитологические и гистологические данные будут собираться по результатам цитологического исследования, которое привело их к посещению службы кольпоскопии, в течение шести месяцев после даты назначения. Весь ввод данных исследования и управление ими будут осуществляться в Центре профилактики рака.

Все результаты ВПЧ, цитологии и гистологии будут введены или импортированы в исследовательскую базу данных ORACLE исследовательской группой Центра профилактики рака (CCP). Все базы данных защищены и доступны только для определенных сотрудников.

Формы согласия будут надежно храниться в CCP.

Лабораторные оценки Извлечение и обнаружение ДНК человека с помощью количественной полимеразной цепной реакции (КПЦР) из всех образцов.

Выделение и обнаружение ДНК ВПЧ (преимущественно ВПЧ 16) методом количественной ПЦР из всех образцов.

Подтвержденный тест на ВПЧ для всех образцов, дающий значения CT или RLU.

Определение окончания исследования Окончание исследования будет определяться моментом, когда будут собраны окончательные гистологические и цитологические данные для последнего набранного участника. Это будет примерно через восемь месяцев после даты визита последнего новобранца. Восемь месяцев дадут время для ввода данных в базу данных больницы.