Att mäta effekten av kosttillskott med en ny bakprodukt på tarmmikrobiota och kolesterolmetabolism

De första resultaten av in vitro-testning av projektet PreBIOil har avgränsat kapaciteten hos ett mjöl av oliver att modulera den mikrobiella populationen i den mänskliga tarmen på ett sätt som är jämförbart med inulin som erkänts som polysackarid med en kapacitet prebiotikum. Baserat på dessa resultat, och till andra i litteraturen, har bageriprodukten PreBIOil formulerats. Produkten innehåller mjöl av oliver, bovete, ärter och kastanjer.

Det övergripande syftet med studien är att bedöma om införandet i kosten av en bageriprodukt beredd med olivmjöl, blandat med bovete-, ärt- och kastanjermjöl kan förändra profilen för tarmmikrobiotan och plasmakolesterolet, i synnerhet LDL. Studien är upplagd som kosttillskott, dubbelblind, randomiserad, parallellt med kontrollgruppen, där följande produkt kommer att jämföras:

i) en ny bageriproduktdesignad studie PreBIOil (test); ii) en bakeriproduktkontrollisoenergetisk (kontroll).

Beskrivning av livsmedel som kompletterats i försöket. Testprodukten är en ny bakad produkt formulerad med en blandning av mjöl från oliver, bovete, ärtor och kastanjer och ser ut som ett salt kex.

Deltagarna kommer att krävas för att dagligen konsumera cirka 90 gram test- eller kontrollprodukt. De exakta kvantiteterna för varje produktbatch kommer att bestämmas efter bedömning av den färdiga produktens näringsegenskaper för att ge samma kaloriintag med de två produkterna.

Smältbarhet, jäsbarhet och modulering av mikrobiotan Bovete anses vara ett icke-spannmål som förutom att innehålla fibrer, mineraler och vitaminer, såsom B2 och B6, också representerar en källa till antioxidantföreningar på grund av innehållet av flavonoider.

Ärtmjölet innehåller viktiga komponenter för människans kost (stärkelse, protein och andra näringsämnen). Hälsofördelarna förknippade med konsumtion av ärter härrör främst från koncentrationen och egenskaperna hos stärkelse, protein, fibrer, vitaminer, mineraler och fytokemikalier. Fibern som finns i integumentet och i cellväggarna i hjärtbladen bidrar till mag-tarmfunktionen. Stärkelsehalten i ärtmjöl kännetecknas av lägre glykemiskt index. Proteinerna från ärter kan producera peptider med antioxidantaktivitet. Vitamin- och mineralinnehållet i ärter kan spela en viktig roll för att förebygga bristsjukdomar, särskilt de som har att göra med brister på selen och folat. Ärter innehåller en mängd olika fytokemikalier. Dessa inkluderar polyfenoler som kan ha antioxidanter och anticancer, saponiner som förekommer hypokolesterolemi och anticanceraktiviteter och oligosackarider av galaktos som kan utöva prebiotiska fördelar i tjocktarmen.

Näringskomponenterna i kastanjmjöl består av kolhydrater, protein och fett i sammansättningen för att ge ett energivärde ca 350-400 kcal / 100 g. Kastanjer har röstats fram för att ha en positiv effekt på metabolismen av tarmbakterier och är en källa till långkedjiga fettsyror C18:1 och C18:2 och vitaminer (vitamin E). Den möjliga närvaron av polyfenoler är begränsad till de yttre skalen, vanligtvis separerade från frukten under framställningen av mjölet. Mjölet som kommer från olivmassa beskrivs inte i den vetenskapliga litteraturen för specifika näringsegenskaper för människans kost. Oliver är dock en integrerad del av medelhavskosten där de konsumeras som bordsoliver och olivolja. Olivfrukten innehåller 50 % vatten, 22 % fett, cirka 19 % kolhydrater och cirka 2 % protein; polyfenolhalten varierar i intervallet 1-3%. Oliverna konsumeras eller som olivolja eller bordsoliver. Oliverna kännetecknas av stark bitterhet, orsakad mestadels dall'oleuropein. Oleuropeinet kan nå 140 mg/g torrvikt i omogna oliver och minskar och när frukten mognar behandlas bordsoliver för att mildra den bittra smaken genom processer som maceration soda och jäsning i saltlake. Men i processen att söta bitterheten förlorade vissa viktiga föreningar som finns i oliver som polyfenoler och fibrer. Det finns inga bevis på förmågan hos extra jungfruolivoljepolyfenoler att minska risken för hjärt-kärlsjukdom, men en stor del av de möjliga effekterna av komponenterna i oliven enbart eller i synergi med polyfenolerna är fortfarande outforskade. Dessutom avlägsnas inte en stor del av den vattenlösliga fraktionen som finns i oliverna, mellan vilka fibrer och polyfenoler som har visat sig vara gynnsamma för människors hälsa, under oljeproduktionsprocessen. Det finns bevis för att vissa fenolfraktioner som sekoiridoider absorberas dåligt av tarmslemhinnan och är då tillgängliga för kolonmikrofloran. I huvudsak skulle oljan i sin helhet ha den största potentialen eftersom ett livsmedel på ett fördelaktigt sätt kan modulera sammansättningen och aktiviteten hos mikroorganismer symbiotiska mänskliga tarmen, som observerats experimentellt för andra typer av frukt.

Med hjälp av simulering in vitro av tjocktarmsjäsning har det observerats att olivmassan, även efter gräddning vid 180°C i 30 min, är kapabel att modulera den mänskliga tarmmikrobiotan med en prebiotisk effekt eller inducera en signifikant ökning av bifidobakterier. Sådan simulering in vitro utfördes genom inkubation under 24 timmar i ett satsvis fermenteringssystem med kontroll av pH och temperatur, efter inokulering med avföring erhållen från fem friska individer. Analysen av totala polyfenoler (huvudantioxidanter som finns i testprodukten) som finns i mjölet av oliver, i blandningen av mjölet och i testprodukten upptäckte en förlust av totala polyfenoler, som ett resultat av bakning lika med 40 %.

Kliniska resultat Kliniska resultat har visat att daglig konsumtion av 100 g bovete i form av mjöl har bestämt ökningen av HDL/kolesterolförhållandet och förbättrad glukostolerans och på senare tid har det observerats att konsumtionen av kex gjorda av bovete har minskat serumnivån av en markör för inflammation, myeloperoxidas (MPO) förutom en minskning av totalkolesterol med bättre lungvitalkapacitet. En färsk metaanalys av flera interventionsstudier på människans kost med tillskott av baljväxter, inklusive ärter, visade deras förmåga att minska serumnivåerna av LDL-kolesterol.

Interventionsstudier om kost med olivolja, biprodukter från bearbetning av oliver och olivbaserade produkter har genomförts med friska frivilliga och försökspersoner med olika grader av kardiovaskulär risk. Av dessa studier har indikerats de dagliga doser av totala polyfenoler som introducerats (från några mg / dag till 30 mg / dag, upp till 100 mg / dag) beroende på typen av olivolja och även berikning med extrakt. Dessa ingrepp hade i många fall en varaktighet på cirka en månad, och de flesta studierna mätte effekterna av antioxidant- och antiinflammatoriska förändringar i cirkulationssystemet, tillsammans med värden på plasmalipider och andra parametrar relaterade till oxidativ stress. I synnerhet i studien "EUROLIVE", på ett stort urval av friska individer, observerades det att fenolerna i olivolja kunde skydda blodlipider från oxidation, öka koncentrationen av HDL-kolesterol och förhållandet mellan reducerat och oxiderat glutation, dock inga förändringar dell'F2-isoprostane.

2011 godkände Europeiska myndigheten för livsmedelssäkerhet (EFSA) påståendet att olivoljepolyfenolerna, särskilt hydroxityrosol, skyddar LDL från oxidation, i en dos som är större än eller lika med 5 mg/kg/dag. Andra studier har också visat att olivoljepolyfenoler är relaterade till minskningen av CRP, minskat aterogent genuttryck i blodkroppar och sänkt blodtryck. Även om det finns bevis på förmågan hos olivoljepolyfenoler att minska risken för hjärt-kärlsjukdomar, är en stor del av de möjliga effekterna av komponenterna i oliven ensamma eller i synergi fortfarande outforskade. Dessutom extraheras inte en stor del av fibrerna och polyfenolerna i oliven i processen för oljeutvinning och elimineras som en biprodukt.

Studiens motivering Bovetemjölet tillför fibrer och flavonoider, ärtmjölet innehåller kolhydrater med lågt glykemiskt index, protein och är också en källa till antioxidanter, kastanjemjöl ger prebiotiska ämnen och vitaminer. Mjöl oliv är frukten av oliven är med dess vattenlösliga komponenter (t.ex. Fibrer och polyfenoler) och i den lösliga fraktionen av fleromättade och enkelomättade fettsyror, tokoferoler och karotenoider som endast delvis passerar extra virgin oliver. Dessa komponenter är mestadels utformade som komponenter av extra virgin olivolja och har vetenskapligt givit bevis för att bidra till förbättringen av lipidmetabolism och plasmalipider, till hjärthälsa och skyddar mot oxidativ stress.

Baserat på tillgängliga kliniska och experimentella studier har det föreslagits att konsumtion av en bakad produkt gjord av en blandning av mjöl från olivmassa, bovete, ärtor och kastanjer kan ha positiva effekter på lipidplasmabiomarkörer och tarmmikrobiota (till exempel en ökning av bifidobakterier) hos vuxna deltagare med plasmahalt av kolesterol i medelhöga till höga nivåer även om de ännu inte är patologiska.

Deklaration om överensstämmelse Denna studie kommer att utföras i enlighet med protokollet och i enlighet med god klinisk praxis (GCP), som beskrivs i ICH GCP för 1996, USA:s federala regler (CFR) och Helsingforsdeklarationen. Med undertecknandet av detta protokoll samtycker forskaren till att följa dessa krav.

Mål för studien

Det övergripande syftet med studien är att bedöma om införandet i kosten av en ny bageriprodukt som innehåller en blandning av mjöl från olivpasta, bovete, ärtor, kastanjer kan förändras:

Primära mål:

1. Profilen av fekal mikrobiota;
2. Plasmanivåer av totalt kolesterol, LDL, förhållande/total LDL och HDL;
3. Plasmanivåerna av triglycerider;
4. Apolipoprotein ApoA-I, ApoB och Lp (a).

Sekundära mål:

1. De antropometriska indexen 2 De sekundära metaboliterna av polyfenoler i humana biovätskor 3. Profilerna för metaboliter i plasma och urin utvärderade genom analys av masspektrometri (MS); 4. Blodsocker och fastande insulinnivåer; 5. C-reaktivt protein (PRC); 6. Högkänsligt C-reaktivt protein (hsPRC); 7. urinisoprostan F2; 8. oxiderat LDL i plasma.

Presentationsexperimentell design Deltagares volontärer kommer att identifieras och rekryteras vid en öppenvårdsdel av Casa di Cura Eremo di Arco (TN). Deltagarna kommer att informeras om syftet och metoderna för studien och kommer att förväljas utifrån kriterier för inkludering/exkludering. Deltagaren kommer att underteckna det informerade samtycket och kommer in i studion efter besöket på T-1, utfört i öppenvårdsdelen av Casa di Cura Eremo di Arco (TN) där det kommer att utföras en klinisk och biokemisk hälsostatus. För att tillåta korrekt övervakning av matvanor kommer den berättigade deltagaren, efter det första besöket, att fylla i en matdagbok.

Om försökspersoner kommer att vara berättigade till studien baserat på alla kriterier för inkludering och exkludering, kommer att randomiseras för att få antingen placebo eller aktiv integration vid besök T0.

Den kliniska undersökningen och insamlingen av blod och urin kommer att utföras efter fasta i cirka 10 timmar i början av uppstartsperioden (besök T-1). Kliniska tester, blodprover, insamling av avföring och urin kommer att utföras vid besöken T0, T1. Ytterligare matdagbok (4 dagar i följd) kommer att fyllas i vid besök T0 och före T1. Biverkningar, att ta mediciner och kosttillskott kommer att registreras av deltagarna i en speciell dagbok.

Deltagarna som ingår i studien kommer också att uppmanas att fylla i en sensorisk utvärdering av varje mat som erbjuds i blinda, den första smaken och i slutet av 8 veckors tillskott för varje produkt

Studieprocedur Rekrytering av deltagare Deltagarna kommer att identifieras och rekryteras i en öppenvårdsdel av Casa di cura Eremo di Arco (TN) Deltagarna kommer att informeras om syftena och metoderna för studien och kommer att förväljas utifrån kriterier för inkludering/exkludering . Om berättigad kommer deltagaren att underteckna det informerade samtycket och kommer in i studion med ett besök på T-1, vilket kommer att utföras under ett kliniskt och biokemiskt hälsotillstånd. De försökspersoner som kommer att vara berättigade till studien baserat på alla kriterier för inkludering/exkludering, kommer att inkluderas i studien och randomiseras för att få det första kosttillskottet (test eller kontroll) för att besöka T0 (två veckor senare vid inkörningen ).

Komplettering

Efter att behörighet har bedömts kommer deltagarna att randomiseras för att få integrationen med bageriprodukten med test- eller kontrollprodukten:

De enstaka dagliga doserna kommer att förpackas i förpackningar kodade av en kvalificerad grupp. Komplettering kommer att pågå i åtta veckor, dubbelblind, parallell. med en av de två produkterna (tillskrivs randomisering).

Uppföljning Projektet kommer att bestå av en period av åtta veckors tillskott, kliniska undersökningar och insamling av blod och urin kommer att göras efter en nattfasta (exklusive vattenförbrukning) på cirka 10 timmar för att besöka T-1. Kliniska tester, blodinsamling, insamling av avföring och urinprov kommer att utföras besök på T0, T1: T0 är dagen för den första integrationen, T1 kommer att vara åtta veckor efter behandlingsstart. Matdagboken kommer att sammanställas för besök T-1 och distribueras före besöken T0 och T1 för datainsamlingsbesök T0 och T1.

Klinisk utvärdering Elektrokardiogram. Ett EKG kommer att utföras vid screening (T-1). EKG-spårningarna kommer att granskas och tolkas av den polikliniska delen av äldreboendet Hermitage of Arco.

Blodtrycket kommer att mätas enligt riktlinjerna för hypertoni ISH / WHO 2004 Antropometriska index Vikt och längd kommer att mätas på en standardskala. Åtgärderna kommer att utföras på ämnen utan skor, rockar eller varma kläder. Kroppsmassaindex, BMI, beräknas som kg/m2.

Midjeomkretsen (navelsträngen) kommer att mätas på ett sätt som bestäms av National Institutes of Health, National Heart, Lung, and Blood Institute. Förhållandet mellan midje- och höftkvotens omkrets (WHR) beräknas.

Frågeformulär All information kommer att samlas in och registreras i validerade frågeformulär, inklusive personlig identifiering, medicinsk historia och information om riskfaktorer för hjärt-kärlsjukdom, läkemedelsanvändning, fysisk aktivitet och matvanor. Varje deltagare kommer också att skriva en fyra dagars matdagbok.

Deltagarna som ingår i studien kommer också att uppmanas att fylla i en sensorisk utvärdering av varje mat som erbjuds i den första blindprovningen och i slutet av 8 veckors tillskott.

Provtagning av blod och urintagning Blodet (≤ 30 ml) tas från en perifer ven efter 10 timmars fasta. 24 timmars urin kommer att samlas upp, volymen mäts och provet kommer att förvaras vid -80 ° C.

Insamling av fekala prover Avföringsprover kommer att behandlas inom 12 timmar efter provtagning. Alikvoter av varje fekalt prov kommer att frysas direkt vid -80 ° C för analys av metabolomisk profil.

Laboratorietester genom laboratorieanalys av Casa di Cura Eremo di Arco Blodprover kommer att centrifugeras enligt kraven för testerna som ska utföras omedelbart efter blodprovtagning. Plasma eller serum kommer att separeras, delvis omedelbart testas och den återstående fraktionen förvaras vid -80 ° C.

Totalkolesterol, HDL-kolesterol, triglycerider och glukos kommer att utvärderas med enzymatisk metod. LDL-kolesterol kommer att mätas analytiskt med enzymatisk metod.

Insulinnivåer kommer att bedömas med elettrochemioluminescenza. Blod- och trombocytantalet kommer att bedömas med impedentiometrisk metod. Det C-reaktiva proteinet (CRP) kommer att mätas med turbidimetrisk analys. Det högkänsliga C-reaktiva proteinet (hsPCR) kommer att mätas med turbidimetrisk analys.

Apolipoprotein AI (ApoA-I), ApoB och Lp (a) bestämdes genom immunturbidimetri.

Testet för verifiering av frånvaron av glukosuri kommer att göras genom att mäta koncentrationen av glukos i urinen.

Laboratorietester av Fondazione Edmund Mach [EMF] Urin- och plasmametabolomisk profil. F2-isoprostanerna kommer att mätas i urinen som ett mått på oxidativ stress, med hjälp av ett specifikt EIA-kit, efter rening med kromatografi i fast fas (kolonner SepPack).

Analysen av LDL oxiderat i plasman kommer att utföras med hjälp av ELISA-kit.

Proverna av urin och blod (plasma och serum) kommer att utsättas för både analys av målinriktad metabolomik (UPLC-MS/MS för icke-flyktiga föreningar och GC-MS/MS för flyktiga föreningar) som analyserar icke-målinriktad metabolomik (ULPC) -Q -TOF-MS och Nano -FTMS-Q-TOF icke-flyktigt och GC-TOF för de flyktiga föreningarna). För profiler av riktade plasmametaboliter kommer det att användas det MS-baserade Biocrates AbsoluteIDQ ® Kit P180, som genererar exakta kvantitativa data om 180 mänskliga metaboliter kopplade till risken för diabetes. Dessutom kommer specifik riktad analys att tillämpas på lipidprofilen för serumgallsyror, kortkedjiga fettsyror (kortkedjiga fettsyror, SCFA) och kvantifiering av metaboliter av polyfenoler av mikrobiellt ursprung i biovätskor (inklusive avföring) med UPLC / QQQ-MS / MS.

Analys av fekal mikrobiota. Förändringar i fekal mikrobiota hos specifika bakteriepopulationer kommer att utvärderas med metoden för in situ hybridisering med fluorescerande prober (FISH).

Även förändringar i den fekala mikrobiotan kommer att utvärderas med hjälp av en metagenomisk metod med pyrosequencing 454. Kort sagt, efter insamlingen av avföringsprover (n = 128, 2 avföringsprover vid olika tidpunkter T0, T1 från 64 försökspersoner före och efter konsumtion av varje mattest och placebo) kommer det bakteriella genomiska DNA:t att extraheras med hjälp av satsen SPIN FastDNA (MPbio) ) specifikt för avföring. Med användning av primrar specifika för den bakteriella 16S rRNA-genen (hypervariabel region V1-V3) kommer den att utföras genom PCR-amplifiering och sedan utsätta den amplifierade V1-V3 vid 454 pyrosekvensering.

Kommer att använda GS FLX Titanium Chemistry med adaptrar Multiplex Identifier (MID) för att få sekvenser med längden 600 bp som kommer att analyseras genom att jämföra databasen med 16S rRNA fylogenetisk, allmänt tillgänglig, via pipelinen QIIME som tillåter tilldelning till släktnivån hos människa tarmens mikrobiota. Det kommer att produceras totalt cirka 20 000 sekvenser för varje fekalt prov. Som kvalitetskontroll och analys av mikrobiell ekologi kommer det att användas en multivariat statistisk för att korrelera förändringarna i sammansättningen av den fekala mikrobiotan efter konsumtion av mattestning eller placebo.

Randomisering förblindad Deltagarna kommer att tilldelas slumpmässigt men jämnt fördelade efter kön och ålder till en av två behandlingar: bageriprodukttest eller kontrollprodukt även med användning av specifik programvara. De kliniska forskarna, utredarna och laboratoriepersonalen kommer att bli blinda för randomiseringen.

Behandling Tillskottet kommer att införas i den dagliga kosten genom konsumtion av en bageriprodukt (test) för en daglig konsumtion av 90 gram produkt som innehåller mjöl av oliver, från bovete, från ärter, kastanjer. Maten kommer att ge ett analogt kontrollkaloriintag. Produkterna som studeras (test eller kontroll) kommer att levereras i förpackningar som kommer att märkas på det lokala språket med studiens kodnummer. tillverkarens namn, antalet patienter, antalet studiebesök. Produkterna kommer att delas ut till deltagarna från besöket T0.

Studiens varaktighet och planering Efter att behörighet kommer att bedömas kommer deltagarna att randomiseras i två grupper (produkttest eller kontroll) som kommer att följa 8 veckors kosttillskott.

Studiens totala varaktighet, inklusive startperioden (inkörning) och behandlingen kommer att vara 10 veckor.

Rekryteringen kommer att påbörjas senare och inom tre månader efter godkännande av etikkommittén.

Inkörningen börjar inom två veckor efter det första besöket (T-1). Försökspersoner kommer att rekryteras under en period av 10 månader och studien kommer att slutföras inom 12 månader från tidpunkten för den första rekryteringen.

Kriterier för avbrytande av studien I enlighet med Helsingforsdeklarationen, ICHs standarder för god klinisk praxis och "Food and Drug Administration (FDA) Regulations" i USA, har en person rätt att när som helst dra sig ur studien och av någon anledning, utan att det påverkar framtida medicinsk vård från läkaren eller institutionen. Utredare har också rätt att dra tillbaka studieämnena (se nedan). I händelse av att en person (eller en person som är juridiskt auktoriserad ombud) beslutar sig för att gå i pension, kommer alla ansträngningar att göras för att komplettera och rapportera observationerna så bra som möjligt. En slutlig helhetsbedömning bör göras vid tidpunkten för utträdet av ämnet där orsaken till utträdet ska registreras och i alla fall bör man försöka göra en uppföljande utvärdering.

Försökspersonerna kan tas bort från studien av följande skäl:

Brott mot protokollet från försöksledaren Ej meningsfull efterlevnad av försökspersonen Försökspersonens vägran att fortsätta behandlingen eller kommentarer Oacceptabel toxicitet Forskarens beslut att stängningen är i försökspersonens bästa medicinska intresse Oklart händelse av sjukdom eller komplikationer Användning av samtidig medicinering som är oförenlig med studien. Graviditet Missbruk av alkohol eller droger De som avbryter eller dras ur studien kommer inte att ersättas.

Procedur för att avsluta

Om en individ slutar innan studien avslutats, kommer orsaken och slutdatumet att registreras. Datumet för den sista matdosen i studien ska noteras. Vid tidig uppsägning måste följande procedurer utföras:

Kliniska tester (systolisk och diastolisk, hjärtfrekvens, vikt och längd för att beräkna BMI samt midje- och höftomkrets).

Ta blod och avföring och urinuppsamling. Ett frågeformulär för matfrekvens (en gång i veckan). I händelse av att individen inte kan återvända för uppföljningsbesök kommer utredarna att ha trevat för att kontakta personen per telefon för att spåra eventuella biverkningar.

Om en person drar tillbaka sitt samtycke till att ta emot mat i studion kommer du att uppmuntras att stanna kvar i studien utan att få behandling för insamling av säkerhetsdata.

Procedurerna för tillförlitligheten för produkten som studeras Produkterna (test eller kontroll) kommer att tillhandahållas i förpackningar märkta på det lokala språket med studiens kodnummer, numret på platskoden, tillverkarens namn, antalet deltagare, antal besök av studien, antal partier, instruktioner för förvaring och utgångsdatum. Produkterna kommer att delas ut till deltagarna från besöket T0.

Koder randomisering Koderna för randomisering efter kön och ålder, för varje deltagare kommer att lagras i ett förseglat kuvert av kvalificerad grupp av sensorisk kvalitet (QS av Department of Nutrition and Food Quality of the Research and Innovation Centre of the Edmund Mach Foundation).

Kontroll av datakällor All data som samlas in under studien kommer att erhållas från primära källor och kommer att registreras i skriftliga dokument och elektroniska journaler som ämne. Resultaten av kliniska resultat, laboratorieresultat och EKG kommer att registreras i försökspersonens elektroniska journalfil. Inga uppgifter kommer att infogas direkt i "ärenderapportsformuläret" (CRF), utan att överföras från den primära källan, såsom pappersjournaler eller elektroniska.

Samtidig läkemedelsbehandling All medicin som tas från försökspersonen inom en månad före studiens början och/eller administreras under studien kommer att betraktas som samtidig behandling. Sådan behandling måste dokumenteras på lämplig sida av CRF och patienternas journaler. Eventuella förändringar av den samtidiga behandlingen under studien måste tydligt registreras och orsaken till förändringen ska dokumenteras.

Ett brev kommer att skickas till läkaren för varje deltagare, som anger vilka behandlingar som är inkompatibla med studien. Användning av följande läkemedel kommer inte att tillåtas under studien: blodförtunnande medel, antihypertensiva, lipidsänkande läkemedel, betablockerare, systemiska kortikosteroider, neuroleptika, antibiotika, laxermedel, vitamintillskott, antioxidanter och mineraler, kostfiber, prebiotika (t.ex. inulin, oligofruktos) och probiotika. Därför om försökspersonen kräver läkemedelsbehandlingar som är oförenliga med studien, meddelas patienten av den behandlande läkaren att avbryta studien och informera chefen för studien och följa procedurerna för att avsluta studien tidigt.

Överensstämmelsebetyg För att bedöma överensstämmelse med tillskott kommer de att mätas urinfenoler hos försökspersoner som kommer att kompletteras med mattester vid T0, T1. Dessutom kommer alla oanvända eller tomma förpackningar i slutet av varje vecka att returneras till försöksledarna.

Metoder Säkerhet Det fanns inga säkerhetsproblem under tidigare studier relaterade till konsumtion av produkter gjorda av oliver, bovete, ärtmjöl, kastanjmjöl.

Studien kommer att övervakas av medicinsk och paramedicinsk personal vid Casa di Cura Eremo i Arco. Biverkningar kommer fortfarande att registreras under hela studien. Onormala laboratorievärden som inducerar kliniska tecken eller symtom eller kräver terapeutisk intervention kommer omedelbart att meddelas försökspersonen, om försökspersonen uttryckligen har uttryckt sin önskan att få sådan kommunikation i form av informerat samtycke. Försökspersonen kommer att vara fri att dra sig ur studien i förväg om ett behov av terapeutisk intervention inte är förenligt med studien, eller om du upplever biverkningar som orsakar en förändring av kriterierna för att inkludera denna patient i studien. Försökspersonen kommer fortfarande att vara fri att dra sig ur studien när som helst, om studien beror på obehag efter proceduren för tidig avslutning.

Statistisk analys De grundläggande egenskaperna är listade efter typ av komplettering: kontinuerliga variabler uttrycks som medel +/- standardavvikelse eller median med interkvartila intervall och i procent för kategoriska variabler. Data med en asymmetrisk fördelning följer en loggbearbetning före analys. Skillnaderna mellan de två tilläggen kommer att utvärderas med univariata och multivariata statistiska metoder. Mediet före och efter interventionen kommer att jämföras med den allmänna linjära modellen (ANOVA) för upprepade mätningar eller för parade data. Du kommer att utföra enkla och multipla linjära regressioner för att bestämma sambanden mellan oberoende variabler; Vi kommer också att köra testet för att utvärdera skillnader i efterlevnad som upptäcks i typerna av tillskott. Resultaten uttrycks som medelvärde +/- SEM och skillnaderna kommer att anses vara signifikanta när P <0,05. Data med en asymmetrisk fördelning följer en loggbearbetning före analys.

Huvudanalysen kommer att baseras på en jämförelse av skillnaderna i medelnivåer efter konsumtion av testprodukt och efter konsumtion av kontroll. Skillnaderna mellan medelvärdena vid slutet av varje tillskott (T1) i förhållande till det relativa medelvärdet för baslinje (T0) kommer också att mätas.

Skillnaderna i tid mellan behandlingsarmarna kommer att utvärderas genom variansanalys för upprepade mätningar. Signifikansnivån kommer att betraktas som <0,05 i två svansar.

Provstorleken för varje tillskott har bestämts till 32 för att detektera en minskning av LDL-kolesterol i plasma lika med cirka 15,44 mg/dl med en standardavvikelse på 14,28 mg/dl med användning av ekvationen Snedecor och Cochran med α lika med 0,05 och 1 -β lika med 0,9 (Dell et al., 2002). Enligt denna formel är det minsta antalet ämnen att registrera sig lika med 28. Med hänsyn till eventuella avhopp, 32 personer för komplettering med testprodukten och 32 personer för komplettering med kontrollprodukt för totalt 64 frivilliga försökspersoner i denna studie.

Bedömningen görs på basis av mängden av minskningen av LDL-kolesterol i plasma, på basis av de mått (medelvärde och standardavvikelse) av LDL-kolesterol som rapporterats i en parallell studie publicerad i European Journal of Nutrition. Parametern LDL-kolesterol, förutom att vara en erkänd effekt på människors hälsa, är mer restriktiv och kräver observationstider längre än omfattningen av modifieringen av tarmmikrofloran.

Direkt tillgång till källdata/dokument Tillsynsmyndigheter kan vilja utföra kontroller av klinisk forskning för att utvärdera överensstämmelse med principerna för GCP. Tillsynsmyndigheter kan också vilja genomföra en inspektion (under försöket eller efter det att det har avslutats). Om en inspektion krävs av en tillsynsmyndighet och/eller den etiska kommittén för kliniska prövningar c/o APSS Trento, måste forskaren gå med på att ge tillgång, tillsynsmyndigheter, dokumentationen relaterad till studien.

Datahantering och register Källan till data och dokumentation definieras som den första plats där data registreras. Eventuella originaldokument och bör inte förvaras och göras tillgängliga på samma plats. Forskaren ska behålla originaldokumenten för varje person som deltar i studien.

De uppgifter som samlas in på CRF under försöket kommer att dokumenteras på ett anonymt sätt, och de kommer att identifieras med siffror eller symboler. Om det under exceptionella omständigheter är nödvändigt, av säkerhets- eller regleringsskäl, att identifiera personen, är OlioCRU Ltd och forskaren skyldiga att hålla sådan information konfidentiell.

Alla data som matas in i CRF ska vara läsbara och registrerade med svart bläck. Om du skulle behöva en rättelse ska det göras genom att radera posten med en enda rad och ange rätt information bredvid själva objektet. Rättelsen måste paraferas och dateras av utredaren eller en kvalificerad person utsedd.