Pomiar wpływu suplementacji diety nowym produktem piekarniczym na mikroflorę jelitową i metabolizm cholesterolu

Pierwsze wyniki badań in vitro w ramach projektu PreBIOil określiły zdolność mąki z oliwek do modulowania populacji drobnoustrojów w jelicie człowieka w sposób porównywalny do zdolności inuliny uznawanej za polisacharyd o właściwościach prebiotycznych. Na podstawie tych wyników i innych w literaturze opracowano produkt piekarniczy PreBIOil. Produkt zawiera mąkę z oliwek, gryczaną, grochową i kasztanową.

Ogólnym celem pracy jest ocena, czy wprowadzenie do diety pieczywa przygotowanego z mąki z oliwek zmieszanej z mąką gryczaną, grochową i kasztanową może zmienić profil mikroflory jelitowej oraz poziom cholesterolu w osoczu, w szczególności LDL. Badanie założone jest jako suplementacja diety, podwójnie ślepa, randomizowana, równoległa z grupą kontrolną, w której porównywany będzie następujący produkt:

i) projekt nowego produktu piekarniczego PreBIOil (test); ii) kontrola produktu piekarniczego izoenergetyczna (kontrola).

Opis żywności uzupełnionej w badaniu Produktem testowym jest nowy wyrób wypiekany z mieszaniną mąki z oliwek, gryki, grochu i kasztanów, mający wygląd słonego herbatnika.

Uczestnicy będą musieli codziennie spożywać około 90 gramów produktu testowego lub kontrolnego. Dokładne ilości każdej partii produktu zostaną określone po ocenie właściwości odżywczych gotowego produktu w celu zapewnienia takiego samego spożycia kalorii w przypadku obu produktów.

Strawność, fermentowalność i modulacja mikroflory Gryka zaliczana jest do produktów bezzbożowych, które oprócz błonnika, składników mineralnych i witamin, takich jak B2 i B6, stanowią również źródło związków przeciwutleniających ze względu na zawartość flawonoidów.

Mąka grochowa zawiera ważne składniki diety człowieka (skrobię, białko i inne składniki odżywcze). Korzyści zdrowotne związane ze spożywaniem grochu wynikają przede wszystkim ze stężenia i właściwości skrobi, białka, błonnika, witamin, minerałów i fitochemikaliów. Błonnik zawarty w powłoce iw ścianach komórkowych liścienia przyczynia się do funkcjonowania przewodu pokarmowego. Zawartość skrobi w mące grochowej charakteryzuje się niższym indeksem glikemicznym. Białka grochu mogą wytwarzać peptydy o działaniu przeciwutleniającym. Zawartość witamin i minerałów w grochu może odgrywać ważną rolę w zapobieganiu chorobom niedoborowym, w szczególności związanym z niedoborami selenu i kwasu foliowego. Groch zawiera różnorodne fitochemikalia. Należą do nich polifenole, które mogą mieć działanie przeciwutleniające i przeciwnowotworowe, saponiny, które są obecne w hipocholesterolemii i przeciwnowotworowych, oraz oligosacharydy galaktozy, które mogą wywierać korzyści prebiotyczne w jelicie grubym.

Na składniki odżywcze mąki kasztanowej składają się węglowodany, białko i tłuszcz w składzie tak, aby zapewnić wartość energetyczną około 350-400 kcal/100 g. Kasztany zostały uznane za mające pozytywny wpływ na metabolizm bakterii jelitowych i są źródłem długołańcuchowych kwasów tłuszczowych C18:1 i C18:2 oraz witamin (witamina E). Ewentualna obecność polifenoli ogranicza się do zewnętrznych skórek, zwykle oddzielanych od owoców podczas produkcji mąki. Mąka pochodząca z pasty z oliwek nie jest opisana w literaturze naukowej pod kątem szczególnych właściwości odżywczych dla diety człowieka. Jednak oliwki są integralną częścią diety śródziemnomorskiej, w której są spożywane jako oliwki stołowe i oliwa z oliwek. Owoc oliwki zawiera 50% wody, 22% tłuszczu, około 19% węglowodanów i około 2% białka; zawartość polifenoli waha się w przedziale 1-3%. Oliwki są spożywane lub jako oliwa z oliwek lub oliwki stołowe. Oliwki charakteryzują się mocną goryczką, spowodowaną głównie dall'oleuropeiną. Oleuropeina może osiągnąć 140 mg/g suchej masy w niedojrzałych oliwkach i spada, a wraz z dojrzewaniem owoców Oliwki stołowe są poddawane obróbce w celu złagodzenia gorzkiego smaku poprzez procesy takie jak maceracja sodowa i fermentacja w solance. Jednak w procesie dosładzania goryczki straciłem kilka ważnych związków obecnych w oliwkach, takich jak polifenole i błonnik. Nie ma dowodów na zdolność polifenoli oliwy z oliwek z pierwszego tłoczenia do zmniejszenia ryzyka chorób sercowo-naczyniowych, ale duża część możliwych skutków samych składników oliwy lub w synergii z polifenolami jest wciąż niezbadana. Ponadto duża część rozpuszczalnej w wodzie frakcji zawartej w oliwkach, pomiędzy którą znajduje się błonnik i polifenole o udowodnionym dobroczynnym działaniu na zdrowie człowieka, nie jest usuwana w procesie produkcji oliwy. Istnieją dowody na to, że niektóre frakcje fenolowe, takie jak sekoirydoidy, są słabo wchłaniane przez błonę śluzową jelit i są następnie dostępne dla mikroflory okrężnicy. Zasadniczo olej jako całość miałby największy potencjał, ponieważ żywność może korzystnie modulować skład i aktywność mikroorganizmów symbiotycznych ludzkich jelit, co zaobserwowano eksperymentalnie dla innych rodzajów owoców.

Za pomocą symulacji in vitro fermentacji w okrężnicy zaobserwowano, że pasta z oliwek, nawet po pieczeniu w temperaturze 180°C przez 30 minut, jest zdolna do modulowania ludzkiej mikroflory jelitowej z efektem prebiotycznym lub indukowania znacznego wzrostu bifidobakterii. Taką symulację in vitro przeprowadzono przez inkubację przez 24 godziny w systemie fermentacji okresowej z kontrolą pH i temperatury, po zaszczepieniu kałem uzyskanym od pięciu zdrowych osobników. Analiza polifenoli ogółem (głównych przeciwutleniaczy obecnych w produkcie testowym) obecnych w mące z oliwek, mieszance mąki oraz w produkcie testowym wykazała ubytek polifenoli ogółem w wyniku pieczenia równy 40%.

Wyniki kliniczne Wyniki kliniczne wykazały, że dzienne spożycie 100 g gryki w postaci mąki wpłynęło na wzrost wskaźnika HDL/cholesterol i poprawę tolerancji glukozy, a ostatnio zaobserwowano, że spożycie herbatników z gryki zmniejszyło poziom w surowicy markera stanu zapalnego, mieloperoksydazy (MPO), oprócz obniżenia całkowitego cholesterolu z lepszą pojemnością życiową płuc. Niedawna metaanaliza kilku badań interwencyjnych dotyczących diety człowieka z suplementacją roślin strączkowych, w tym grochu, wykazała ich zdolność do obniżania poziomu cholesterolu LDL w surowicy.

Badania interwencyjne diety z oliwą z oliwek, produktami ubocznymi przetwarzania oliwek i produktami na bazie oliwek przeprowadzono na zdrowych ochotnikach i osobach z różnym stopniem ryzyka sercowo-naczyniowego. W badaniach tych wskazano dzienne dawki wprowadzanych polifenoli ogółem (od kilku mg/dobę do 30 mg/dobę, aż do 100 mg/dobę) w zależności od rodzaju oliwy z oliwek oraz wzbogacenia ekstraktami. Interwencje te w wielu przypadkach trwały około miesiąca, aw większości badań mierzono wpływ zmian antyoksydacyjnych i przeciwzapalnych w układzie krążenia, a także wartości lipidów osocza i innych parametrów związanych ze stresem oksydacyjnym. W szczególności w badaniu „EUROLIVE”, na dużej próbie zdrowych osób, zaobserwowano, że fenole oliwy z oliwek były w stanie chronić lipidy krwi przed utlenianiem, zwiększać stężenie cholesterolu HDL i związek między zredukowanym i utlenionym glutationem, jednak bez zmian dell'F2-isoprostane.

W 2011 roku Europejski Urząd ds. Bezpieczeństwa Żywności (EFSA) zatwierdził twierdzenie, że polifenole oliwy z oliwek, zwłaszcza hydroksytyrozol, chronią LDL przed utlenianiem w dawce większej lub równej 5 mg/kg/dzień. Inne badania wykazały również, że polifenole oliwy z oliwek są związane z redukcją CRP, zmniejszoną ekspresją genów aterogennych w komórkach krwi i obniżonym ciśnieniem krwi. Chociaż istnieją dowody na zdolność polifenoli oliwy z oliwek do zmniejszania ryzyka chorób sercowo-naczyniowych, duża część możliwych skutków działania składników oliwy samodzielnie lub w synergii jest nadal niezbadana. Ponadto duża część błonnika i polifenoli zawartych w oliwce nie jest ekstrahowana w procesie ekstrakcji oleju i jest eliminowana jako produkt uboczny.

Przesłanki badania Mąka gryczana dodaje błonnika i flawonoidów, mąka grochowa zawiera węglowodany o niskim indeksie glikemicznym, białko, a także jest źródłem przeciwutleniaczy, mąka kasztanowa dostarcza substancji prebiotycznych i witamin. Mąka z oliwek to owoc oliwki wraz z rozpuszczalnymi w wodzie składnikami (np. błonnik i polifenole) oraz we frakcji rozpuszczalnej wielonienasyconych i jednonienasyconych kwasów tłuszczowych, tokoferoli i karotenoidów, które tylko częściowo przechodzą przez oliwę extra virgin. Składniki te są zaprojektowane głównie jako składniki oliwy z oliwek z pierwszego tłoczenia i udowodniono naukowo, że przyczyniają się do poprawy metabolizmu lipidów i struktury lipidów osocza, dla zdrowia serca i ochrony przed stresem oksydacyjnym.

Na podstawie dostępnych badań klinicznych i eksperymentalnych zasugerowano, że spożywanie pieczywa sporządzonego z mieszanki mąki z pasty z oliwek, gryki, grochu i kasztanów może mieć pozytywny wpływ na biomarkery lipidowe osocza i mikroflorę jelitową (np. bifidobakterii) u dorosłych uczestników z zawartością cholesterolu w osoczu na średnim lub wysokim poziomie, nawet jeśli nie jest jeszcze patologiczna.

Oświadczenie o zgodności Badanie to zostanie przeprowadzone zgodnie z Protokołem i zgodnie z Dobrą Praktyką Kliniczną (GCP), jak opisano w ICH GCP z 1996 r., Amerykańskim Kodeksie Przepisów Federalnych (CFR) i Deklaracji Helsińskiej. Podpisując niniejszy protokół, badacz wyraża zgodę na przestrzeganie tych wymagań.

Cele badania

Ogólnym celem pracy jest ocena, czy wprowadzenie do diety nowego wyrobu piekarniczego zawierającego mieszankę mąki z pasty z oliwek, gryki, grochu, kasztanów jest w stanie zmienić:

Główne cele:

1. Profil mikrobiomu kałowego;
2. Poziomy cholesterolu całkowitego, LDL, stosunek / całkowity LDL i HDL w osoczu;
3. Poziomy triglicerydów w osoczu;
4. Apolipoproteina ApoA-I, ApoB i Lp (a).

Cele drugorzędne:

1.Wskaźniki antropometryczne 2. Metabolity wtórne polifenoli w płynach biologicznych człowieka 3.Profile metabolitów w osoczu i moczu oceniane metodą spektrometrii mas (MS); 4. Poziom glukozy we krwi i insuliny na czczo; 5. Białko C-reaktywne (PRC); 6. Białko C-reaktywne o wysokiej czułości (hsPRC); 7. izoprostan F2 w moczu; 8. utleniony LDL w osoczu.

Eksperymentalny projekt prezentacji Uczestnicy zostaną zidentyfikowani i zwerbowani jako ochotnicy w ambulatoryjnej części Casa di Cura Eremo di Arco (TN). Uczestnicy zostaną poinformowani o celach i metodach badania oraz zostaną wstępnie wybrani na podstawie kryteriów włączenia/wyłączenia. Uczestnik podpisze świadomą zgodę i wejdzie do studia po wizycie w T-1, wykonanej w części ambulatoryjnej Casa di Cura Eremo di Arco (TN), gdzie zostanie przeprowadzony kliniczny i biochemiczny stan zdrowia. Aby umożliwić właściwe monitorowanie nawyków żywieniowych, kwalifikujący się uczestnik po pierwszej wizycie wypełni dzienniczek żywieniowy.

Jeśli uczestnicy będą kwalifikować się do badania w oparciu o wszystkie kryteria włączenia i wyłączenia, zostaną losowo przydzieleni do grupy otrzymującej placebo lub aktywną integrację podczas wizyty T0.

Badanie kliniczne oraz pobranie krwi i moczu zostanie przeprowadzone po poście przez około 10 godzin na początku okresu startowego (wizyta T-1). Badania kliniczne, pobranie krwi, pobranie kału i moczu będą wykonywane na wizytach T0, T1. Dodatkowy dzienniczek żywieniowy (4 kolejne dni) będzie uzupełniany na wizytach T0 i przed T1. Zdarzenia niepożądane, przyjmowane leki i suplementy będą odnotowywane przez uczestników w specjalnym dzienniczku.

Osoby biorące udział w badaniu zostaną również poproszone o wypełnienie oceny sensorycznej każdego oferowanego pokarmu w ciemno, pierwszego smaku i na koniec 8 tygodni suplementacji dla każdego produktu

Procedura badania Rekrutacja uczestników Uczestnicy zostaną zidentyfikowani i zrekrutowani w części ambulatoryjnej Casa di cura Eremo di Arco (TN) Uczestnicy zostaną poinformowani o celach i metodach badania oraz zostaną wstępnie wybrani na podstawie kryteriów włączenia/wyłączenia . W przypadku zakwalifikowania się uczestnik podpisze świadomą zgodę i wejdzie do studia z wizytą w T-1, która zostanie przeprowadzona w stanie klinicznym i biochemicznym. Osoby, które będą kwalifikować się do badania na podstawie wszystkich kryteriów włączenia/wyłączenia, zostaną włączone do badania i losowo przydzielone do otrzymania pierwszego suplementu diety (testowego lub kontrolnego) na wizytę T0 (dwa tygodnie później przez run-in) ).

Suplementacja

Po ocenie kwalifikowalności uczestnicy zostaną losowo przydzieleni do integracji produktu piekarniczego z produktem testowym lub kontrolnym:

Pojedyncze dawki dzienne będą pakowane w opakowania kodowane przez wykwalifikowaną grupę. Suplementacja będzie trwała osiem tygodni, podwójnie ślepa, równolegle. z jednym z dwóch produktów (przypisanych randomizacji).

Kontynuacja Projekt będzie obejmował okres 8 tygodni suplementacji, badania kliniczne oraz pobranie krwi i moczu po całonocnej głodówce (z wyłączeniem picia wody) trwającej około 10 godzin na wizytę T-1. Badania kliniczne, pobranie krwi, pobranie kału i moczu będą wykonywane wizyty w T0, T1: T0 to dzień pierwszej integracji, T1 będzie osiem tygodni po rozpoczęciu leczenia. Dzienniczek żywności zostanie opracowany podczas wizyty T-1 i rozprowadzony przed wizytami T0 i T1 w celu zebrania danych podczas wizyt T0 i T1.

Ocena kliniczna Elektrokardiogram. Podczas badania przesiewowego (T-1) zostanie wykonane badanie EKG. Zapisy EKG będą przeglądane i interpretowane przez ambulatoryjną część domu opieki Hermitage of Arco.

Ciśnienie krwi będzie mierzone zgodnie z wytycznymi dla nadciśnienia tętniczego ISH/WHO 2004 Wskaźniki antropometryczne Waga i wzrost będą mierzone na standardowej wadze. Działania będą przeprowadzane na osobach bez butów, płaszczy i ciepłej odzieży. Wskaźnik masy ciała, BMI, oblicza się w kg/m2.

Obwód talii (pępkowy) zostanie zmierzony w sposób określony przez National Institutes of Health, National Heart, Lung and Blood Institute. Obliczany jest stosunek obwodu talii do obwodu bioder (WHR).

Kwestionariusze Wszystkie informacje zostaną zebrane i zapisane w zatwierdzonych kwestionariuszach, w tym identyfikacja osobista, historia medyczna oraz informacje na temat czynników ryzyka chorób układu krążenia, stosowanych leków, aktywności fizycznej i nawyków żywieniowych. Każdy uczestnik napisze również czterodniowy dziennik żywieniowy.

Osoby biorące udział w badaniu zostaną również poproszone o wypełnienie oceny sensorycznej każdego oferowanego pokarmu podczas pierwszej ślepej degustacji oraz na koniec 8 tygodni suplementacji.

Pobieranie próbek krwi i moczu Krew (≤ 30 ml) zostanie pobrana z żyły obwodowej po 10 godzinach postu. Zostanie pobrany 24-godzinny mocz, zmierzona objętość i próbka będzie przechowywana w temperaturze -80 ° C.

Pobieranie próbek kału Próbki kału zostaną przetworzone w ciągu 12 godzin od pobrania. Porcje każdej próbki kału zostaną zamrożone bezpośrednio w temperaturze -80°C do analizy profilu metabolomicznego.

Badania laboratoryjne przez analizę laboratoryjną Casa di Cura Eremo di Arco Próbki krwi zostaną odwirowane zgodnie z wymaganiami badań, które należy wykonać natychmiast po pobraniu krwi. Osocze lub surowica zostaną oddzielone, część od razu przebadana, a pozostała frakcja przechowywana w temperaturze -80°C.

Cholesterol całkowity, cholesterol HDL, triglicerydy i glukozę będą oznaczane metodą enzymatyczną. Cholesterol LDL będzie oznaczany analitycznie metodą enzymatyczną.

Poziomy insuliny zostaną ocenione metodą elektrochemioluminescenza. Morfologia i liczba płytek krwi zostaną ocenione metodą impedencjometryczną. Białko C-reaktywne (CRP) będzie mierzone za pomocą testu turbidymetrycznego. Białko C-reaktywne o wysokiej czułości (hsPCR) zostanie zmierzone za pomocą testu turbidymetrycznego.

Apolipoproteinę AI (ApoA-I), ApoB i Lp (a) określono za pomocą immunoturbidymetrii.

Test do weryfikacji braku cukromoczu zostanie wykonany poprzez pomiar stężenia glukozy w moczu.

Badania laboratoryjne Fondazione Edmund Mach [EMF] Profil metaboliczny moczu i osocza. F2-izoprostany będą mierzone w moczu jako miara stresu oksydacyjnego, za pomocą specjalnego zestawu EIA, po oczyszczeniu metodą chromatografii na fazie stałej (kolumny SepPack).

Analiza utlenionego LDL w osoczu zostanie przeprowadzona za pomocą zestawu ELISA.

Próbki moczu i krwi (osocze i surowica) zostaną poddane zarówno analizie metabolomiki celowanej (UPLC-MS/MS dla związków nielotnych i GC-MS/MS dla związków lotnych), jak i analizom metabolomiki niecelowanej (ULPC -Q -TOF-MS i Nano -FTMS-Q-TOF nielotne i GC-TOF dla związków lotnych). W przypadku profili docelowych metabolitów w osoczu zostanie wykorzystany oparty na MS zestaw Biocrates AbsoluteIDQ ® Kit P180, generujący dokładne dane ilościowe dotyczące 180 ludzkich metabolitów powiązanych z ryzykiem cukrzycy. Ponadto specyficzna ukierunkowana analiza zostanie zastosowana do profilu lipidowego kwasów żółciowych w surowicy, krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych (krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe, SCFA) oraz ilościowego oznaczenia metabolitów polifenoli pochodzenia mikrobiologicznego w płynach biologicznych (w tym kale) za pomocą UPLC / QQQ-MS / MS.

Analiza mikroflory kałowej. Zmiany mikrobioty kałowej poszczególnych populacji bakterii będą oceniane metodą hybrydyzacji in situ z sondami fluorescencyjnymi (FISH).

Również zmiany w mikroflorze kałowej zostaną ocenione przy użyciu podejścia metagenomicznego przy użyciu pirosekwencjonowania 454. Krótko mówiąc, po pobraniu próbek kału (n = 128, 2 próbki kału w różnym czasie T0, T1 od 64 osób przed i po spożyciu każdego testu żywnościowego i placebo) nastąpi ekstrakcja bakteryjnego genomowego DNA za pomocą zestawu SPIN FastDNA (MPbio ) specyficzne dla kału. Przy użyciu starterów specyficznych dla bakteryjnego genu 16S rRNA (region hiperzmienny V1-V3) zostanie przeprowadzona przez amplifikację PCR, a następnie poddanie zamplifikowanego V1-V3 pirosekwencjonowaniu w pozycji 454.

Użyje GS FLX Titanium Chemistry z adapterami Multiplex Identifier (MID), aby uzyskać sekwencje o długości 600 bp, które zostaną przeanalizowane poprzez porównanie bazy filogenetycznej 16S rRNA, publicznie dostępnej, za pośrednictwem potoku QIIME, który umożliwia przypisanie do poziomu rodzaju ludzkiego mikrobiota jelitowa. W sumie zostanie wyprodukowanych około 20 000 sekwencji dla każdej próbki kału. Jako kontrola jakości i analiza ekologii mikrobiologicznej zostanie wykorzystana wieloczynnikowa statystyka w celu skorelowania zmian w składzie mikroflory kałowej po spożyciu testów żywności lub placebo.

Randomizacja zaślepiona Uczestnicy zostaną przydzieleni losowo, ale równomiernie według płci i wieku, do jednego z dwóch zabiegów: testu produktu piekarniczego lub produktu kontrolnego nawet przy użyciu określonego oprogramowania. Badacze kliniczni, badacze i personel laboratoryjny będą ślepi na randomizację.

Leczenie Suplementacja zostanie wprowadzona do codziennej diety poprzez spożycie wyrobu piekarniczego (testowego) przy dziennym spożyciu 90 g produktu zawierającego mąkę z oliwek, gryczaną, grochową, kasztanową. Jedzenie zapewni analogiczną kontrolę spożycia kalorii. Produkty objęte badaniem (badane lub kontrolne) będą dostarczane w opakowaniach oznaczonych w lokalnym języku numerem kodu badania. nazwa producenta, liczba pacjentów, liczba wizyt studyjnych. Produkty zostaną rozdane uczestnikom wizyty T0.

Czas trwania badania i planowanie Po ocenie kwalifikowalności uczestnicy zostaną losowo podzieleni na dwie grupy (testowa lub kontrolna), które będą przechodzić przez 8 tygodni suplementacji diety.

Całkowity czas trwania badania, wliczając w to okres początkowy (wstępny) i leczenie, wyniesie 10 tygodni.

Rekrutacja rozpocznie się później iw ciągu trzech miesięcy od zatwierdzenia przez Komisję Etyki.

Docieranie rozpocznie się w ciągu dwóch tygodni od pierwszej wizyty (T-1). Osoby badane będą rekrutowane przez okres 10 miesięcy, a badanie zostanie zakończone w ciągu 12 miesięcy od momentu pierwszej rekrutacji.

Kryteria przerwania badania Zgodnie z Deklaracją Helsińską, standardami dobrej praktyki klinicznej ICH oraz „Przepisami Agencji ds. Żywności i Leków (FDA)” Stanów Zjednoczonych, osoba ma prawo wycofania się z badania w dowolnym momencie i z jakiegokolwiek powodu, bez uszczerbku dla przyszłej opieki medycznej ze strony lekarza lub instytucji. Badacze mają również prawo do wycofania badanych osób (patrz poniżej). W przypadku, gdy osoba (lub osoba ustawowo umocowana) zdecyduje się przejść na emeryturę, dołożymy wszelkich starań, aby jak najlepiej uzupełnić i zgłosić uwagi. Ostatecznej kompleksowej oceny należy dokonać w momencie wycofania się uczestnika, w którym należy zarejestrować przyczynę wycofania, aw każdym przypadku należy podjąć próbę przeprowadzenia oceny uzupełniającej.

Osoby badane mogą zostać usunięte z badania z następujących powodów:

Naruszenie Protokołu przez eksperymentatora Nieznaczące przestrzeganie przez badanego Odmowa kontynuowania leczenia przez badanego lub komentarze Niedopuszczalna toksyczność Decyzja badacza, że ​​zamknięcie leży w najlepszym interesie medycznym badanego Niejasne zdarzenie chorobowe lub powikłania Użycie jednocześnie stosowane leki, które są niezgodne z badaniem. Ciąża Nadużywanie alkoholu lub narkotyków Osoby, które przerwały lub zostały wycofane z badania, nie zostaną zastąpione.

Procedura wypowiedzenia

Jeśli dana osoba zatrzyma się przed zakończeniem badania, zostanie odnotowany powód i data zakończenia. Należy odnotować datę ostatniej dawki pokarmu w badaniu. W przypadku wcześniejszego rozwiązania umowy należy wykonać następujące procedury:

Badania kliniczne (skurczowe i rozkurczowe, tętno, waga i wzrost do obliczenia BMI oraz obwodu talii i bioder).

Pobieranie krwi i kału oraz zbiórka moczu. Kwestionariusz częstotliwości jedzenia (co tydzień). W przypadku, gdy dana osoba nie może wrócić na wizytę kontrolną, badacze będą szukać po omacku ​​kontaktu telefonicznego z tą osobą w celu śledzenia wszelkich zdarzeń niepożądanych.

Jeśli osoba wycofa zgodę na otrzymywanie posiłków w studio, będziesz zachęcany do pozostania w badaniu bez leczenia w celu zebrania danych dotyczących bezpieczeństwa.

Procedury wiarygodności badanego produktu Produkty (badane lub kontrolne) będą dostarczane w opakowaniach oznaczonych w lokalnym języku numerem kodu badania, numerem kodu zakładu, nazwą producenta, liczbą uczestników, liczba wizyt w badaniu, numer partii, instrukcja przechowywania i daty ważności. Produkty zostaną rozdane uczestnikom wizyty T0.

Randomizacja kodów Kody randomizacji ze względu na płeć i wiek, dla każdego uczestnika będą przechowywane w zapieczętowanej kopercie przez wykwalifikowaną grupę Jakości Sensorycznej (QS Departamentu Żywienia i Jakości Żywności Centrum Badań i Innowacji Fundacji Edmunda Macha).

Kontrola źródła danych Wszystkie dane zebrane podczas badania zostaną pozyskane z pierwotnych źródeł i zostaną zapisane w dokumentach pisemnych i elektronicznej dokumentacji medycznej jako temat. Wyniki badań klinicznych, laboratoryjnych i EKG zostaną zapisane w elektronicznej kartotece medycznej pacjenta. Żadne dane nie zostaną wprowadzone bezpośrednio do „formularza opisu przypadku” (CRF), bez przeniesienia ich z pierwotnego źródła, takiego jak akta papierowe lub elektroniczne.

Terapia lekami towarzyszącymi Wszelkie leki przyjmowane od uczestnika w ciągu jednego miesiąca przed rozpoczęciem badania i/lub podawane podczas badania będą uważane za terapię towarzyszącą. Takie leczenie musi być udokumentowane na odpowiedniej stronie CRF i dokumentacji medycznej pacjentów. Wszelkie zmiany w terapii towarzyszącej podczas badania muszą być wyraźnie odnotowane, a przyczyna zmiany powinna zostać udokumentowana.

Do lekarza każdego uczestnika zostanie wysłane pismo określające, jakie zabiegi towarzyszące są niezgodne z badaniem. W trakcie badania nie będzie dozwolone stosowanie leków rozrzedzających krew, hipotensyjnych, hipolipemizujących, beta-blokerów, kortykosteroidów ogólnoustrojowych, neuroleptyków, antybiotyków, środków przeczyszczających, suplementów witaminowych, przeciwutleniaczy i składników mineralnych, błonnika pokarmowego, prebiotyków (np. inulina, oligofruktoza) i probiotyki. W związku z tym, jeśli pacjent wymaga terapii lekowej niezgodnej z badaniem, lekarz prowadzący powiadamia pacjenta o konieczności zakończenia badania i poinformowaniu kierownika badania oraz o przestrzeganiu procedur wcześniejszego zakończenia.

Ocena zgodności Aby ocenić zgodność z suplementacją, zostaną zmierzone fenole w moczu u osób, które zostaną uzupełnione testami żywności w T0, T1. Ponadto wszystkie niewykorzystane lub puste opakowania na koniec każdego tygodnia zostaną zwrócone eksperymentatorom.

Metody Bezpieczeństwo We wcześniejszych badaniach nie występowały problemy bezpieczeństwa związane ze spożywaniem produktów z oliwek, mąki gryczanej, grochowej, kasztanowej.

Badanie będzie monitorowane przez personel medyczny i paramedyczny Casa di Cura Eremo w Arco. Zdarzenia niepożądane będą nadal rejestrowane w trakcie badania. Nieprawidłowe wartości laboratoryjne, które wywołują objawy kliniczne lub wymagają interwencji terapeutycznej, zostaną niezwłocznie przekazane uczestnikowi, jeśli wyraźnie wyraził on chęć otrzymania takiej informacji w formie świadomej zgody. Uczestnik będzie mógł wcześniej wycofać się z badania, jeśli wymagająca interwencji terapeutycznej nie jest zgodna z badaniem lub jeśli wystąpią zdarzenia niepożądane, które powodują zmianę kryteriów włączenia tego uczestnika do badania. Uczestnik nadal będzie mógł wycofać się z badania w dowolnym momencie, jeśli badanie jest spowodowane dyskomfortem po procedurze wcześniejszego zakończenia.

Analiza statystyczna Podstawowe cechy zestawiono według rodzaju uzupełnienia: zmienne ciągłe wyrażono jako średnią +/- odchylenie standardowe lub mediany z rozstępami międzykwartylowymi oraz jako procent dla zmiennych kategorycznych. Dane o asymetrycznym rozkładzie zostaną poddane przetwarzaniu dziennika przed analizą. Różnice między dwoma suplementami zostaną ocenione za pomocą jednowymiarowych i wielowymiarowych metod statystycznych. Pożywka przed i po interwencji zostanie porównana z ogólnym modelem liniowym (ANOVA) dla powtarzanych pomiarów lub danych sparowanych. Przeprowadzisz proste i wielokrotne regresje liniowe, aby określić relacje między zmiennymi niezależnymi; przeprowadzimy również test, aby ocenić różnice w zgodności wykryte w rodzajach suplementacji. Wyniki wyrażono jako średnie +/- SEM, a różnice będą uważane za istotne, gdy P <0,05. Dane o asymetrycznym rozkładzie zostaną poddane przetwarzaniu dziennika przed analizą.

Główna analiza będzie oparta na porównaniu różnic w średnich poziomach po spożyciu badanego produktu i po spożyciu kontroli. Mierzone będą również różnice między wartościami średnimi na końcu każdej suplementacji (T1) w stosunku do względnej średniej wartości wyjściowej (T0).

Różnice w czasie między ramionami leczenia zostaną ocenione przez analizę wariancji dla powtarzanych pomiarów. Poziom istotności zostanie uznany za <0,05 w dwóch ogonach.

Wielkość próby dla każdej suplementacji została ustalona na 32, aby wykryć spadek cholesterolu LDL w osoczu równy około 15,44 mg/dl z odchyleniem standardowym 14,28 mg/dl przy użyciu równania Snedecora i Cochrana z α równym 0,05 i 1 -β równy 0,9 (Dell i in., 2002). Zgodnie z tą formułą minimalna liczba przedmiotów do zapisania wynosi 28. Biorąc pod uwagę możliwe rezygnacje, 32 osoby do suplementacji produktem testowym i 32 osoby do suplementacji produktem kontrolnym dla łącznie 64 ochotników w tym badaniu.

Oceny dokonuje się na podstawie obfitości spadku cholesterolu LDL w osoczu, na podstawie pomiarów (średnia i odchylenie standardowe) cholesterolu LDL podanych w równoległym badaniu opublikowanym w European Journal of Nutrition. Parametr cholesterolu LDL, oprócz uznanego wpływu na zdrowie człowieka, jest bardziej restrykcyjny i wymaga dłuższych czasów obserwacji niż zakres modyfikacji mikroflory jelitowej.

Bezpośredni dostęp do danych / dokumentów źródłowych Organy regulacyjne mogą chcieć przeprowadzać kontrole badań klinicznych w celu oceny zgodności z zasadami GCP. Organy regulacyjne mogą również chcieć przeprowadzić kontrolę (w trakcie badania lub po jego zakończeniu). Jeśli kontrola jest wymagana przez organ regulacyjny i/lub Komisję Etyki ds. Badań Klinicznych c/o APSS Trento, badacz musi wyrazić zgodę na udostępnienie organom regulacyjnym dokumentacji związanej z badaniem.

Zarządzanie danymi i zapisy Źródło danych i dokumentacji definiuje się jako pierwsze miejsce, w którym dane są rejestrowane. Wszelkie oryginalne dokumenty i nie powinny być przechowywane i udostępniane w tym samym miejscu. Badacz musi zachować oryginały dokumentów dla każdej osoby biorącej udział w badaniu.

Dane zebrane na CRF podczas badania będą dokumentowane w sposób anonimowy i będą identyfikowane za pomocą liczb lub symboli. Jeżeli w wyjątkowych okolicznościach ze względów bezpieczeństwa lub przepisów konieczna jest identyfikacja osoby, OlioCRU Sp. z oo oraz badacz są zobowiązani do zachowania tych informacji w tajemnicy.

Wszystkie dane wprowadzone do CRF muszą być czytelne i zapisane czarnym atramentem. Jeżeli potrzebujesz korekty, należy to zrobić poprzez skreślenie wpisu jedną linijką i wpisanie poprawnej informacji obok samej pozycji. Korekta musi być parafowana i opatrzona datą przez badacza lub wyznaczoną wykwalifikowaną osobę.