新しいベーキング製品による栄養補給が腸内微生物叢とコレステロール代謝に与える影響の測定

PreBIOil プロジェクトの in vitro 試験の最初の結果は、プレバイオティクスの能力を備えた多糖類として認識されるイヌリンの能力と同等の方法で、人間の腸の微生物集団を調節するオリーブ粉の能力を描写しました。 これらの結果と他の文献に基づいて、ベーカリー製品 PreBIOil が配合されました。 この製品には、オリーブ、そば、エンドウ豆、栗の小麦粉が含まれています。

この研究の全体的な目的は、オリーブ粉とそば粉、エンドウ豆、栗粉を混ぜたベーカリー製品を食事に導入することで、腸内細菌叢と血漿コレステロール、特に LDL のプロファイルが変化するかどうかを評価することです。 この研究は、対照群と並行して、二重盲検、無作為化された栄養補助食品として設定され、以下の製品が比較されます。

i) 新しいベーカリー製品を設計した研究 PreBIOil (テスト)。 ii) ベーカリー製品コントロール等エネルギー物質 (コントロール)。

試験で補充された食品の説明 試験製品は、オリーブ、ソバ、エンドウ豆、栗の小麦粉を混合して配合された新しい焼き製品で、塩辛いビスケットのような外観をしています。

参加者は、毎日約 90 グラムの試験または対照製品を摂取する必要があります。 各製品バッチの正確な量は、2 つの製品で同じカロリー摂取量を提供するために、最終製品の栄養特性を評価した後に決定されます。

消化性、発酵性、微生物叢の調節 そばは非穀物であると考えられており、繊維、ミネラル、B2 や B6 などのビタミンを含むことに加えて、フラボノイドの含有量により抗酸化化合物の供給源でもあります。

エンドウ豆の粉には、人間の食事にとって重要な成分（デンプン、タンパク質、その他の栄養素）が含まれています。 エンドウ豆の摂取に伴う健康上の利点は、主にデンプン、タンパク質、繊維、ビタミン、ミネラル、植物化学物質の濃度と性質に由来します。 外皮および子葉の細胞壁に含まれる繊維は、胃腸の機能に寄与します。 エンドウ豆の粉に含まれるデンプンは血糖指数が低いという特徴があります。 エンドウ豆のタンパク質は、抗酸化活性を持つペプチドを生成する可能性があります。 エンドウ豆に含まれるビタミンとミネラルは、欠乏症、特にセレンと葉酸の欠乏に関連する病気の予防に重要な役割を果たします。 エンドウ豆にはさまざまなファイトケミカルが含まれています。 これらには、抗酸化作用と抗がん作用がある可能性があるポリフェノール、低コレステロール血症と抗がん作用を示すサポニン、大腸でプレバイオティクス効果を発揮するガラクトースのオリゴ糖が含まれます。

栗粉の栄養成分は、炭水化物、タンパク質、脂肪で構成されており、エネルギー値は約 350 ～ 400 kcal/100 g になります。 栗は腸内細菌の代謝にプラスの影響を与えることが認められており、長鎖脂肪酸 C18:1 および C18:2 とビタミン (ビタミン E) の供給源です。 ポリフェノールが存在する可能性があるのは、通常、小麦粉の製造中に果実から分離される外皮に限定されています。 オリーブペーストから得られる小麦粉は、人間の食事に適した特定の栄養特性について科学文献に記載されていません。 しかし、オリーブは地中海食に欠かせないものであり、テーブルオリーブやオリーブオイルとして消費されます。 オリーブの果実には、50% の水分、22% の脂肪、約 19% の炭水化物、約 2% のタンパク質が含まれています。ポリフェノール含有量は1〜3%の範囲で変化します。 オリーブは、オリーブオイルまたはテーブルオリーブとして消費されます。 オリーブは、主にダルオレウロペインによる強い苦味が特徴です。 オレウロペインは、未熟なオリーブでは乾燥重量 g あたり 140 mg に達することがありますが、果実が熟すにつれて減少します。テーブル オリーブは、浸軟ソーダや塩水での発酵などのプロセスを通じて苦味を軽減する処理が行われます。 しかし、苦味を甘くする過程で、ポリフェノールや繊維など、オリーブに含まれる重要な化合物の一部が失われます。 エキストラバージンオリーブオイルのポリフェノールが心血管疾患のリスクを軽減する能力についての証拠はありませんが、オリーブの成分単独またはポリフェノールとの相乗効果の考えられる効果の大部分はまだ解明されていません。 さらに、オリーブに含まれる水溶性部分の大部分（人間の健康に有益な作用が証明されている繊維とポリフェノールの間に含まれる）は、油の生産過程で除去されません。 セコイリドイドとしての一部のフェノール画分は腸粘膜にあまり吸収されず、結腸微生物叢に利用できるという証拠があります。 本質的に、他の種類の果物で実験的に観察されたように、人間の腸内に共生する微生物の組成と活性を有益に調節できる食品として、油全体が最大の可能性を秘めています。

結腸発酵の in vitro シミュレーションにより、オリーブペーストは 180℃で 30 分間焼いた後でも、プレバイオティクス効果によってヒトの腸内細菌叢を調節したり、ビフィズス菌の大幅な増加を誘導したりできることが観察されています。 このような in vitro シミュレーションは、5 人の健康な個人から得た糞便を接種した後、pH と温度を制御したバッチ発酵システムで 24 時間インキュベートすることによって実行されました。 オリーブ粉、小麦粉の混合物、および試験製品に存在する総ポリフェノール（試験製品に含まれる主な抗酸化物質）を分析したところ、焼いた結果、総ポリフェノールが 40% 減少していることが検出されました。

臨床結果 臨床結果では、そば粉を小麦粉の形で毎日 100 g 摂取すると、HDL/コレステロール比が増加し、耐糖能が改善されることが示されており、さらに最近では、そば粉で作られたビスケットの摂取により耐糖能が低下することが観察されました。炎症マーカーであるミエロペルオキシダーゼ（MPO）の血清レベルを低下させ、総コレステロールを低下させ、肺活量を改善します。 エンドウ豆を含むマメ科植物のサプリメントを摂取した人間の食事に関するいくつかの介入研究の最近のメタ分析では、エンドウ豆を含むマメ科植物が血清 LDL コレステロール値を低下させる能力があることが示されました。

オリーブオイル、オリーブの加工副産物、およびオリーブベースの製品を使った食事に関する介入研究は、健康なボランティアおよびさまざまな程度の心血管リスクを持つ被験者を対象に実施されてきました。 これらの研究では、オリーブオイルの種類と抽出物の強化に応じて、毎日の総ポリフェノールの摂取量（数mg/日から30mg/日、最大100mg/日）が示されています。 これらの介入の期間は多くの場合約 1 か月で、研究のほとんどは、血漿脂質の値や酸化ストレスに関連するその他のパラメータとともに、循環系における抗酸化作用と抗炎症作用の変化を測定しました。 特に、健康な人の大規模なサンプルを対象とした研究「EUROLIVE」では、オリーブオイルのフェノールが血中脂質を酸化から保護し、HDLコレステロール濃度と還元型グルタチオンと酸化型グルタチオンの関係を増加させることが観察されました。ただし、デル F2-イソプロスタンには変化はありません。

2011年、欧州食品安全機関（EFSA）は、オリーブ油ポリフェノール、特にヒドロキシチロソールが5 mg/kg/日以上の用量でLDLを酸化から保護するという主張を承認しました。 他の研究では、オリーブオイルポリフェノールがCRPの減少、血球におけるアテローム発生遺伝子発現の減少、および血圧の低下に関連していることも示されています。 オリーブオイルのポリフェノールが心血管疾患のリスクを軽減する能力についての証拠はありますが、オリーブの成分の単独または相乗効果の考えられる効果の大部分はまだ解明されていません。 また、オリーブに含まれる繊維質やポリフェノールの大部分は搾油の過程で抽出されず、副産物として排出されてしまいます。

研究の理論的根拠 そば粉には食物繊維とフラボノイドが含まれ、エンドウ豆の粉には血糖指数の低い炭水化物、タンパク質が含まれ、抗酸化物質の供給源でもあり、栗粉はプレバイオティクス物質とビタミンをもたらします。 オリーブ粉は、水溶性成分を含むオリーブの果実です（例：オリーブ）。 繊維およびポリフェノール）、およびエキストラバージンオリーブを部分的にしか通過しない多価不飽和および一価不飽和脂肪酸、トコフェロールおよびカロテノイドの可溶性画分に含まれます。 これらの成分は主にエクストラバージン オリーブオイルの成分として設計されており、脂質代謝と血漿脂質フレームワークの改善、心臓の健康、酸化ストレスからの保護に寄与するという証拠が科学的に与えられています。

入手可能な臨床研究および実験研究に基づいて、オリーブペースト、ソバ、エンドウ豆、栗の小麦粉を混合して作った焼き製品の摂取は、脂質血漿バイオマーカーと腸内細菌叢にプラスの効果をもたらす可能性があることが示唆されています（たとえば、腸内細菌叢の増加）まだ病的ではない場合でも、血漿コレステロール含有量が中程度から高レベルの成人参加者を対象としています。

適合宣言書 この研究は、議定書に準拠し、1996 年の ICH GCP、米国連邦規則集 (CFR)、およびヘルシンキ宣言に記載されている適正臨床基準 (GCP) に従って実施されます。 このプロトコルに署名すると、研究者はこれらの要件に従うことに同意したことになります。

研究の目的

研究の全体的な目的は、オリーブペースト、ソバ、エンドウ豆、栗の小麦粉を混合した新しいベーカリー製品を食事に導入することで変化が生じるかどうかを評価することです。

主な目的:

1. 糞便微生物叢のプロファイル。
2. 総コレステロール、LDL、総 LDL および HDL に対する比率の血漿レベル。
3. 血漿中トリグリセリドレベル。
4. アポリポタンパク質 ApoA-I、ApoB、および Lp (a)。

二次的な目的:

1. 人体計測指標 2 ヒト生体液中のポリフェノールの二次代謝産物 3. 質量分析法 (MS) の分析によって評価された血漿および尿中の代謝産物のプロファイル。血糖値および空腹時インスリンレベル； ５． 5. C反応性タンパク質(PRC);高感度C反応性タンパク質(hsPRC); ６．尿中イソプロスタンF2; ７． 8. 血漿中の酸化LDL。

プレゼンテーション実験計画 参加ボランティアは、カサ ディ クーラ エレモ ディ アルコ (テネシー州) の外来部門で特定され、募集されます。 参加者には研究の目的と方法が通知され、参加/除外の基準に基づいて事前に選択されます。 参加者は、インフォームドコンセントに署名し、カサ ディ クーラ エレモ ディ アルコ (テネシー州) の外来部分で行われる T-1 への訪問後にスタジオに入り、臨床的および生化学的な健康状態の検査が行われます。 食習慣を適切にモニタリングできるようにするために、資格のある参加者は、最初の訪問後に食事日記を記入します。

対象者がすべての包含基準および除外基準に基づいて研究に適格である場合、訪問 T0 でプラセボまたは積極的統合のいずれかを受けるように無作為に割り当てられます。

臨床検査および採血・採尿は、開始期間の開始時に約10時間の絶食後に行われます（T-1訪問）。 臨床検査、血液サンプル、糞便および尿の採取は、訪問 T0、T1 中に行われます。 追加の食事日記 (連続 4 日間) は、訪問 T0 および T1 より前に記入されます。 有害事象、薬やサプリメントの摂取は、参加者によって特別な日記に記録されます。

研究に参加した参加者は、ブラインドで提供された各食品の最初の味、および各製品の8週間のサプリメント摂取終了時の官能評価にも記入するよう求められます。

研究手順 参加者の募集 参加者はカサ ディ クーラ エレモ ディ アルコ (TN) の外来部門で特定され、募集されます。 参加者は研究の目的と方法について知らされ、包含/除外の基準に基づいて事前に選択されます。 。 資格がある場合、参加者はインフォームドコンセントに署名し、T-1 を訪問してスタジオに入ります。T-1 は臨床的および生化学的な健康状態の間に行われます。 包含/除外のすべての基準に基づいて研究に適格となる被験者は研究に組み込まれ、T0 を訪れる最初の栄養補給 (テストまたは対照) を受けるように無作為化されます (2 週間後の慣らし運転まで) ）。

補充

適格性が評価された後、参加者はベーカリー製品とテスト製品または対照製品の統合を受けるようにランダムに割り当てられます。

1 日 1 回の投与量は、資格のあるグループによってコード化されたパックに包装されます。 補充は、二重盲検法、並行して8週間継続します。 2 つの製品のうちの 1 つを使用します (ランダム化によるもの)。

フォローアップ このプロジェクトは、8 週間の栄養補給、臨床検査、および T-1 を訪問するための約 10 時間の一晩絶食 (水分摂取を除く) 後に血液と尿の採取が行われます。 臨床検査、採血、糞便および尿の採取は、T0、T1 を訪問して行われます。T0 は最初の統合日であり、T1 は治療開始から 8 週間後です。 食事日記は、T-1 を訪問するために編集され、データ収集訪問 T0 および T1 の訪問 T0 および T1 の前に配布されます。

臨床評価 心電図。 スクリーニング (T-1) では ECG が実行されます。 ECG トレースは、アルコの老人ホーム エルミタージュの外来部門によって検査および解釈されます。

血圧は、高血圧症に関するガイドライン ISH/WHO 2004 の人体測定指数に従って測定されます。体重と身長は標準スケールで測定されます。 この措置は、靴、コート、防寒着を着用していない被験者に対して実施されます。 体格指数、BMI は kg /m2 として計算されます。

ウエスト周囲径（臍帯）は、米国国立衛生研究所、国立心肺血液研究所が定めた方法で測定され、ウエスト周囲径とヒップ比（WHR）の比が計算されます。

アンケート 個人識別、病歴、心血管疾患の危険因子、薬物使用、身体活動、食習慣に関する情報など、すべての情報が収集され、検証済みのアンケートに記録されます。 また、参加者全員が4日間の食事日記を書きます。

研究に参加した参加者は、最初のブラインドテイスティング時と8週間のサプリメント摂取終了時に、提供された各食品の官能評価を記入するよう求められる。

血液の採取と採尿 10 時間の絶食後に末梢静脈から血液 (≤ 30 ml) を採取します。 24 時間の尿が収集され、量が測定され、サンプルは -80 °C で保存されます。

糞便サンプルの収集 糞便サンプルはサンプル収集後 12 時間以内に処理されます。 各糞便サンプルのアリコートは、メタボローム プロファイルの分析のために -80 ° C で直接凍結されます。

Casa di Cura Eremo di Arco の臨床検査分析による臨床検査 血液サンプルは、採血直後に実行される検査の要件に従って遠心分離されます。 血漿または血清は分離され、一部は直ちに検査され、残りの画分は-80℃で保存されます。

総コレステロール、HDLコレステロール、中性脂肪、ブドウ糖を酵素法で評価します。 LDLコレステロールは酵素法を用いて分析的に測定されます。

インスリンレベルは電子化学発光によって評価されます。血球数および血小板数は、インピーダンス測定法によって評価されます。 C 反応性タンパク質 (CRP) は比濁分析によって測定されます。 高感度 C 反応性タンパク質 (hsPCR) は比濁分析によって測定されます。

アポリポタンパク質 AI (ApoA-I)、ApoB、および Lp (a) を免疫比濁法によって測定しました。

糖尿病がないことを確認するための検査は、尿中のブドウ糖濃度を測定することによって行われます。

エドモンド・マッハ財団 [EMF] による臨床検査 尿および血漿のメタボローム プロファイル。 尿中の F2-イソプロスタンは、クロマトグラフィー固相 (SepPack カラム) による精製後、特定の EIA キットを使用して、酸化ストレスの尺度として測定されます。

血漿中の酸化された LDL の分析は ELISA キットを使用して行われます。

尿と血液（血漿および血清）のサンプルは、ターゲットメタボロミクス分析（不揮発性化合物用の UPLC-MS / MS および揮発性化合物用の GC-MS / MS）と非ターゲットメタボロミクス分析（ULPC）の両方に供されます。 -Q -TOF-MS および Nano -FTMS-Q-TOF 不揮発性、および GC-TOF (揮発性化合物用)。 対象となる血漿代謝産物のプロファイルには、MS ベースの Biocrates AbsoluteIDQ ® キット P180 が使用され、糖尿病のリスクに関連する 180 種類のヒト代謝産物に関する正確な定量データが生成されます。 さらに、特定のターゲットを絞った分析が、血清胆汁酸、短鎖脂肪酸（短鎖脂肪酸、SCFA）の脂質プロファイル、および UPLC を使用した生体液（糞便を含む）中の微生物由来のポリフェノールの代謝産物の定量に適用されます。 QQQ-MS/MS。

糞便微生物叢の分析。 特定の細菌集団の糞便微生物叢の変化は、蛍光プローブを使用した in situ ハイブリダイゼーション (FISH) の方法を使用して評価されます。

また、糞便微生物叢の変化は、パイロシーケンス 454 を使用したメタゲノミクスアプローチを使用して評価されます。 つまり、便サンプル (n = 128、各食品検査およびプラセボの摂取前後の 64 人の被験者からの異なる時間 T0、T1 での 2 つの便サンプル) を収集した後、SPIN FastDNA キット (MPbio) を使用して細菌のゲノム DNA を抽出します。 ) 糞便に特有のもの。 細菌の 16S rRNA 遺伝子 (超可変領域 V1 ～ V3) に特異的なプライマーを使用して、PCR 増幅によって実行され、次に増幅された V1 ～ V3 を 454 パイロシークエンシングに供します。

GS FLX Titanium Chemistry とアダプター Multiplex Identifier (MID) を使用して、長さ 600 bp の配列を取得します。この配列は、パイプライン QIIME を介して公開されている 16S rRNA 系統発生データベースと比較することで分析され、ヒトの属レベルへの割り当てが可能になります。腸内細菌叢。 各糞便サンプルに対して合計約 20,000 のシーケンスが生成されます。 微生物生態の品質管理および分析として、食品検査またはプラセボの摂取後の糞便微生物叢の組成の変化を相関付けるために、多変量統計が使用されます。

ランダム化盲検参加者は、特定のソフトウェアを使用する場合でも、ベーカリー製品のテストまたは対照製品の 2 つの治療法のいずれかに、性別と年齢によってランダムに均等に割り当てられます。 臨床研究者、研究者、研究所職員は無作為化について知らされなくなります。

治療 サプリメントは、オリーブ、ソバ、エンドウ豆、栗の粉を含む製品を毎日 90 グラム摂取するベーカリー製品 (テスト) の摂取によって毎日の食事に導入されます。 食品は、アナログ制御のカロリー摂取量を提供します。 研究対象の製品 (テストまたは対照) は、研究のコード番号が現地の言語でラベル付けされたパックで提供されます。 メーカー名、患者数、研究来院数。 製品は訪問T0から参加者に配布されます。

研究期間と計画 適格性が評価された後、参加者は 2 つのグループ (製品テストまたは対照) に無作為に割り付けられ、8 週間の栄養補助食品が摂取されます。

開始期間（導入期間）と治療を含む研究全体の期間は 10 週間です。

募集はその後、倫理委員会の承認後 3 か月以内に開始されます。

慣らし運転は、最初の訪問 (T-1) から 2 週間以内に始まります。 被験者は10か月の期間にわたって募集され、研究は最初の募集時から12か月以内に完了します。

研究中止の基準 ヘルシンキ宣言、ICH の優良臨床実施基準、および米国の「食品医薬品局 (FDA) 規則」に従って、人はいつでも研究を中止する権利を有します。理由の如何を問わず、医師または施設による将来の医療を損なうことなく。 研究者は研究対象を取り下げる権利もあります（以下を参照）。 個人（または法的に権限を与えられた代理人）が退職することを決定した場合、可能な限り観察を完了し報告するためにあらゆる努力が払われます。 最終的な包括的な評価は被験者の辞退時に行われ、その理由が登録される必要があり、いかなる場合でも追跡評価の実行が試みられる必要があります。

以下の理由により、被験者は研究から削除される場合があります。

実験者によるプロトコール違反 被験者による意味のある遵守ではない 治療継続またはコメントに対する被験者の拒否 許容できない毒性 閉鎖が被験者にとって最善の医学的利益であるという研究者の決定 病気または合併症の不明瞭な事象研究と適合しない併用薬。 妊娠 アルコールまたは薬物の乱用 研究を中止または中止した人は補充されません。

解約手続き

個人が研究完了前に中止した場合、その理由と終了日が記録されます。 研究で最後に食物を投与した日付を記録する必要があります。 早期終了の場合は、次の手順を実行する必要があります。

臨床検査 (収縮期および拡張期、心拍数、体重および身長を測定して BMI、ウエストおよびヒップ周囲径を計算します)。

採血、便採取、採尿を行います。 食事頻度アンケート（毎週）。 その人が経過観察のために戻ってこられない場合、調査官は有害事象を追跡するためにその人に電話で連絡することを模索することになるだろう。

スタジオ内で食事を受け取ることに同意を撤回した場合は、安全性データ収集のための治療を受けずに研究に参加することが推奨されます。

研究対象製品の信頼性の手順 製品（試験または対照）は、現地の言語で研究のコード番号、施設コードの番号、メーカー名、参加者の数、研究の訪問回数、ロット数、保管方法および有効期限。 製品は訪問T0から参加者に配布されます。

コードのランダム化 各参加者の性別と年齢によるランダム化のコードは、感覚品質の資格のあるグループ (エドモンド・マッハ財団の研究イノベーションセンターの栄養および食品品質部門の QS) によって密封された封筒に保管されます。

データソースの管理 研究中に収集されたすべてのデータは一次情報源から取得され、対象として文書および電子医療記録に記録されます。 臨床結果、検査結果、および心電図の結果は、被験者の電子医療記録ファイルに記録されます。 データは、紙の記録や電子的な情報源などの一次情報源から転送されずに、「症例報告書」(CRF) に直接挿入されることはありません。

併用薬物療法 研究開始前 1 か月以内に被験者から摂取された薬物療法、および/または研究中に投与された薬物療法は、併用療法とみなされます。 このような治療は、CRFの適切なページおよび被験者の医療記録に文書化されなければなりません。 研究中に併用療法を変更した場合は、それを明確に記録し、変更の理由を文書化する必要があります。

研究に適合しない併用療法を明記した手紙が各参加者の医師に送られます。 研究中、以下の薬物の使用は許可されません：抗凝血薬、降圧薬、脂質低下薬、ベータ遮断薬、全身性コルチコステロイド、神経弛緩薬、抗生物質、下剤、ビタミンサプリメント、抗酸化物質およびミネラル、食物繊維、プレバイオティクス（例、イヌリン、オリゴフルクトース）およびプロバイオティクス。 したがって、被験者が研究に適合しない薬物療法を必要とする場合、被験者は治療医師から研究を中止し、研究責任者に通知し、早期終了の手順に従うよう通知されます。

コンプライアンス評価 サプリメントのコンプライアンスを評価するために、T0、T1 に食品検査でサプリメントを摂取する被験者の尿中フェノールを測定します。 さらに、未使用または空のパッケージはすべて、毎週の終わりに実験者に返却されます。

方法 安全性 オリーブ、そば、豆粉、栗粉から作られた製品の消費に関連する以前の研究では、安全性の問題はありませんでした。

この研究はアルコのカサ・ディ・クーラ・エレモの医療スタッフと救急医療スタッフによって監視される。 有害事象は研究期間中も記録されます。 臨床徴候や症状を誘発する、または治療的介入を必要とする異常な検査値は、被験者がインフォームドコンセントの形でそのような通知を受けることを希望することを明示的に表明している場合、被験者に速やかに通知されます。 治療介入の必要性が研究に適合しない場合、またはこの被験者を研究に含めるための基準の変更を引き起こす有害事象を経験した場合、被験者は事前に自由に研究から撤退することができます。 早期終了手順後の不快感による研究の場合、被験者はいつでも自由に研究を中止することができます。

統計分析 基本的な特徴はサプリメントの種類ごとにリストされています。連続変数は平均 +/- 標準偏差または四分位範囲の中央値として、カテゴリ変数のパーセンテージとして表されます。 非対称分布のデータは、分析の前にログ処理を経ます。 2 つのサプリメント間の違いは、単変量および多変量統計手法を使用して評価されます。 介入前後の培地は、反復測定またはペアデータについて一般線形モデル (ANOVA) と比較されます。 単純な複数の線形回帰を実行して、独立変数間の関係を決定します。また、サプリメントの種類で検出された適合性の違いを評価するテストも実行します。 結果は平均 +/- SEM として表され、P < 0.05 の場合、差は有意であると見なされます。 非対称分布のデータは、分析の前にログ処理を経ます。

主な分析は、試験製品の摂取後と対照製品の摂取後の平均レベルの差の比較に基づいて行われます。 相対平均ベースライン値 (T0) に対する各補給終了時の平均値 (T1) 間の差も測定されます。

治療群間の時間の差は、反復測定の分散分析によって評価されます。有意水準は 2 つの尾部で <0.05 と見なされます。

各サプリメントのサンプルサイズは、Snedecor と Cochran の等式 (α を 0.05 および 1 に等しい) を使用して、約 15.44 mg/dl (標準偏差 14.28 mg/dl) に等しい血漿中の LDL コレステロールの減少を検出するために 32 に決定されました。 -β は 0.9 に等しい (Dell et al.、2002)。 この式によれば、登録する被験者の最小数は 28 となります。 この研究では、ドロップアウトの可能性を考慮して、試験製品の補充に 32 人、対照製品の補充に 32 人、合計 64 人のボランティア被験者が参加しました。

この評価は、European Journal of Nutrition に掲載された並行研究で報告された LDL コレステロールの測定値 (平均および標準偏差) に基づいて、血漿中の LDL コレステロールの減少量に基づいて行われます。 LDL コレステロールというパラメーターは、人間の健康への影響が認識されていることに加えて、より限定的であり、腸内細菌叢の変化の範囲よりも長い観察時間を必要とします。

ソースデータ/文書への直接アクセス 規制当局は、GCP 原則への準拠を評価するために臨床研究のチェックを実施したい場合があります。 規制当局は、（治験中または治験完了後に）検査を実施することを希望する場合もあります。 規制当局および/またはAPSS Trentoの臨床試験倫理委員会によって検査が必要な場合、研究者は規制当局に研究に関連する文書へのアクセスを提供することに同意する必要があります。

データ管理と記録 データと文書のソースは、データが記録される最初の場所として定義されます。 すべての原本を同じ場所に保管したり、入手できるようにしたりしないでください。 研究者は、研究に参加する各人の原本文書を保管しなければなりません。

治験中に CRF で収集されたデータは匿名の方法で文書化され、番号または記号で識別されます。 例外的な状況において、安全または規制上の理由で個人を特定する必要がある場合、OlioCRU Ltd および研究者は、そのような情報を機密に保つ必要があります。

CRF に入力されたすべてのデータは判読可能であり、黒インクで記録されなければなりません。 修正が必要な場合は、エントリを 1 行削除し、項目自体の横に正しい情報を入力してください。 訂正には、調査員または指定された有資格者がイニシャルと日付を記入する必要があります。