Måling af virkningen af ​​kosttilskud med et nyt bageprodukt på tarmmikrobiota og kolesterolmetabolisme

De første resultater af in vitro-testning af projektet PreBIOil har afgrænset kapaciteten af ​​et olivenmel til at modulere den mikrobielle population af den menneskelige tarm på en måde, der kan sammenlignes med inulin, der er anerkendt som polysaccharid med en kapacitet præbiotisk. Baseret på disse resultater, og til andre i litteraturen, er bageriproduktet PreBIOil blevet formuleret. Produktet indeholder mel af oliven, boghvede, ærter og kastanje.

Det overordnede formål med undersøgelsen er at vurdere, om introduktion i kosten af ​​et bageriprodukt tilberedt med olivenmel, blandet med boghvede-, ærte- og kastanjemel kan ændre profilen af ​​tarmmikrobiotaen og plasmakolesterolet, især LDL. Studiet er sat op som kosttilskud, dobbeltblindt, randomiseret, parallelt med kontrolgruppen, hvor følgende produkt vil blive sammenlignet:

i) et nyt bageriprodukt designet undersøgelse PreBIOil (test); ii) en bageriproduktkontrolisoenergetisk (kontrol).

Beskrivelse af fødevaren suppleret i forsøget. Testproduktet er et nyt bagt produkt formuleret med en blanding af mel fra oliven, boghvede, ærter og kastanje og fremstår som en salt kiks.

Deltagerne skal dagligt indtage omkring 90 gram test- eller kontrolprodukt. De nøjagtige mængder af hvert produktbatch vil blive bestemt efter vurderingen af ​​det færdige produkts ernæringsmæssige egenskaber for at give det samme kalorieindtag med de to produkter.

Fordøjelighed, fermenterbarhed og modulering af mikrobiotaen Boghvede betragtes som en ikke-kornsort, der udover at indeholde fibre, mineraler og vitaminer, såsom B2 og B6, også repræsenterer en kilde til antioxidantforbindelser på grund af indholdet af flavonoider.

Ærtemelet indeholder vigtige komponenter til menneskets kost (stivelse, protein og andre næringsstoffer). De sundhedsmæssige fordele forbundet med indtagelse af ærter stammer primært fra koncentrationen og egenskaberne af stivelse, protein, fibre, vitaminer, mineraler og fytokemikalier. Fiberen indeholdt i integumentet og i cellevæggene i kimbladet bidrager til mave-tarmfunktionen. Stivelsesindholdet i ærtemel er karakteriseret ved lavere glykæmisk indeks. Proteinerne fra ærter kan producere peptider med antioxidantaktivitet. Vitamin- og mineralindholdet i ærter kan spille en vigtig rolle i forebyggelsen af ​​mangelsygdomme, især dem, der vedrører mangel på selen og folat. Ærter indeholder en række fytokemikalier. Disse omfatter polyphenoler, der kan have antioxidanter og anticancer, saponiner, der er til stede hypo colesterolemica og anticanceraktiviteter, og oligosaccharider af galactose, der kan udøve præbiotiske fordele i tyktarmen.

De ernæringsmæssige komponenter i kastanjemel består af kulhydrater, protein og fedt i sammensætningen, så de giver en energiværdi på omkring 350-400 kcal / 100 g. Kastanjer er blevet stemt for at have en positiv effekt på metabolismen af ​​tarmbakterier og er en kilde til langkædede fedtsyrer C18:1 og C18:2 og vitaminer (vitamin E). Den mulige tilstedeværelse af polyphenoler er begrænset til de ydre skaller, generelt adskilt fra frugten under fremstillingen af ​​melet. Melet, der kommer fra olivenpasta, er ikke beskrevet i den videnskabelige litteratur for specifikke ernæringsmæssige egenskaber til den menneskelige kost. Men oliven er en integreret del af middelhavskosten, hvor de indtages som spiseoliven og olivenolie. Olivenfrugten indeholder 50 % vand, 22 % fedt, omkring 19 % kulhydrater og omkring 2 % protein; polyphenolindholdet varierer i området 1-3%. Olivenene indtages eller som olivenolie eller spiseoliven. Oliven er kendetegnet ved stærk bitterhed, forårsaget for det meste dall'oleuropein. Oleuropeinen kan nå 140 mg/g tørvægt i umodne oliven og falder, og efterhånden som frugten modnes, behandles bordoliven for at afbøde den bitre smag gennem processer som maceration sodavand og gæring i saltlage. Men i processen med at søde bitterheden over tabte nogle vigtige forbindelser til stede i oliven såsom polyphenoler og fibre. Der er ingen evidens for, at ekstra jomfruolivenoliepolyfenoler kan reducere risikoen for hjerte-kar-sygdomme, men en stor del af de mulige effekter af olivenkomponenterne alene eller i synergi med polyfenolerne er stadig uudforskede. Desuden fjernes en stor del af den vandopløselige fraktion, der er indeholdt i oliven, mellem hvilke fibre og polyphenoler med dokumenterede gavnlige virkninger på menneskers sundhed, ikke fjernes ved olieproduktion. Der er tegn på, at nogle phenolfraktioner som secoiridoider absorberes dårligt af tarmslimhinden og derefter er tilgængelige for tyktarmens mikroflora. I det væsentlige ville olien i sin helhed have det største potentiale, da en fødevare med fordel kan modulere sammensætningen og aktiviteten af ​​mikroorganismers symbiotiske menneskelige tarm, som observeret eksperimentelt for andre typer frugt.

Ved hjælp af simulering in vitro af colonfermentering er det blevet observeret, at olivenpastaen, selv efter bagning ved 180°C i 30 min, er i stand til at modulere den menneskelige tarmmikrobiota med en præbiotisk virkning eller inducere en signifikant stigning af bifidobakterier. En sådan simulering in vitro blev udført ved inkubation i 24 timer i et batchfermenteringssystem med kontrol af pH og temperatur efter podning med fæces opnået fra fem raske individer. Analysen af ​​det samlede antal polyfenoler (de vigtigste antioxidanter til stede i testproduktet), der er til stede i melet fra oliven, i blandingen af ​​melet og i testproduktet påviste et tab af totale polyfenoler, som et resultat af bagning svarende til 40 %.

Kliniske resultater Kliniske resultater har vist, at dagligt forbrug af 100 g boghvede i form af mel har bestemt stigningen i HDL/kolesterol-forholdet og forbedret glukosetolerance, og for nylig blev det observeret, at forbruget af kiks lavet af boghvede har reduceret serumniveau af en markør for inflammation, myeloperoxidase (MPO) foruden en reduktion af total kolesterol med bedre pulmonal vitalkapacitet. En nylig meta-analyse af adskillige interventionsundersøgelser af den menneskelige kost med tilskud af bælgfrugter, herunder ærter, viste deres evne til at sænke serumniveauet af LDL-kolesterol.

Interventionsundersøgelser af kost med olivenolie, biprodukter fra forarbejdning af oliven og olivenbaserede produkter er blevet udført med raske frivillige og forsøgspersoner med forskellige grader af kardiovaskulær risiko. Af disse undersøgelser er blevet indikeret de daglige doser af totalt introducerede polyfenoler (fra nogle få mg / dag til 30 mg / dag, op til 100 mg / dag) afhængigt af typen af ​​olivenolie og også berigelse med ekstrakter. Disse indgreb havde i mange tilfælde en varighed på omkring en måned, og de fleste af undersøgelserne målte effekten af ​​antioxidant- og antiinflammatoriske ændringer i kredsløbet, sammen med værdierne af plasmalipider og andre parametre relateret til oxidativt stress. Især i undersøgelsen "EUROLIVE", på en stor prøve af raske individer, blev det observeret, at phenolerne i olivenolie var i stand til at beskytte blodlipider mod oxidation, øge koncentrationen af ​​HDL-kolesterol og forholdet mellem reduceret og oxideret glutathion, dog ingen ændringer dell'F2-isoprostan.

I 2011 godkendte Den Europæiske Fødevaresikkerhedsautoritet (EFSA) påstanden om, at olivenoliepolyfenolerne, især hydroxytyrosol, beskytter LDL mod oxidation ved en dosis større end eller lig med 5 mg/kg/dag. Andre undersøgelser har også vist, at olivenoliepolyfenoler er relateret til reduktion af CRP, reduceret aterogen genekspression i blodceller og nedsat blodtryk. Selvom der er beviser for olivenoliepolyfenolers evne til at reducere risikoen for hjerte-kar-sygdomme, er en stor del af de mulige virkninger af olivenbestanddelene alene eller i synergi stadig uudforskede. Desuden ekstraheres en stor del af de fibre og polyfenoler, der er indeholdt i oliven, ikke i processen med olieudvinding og elimineres som et biprodukt.

Begrundelse for undersøgelsen Boghvedemelet tilføjer fibre og flavonoider, ærtemelet indeholder kulhydrater med lavt glykæmisk indeks, protein og er også en kilde til antioxidanter, kastanjemel bringer præbiotiske stoffer og vitaminer. Mel oliven er frugten af ​​oliven er med dens vandopløselige komponenter (f.eks. Fibre og polyphenoler) og i den opløselige fraktion af flerumættede og monoumættede fedtsyrer, tocopheroler og carotenoider, der kun delvist passerer ekstra jomfru oliven. Disse komponenter er for det meste designet som komponenter af ekstra jomfru olivenolie og har videnskabeligt givet bevis for at bidrage til forbedring af lipidmetabolisme og plasmalipidramme, til hjertesundhed og beskytte mod oxidativ stress.

Baseret på tilgængelige kliniske og eksperimentelle undersøgelser er det blevet foreslået, at indtagelse af et bagt produkt fremstillet af en blanding af mel fra olivenpasta, boghvede, ærter og kastanjer kan have positive effekter på lipidplasmabiomarkører og tarmmikrobiota (f.eks. en stigning af bifidobakterier) hos voksne deltagere med plasmaindhold af kolesterol i medium til høje niveauer, selvom de endnu ikke er patologiske.

Erklæring om overensstemmelse Denne undersøgelse vil blive udført i overensstemmelse med protokollen og i overensstemmelse med Good Clinical Practice (GCP), som beskrevet i ICH GCP for 1996, US Code of Federal Regulations (CFR) og Helsinki-erklæringen. Med underskrivelsen af ​​denne protokol accepterer forskeren at overholde disse krav.

Undersøgelsens mål

Det overordnede formål med undersøgelsen er at vurdere, om introduktionen i kosten af ​​et nyt bageriprodukt indeholdende en blanding af mel fra olivenpasta, boghvede, ærter, kastanjer er i stand til at ændre sig:

Primære mål:

1. Profilen af ​​fækal mikrobiota;
2. Plasmaniveauer af total kolesterol, LDL, ratio/total LDL og HDL;
3. Plasmaniveauerne af triglycerider;
4. Apolipoprotein ApoA-I, ApoB og Lp (a).

Sekundære mål:

1. De antropometriske indekser 2 De sekundære metabolitter af polyphenoler i humane biovæsker 3. Profilerne af metabolitter i plasma og urin vurderet ved analyse af massespektrometri (MS); 4. Blodsukker og fastende insulinniveauer; 5. C-reaktivt protein (PRC); 6. Højfølsomt C-reaktivt protein (hsPRC); 7. urinisoprostan F2; 8. oxideret LDL i plasma.

Præsentations eksperimentelt design. Deltageres frivillige vil blive identificeret og rekrutteret i en ambulant del af Casa di Cura Eremo di Arco (TN). Deltagerne vil blive informeret om undersøgelsens formål og metoder og vil blive udvalgt på forhånd ud fra kriterier for inklusion/eksklusion. Deltageren vil underskrive det informerede samtykke og vil gå ind i studiet efter besøget på T-1, udført i ambulant del af Casa di Cura Eremo di Arco (TN), hvor det vil blive udført en klinisk og biokemisk sundhedsstatus. For at muliggøre korrekt overvågning af spisevaner vil den berettigede deltager efter det første besøg udfylde en maddagbog.

Hvis forsøgspersoner vil være berettiget til undersøgelsen baseret på alle kriterierne for inklusion og eksklusion, vil de blive randomiseret til at modtage enten placebo eller den aktive integration ved besøg T0.

Den kliniske undersøgelse og opsamling af blod og urin vil blive udført efter faste i ca. 10 timer i starten af ​​opstartsperioden (besøg T-1). Kliniske tests, blodprøver, opsamling af afføring og urin vil blive udført under besøg T0, T1. Yderligere maddagbog (4 på hinanden følgende dage) vil blive udfyldt ved besøg T0 og forud for T1. Bivirkninger, indtagelse af medicin og kosttilskud vil blive registreret af deltagerne i en særlig dagbog.

Deltagere inkluderet i undersøgelsen vil også blive bedt om at udfylde en sensorisk evaluering af hver fødevare, der tilbydes i blinde, den første smag og ved slutningen af ​​8 ugers tilskud for hvert produkt

Undersøgelsesprocedure Rekruttering af deltagere Deltagerne vil blive identificeret og rekrutteret i en ambulant del af Casa di cura Eremo di Arco (TN) Deltagerne vil blive informeret om undersøgelsens formål og metoder og vil blive udvalgt på forhånd baseret på kriterier for inklusion/eksklusion . Hvis berettiget, vil deltageren underskrive det informerede samtykke og vil gå ind i studiet med et besøg på T-1, som vil blive udført under en klinisk og biokemisk sundhedstilstand. De forsøgspersoner, der vil være berettigede til undersøgelsen baseret på alle kriterierne for inklusion/eksklusion, vil blive inkluderet i undersøgelsen og randomiseret til at modtage det første kosttilskud (test eller kontrol) til at besøge T0 (to uger senere ved indkøringen) ).

Supplering

Efter at egnetheden er vurderet, vil deltagerne blive randomiseret til at modtage integrationen med bageriproduktet med test- eller kontrolproduktet:

De enkelte daglige doser vil blive pakket i pakninger kodet af en kvalificeret gruppe. Tilskud vil vare otte uger, dobbeltblindt, parallelt. med et af de to produkter (tilskrevet randomisering).

Opfølgning Projektet vil bestå af en periode på otte uger med tilskud, kliniske undersøgelser og opsamling af blod og urin vil blive foretaget efter en natfaste (ekskl. vandforbrug) på ca. 10 timer for at besøge T-1. Kliniske tests, blodprøvetagning, opsamling af afføring og urinprøver vil blive udført besøg på T0, T1: T0 er dagen for den første integration, T1 vil være otte uger efter behandlingsstart. Maddagbogen vil blive udarbejdet til besøg T-1 og distribueret før besøg T0 og T1 til dataindsamlingsbesøg T0 og T1.

Klinisk evaluering Elektrokardiogram. Et EKG vil blive udført ved screening (T-1). EKG-optagelserne vil blive gennemgået og fortolket af den ambulante del af plejehjemmet Hermitage of Arco.

Blodtrykket vil blive målt i henhold til retningslinjerne for hypertension ISH / WHO 2004 Antropometriske indekser Vægt og højde vil blive målt på en standardskala. Foranstaltningerne vil blive udført på emner uden sko, frakker eller varmt tøj. Body-masseindeks, BMI, er beregnet som kg/m2.

Taljeomkredsen (umbilical) vil blive målt på en måde, der bestemmes af National Institutes of Health, National Heart, Lung, and Blood Institute. Forholdet mellem omkredsen af ​​talje og hofteforhold (WHR) beregnes.

Spørgeskemaer Alle oplysninger vil blive indsamlet og registreret i validerede spørgeskemaer, herunder personlig identifikation, sygehistorie og oplysninger om risikofaktorer for hjerte-kar-sygdomme, medicinbrug, fysisk aktivitet og spisevaner. Der vil også blive skrevet en fire-dages maddagbog af hver deltager.

Deltagerne, der er inkluderet i undersøgelsen, vil også blive bedt om at udfylde en sensorisk evaluering af hver fødevare, der tilbydes i den første blindsmagning og ved slutningen af ​​8 ugers tilskud.

Prøvetagning af blod og urinprøve Blodet (≤ 30 ml) vil blive udtaget fra en perifer vene efter 10 timers faste. 24 timers urin vil blive opsamlet, volumen målt og prøven vil blive opbevaret ved -80 ° C.

Indsamling af fækalprøver Fækale prøver vil blive behandlet inden for 12 timer efter prøvetagning. Alikvoter af hver fækal prøve vil blive frosset direkte ved -80 ° C til analyse af metabolomisk profil.

Laboratorietests ved laboratorieanalysen af ​​Casa di Cura Eremo di Arco Blodprøver vil blive centrifugeret i overensstemmelse med kravene til testene, der skal udføres umiddelbart efter blodprøvetagning. Plasma eller serum vil blive adskilt, til dels straks testet, og den resterende fraktion opbevares ved -80 ° C.

Totalkolesterol, HDL-kolesterol, triglycerider og glukose vil blive evalueret med enzymatisk metode. LDL-kolesterol vil blive målt analytisk med enzymatisk metode.

Insulinniveauer vil blive vurderet ved elettrochemioluminescenza. Blodtællingen og blodpladetallet vil blive vurderet ved impedentiometrisk metode. Det C-reaktive protein (CRP) vil blive målt ved turbidimetrisk assay. Det højfølsomme C-reaktive protein (hsPCR) vil blive målt ved turbidimetrisk assay.

Apolipoprotein AI (ApoA-I), ApoB og Lp (a) blev bestemt ved immunturbidimetri.

Testen til verifikation af fravær af glucosuri vil blive lavet ved at måle koncentrationen af ​​glucose i urinen.

Laboratorietest af Fondazione Edmund Mach [EMF] Urin- og plasmametabolomisk profil. F2-isoprostanerne vil blive målt i urinen som et mål for oxidativt stress, ved hjælp af specifikt EIA-kit, efter oprensning ved kromatografi i fast fase (kolonner SepPack).

Analysen af ​​LDL oxideret i plasmaet vil blive udført ved hjælp af ELISA kit.

Prøverne af urin og blod (plasma og serum) vil blive underkastet både analyse af målrettet metabolomics (UPLC-MS / MS for ikke-flygtige forbindelser og GC-MS / MS for flygtige forbindelser), der analyserer ikke-målrettet metabolomics (ULPC) -Q -TOF-MS og Nano -FTMS-Q-TOF ikke-flygtige og GC-TOF for de flygtige forbindelser). Til profiler af målrettede plasmametabolitter vil det blive brugt det MS-baserede Biocrates AbsoluteIDQ ® Kit P180, der genererer præcise kvantitative data om 180 humane metabolitter forbundet med risikoen for diabetes. Derudover vil specifik målrettet analyse blive anvendt på lipidprofilen af ​​serumgaldesyrer, kortkædede fedtsyrer (kortkædede fedtsyrer, SCFA'er) og kvantificering af metabolitter af polyphenolerne af mikrobiel oprindelse i biovæsker (inklusive fæces) med UPLC / QQQ-MS / MS.

Analyse af fækal mikrobiota. Ændringer i den fækale mikrobiota af specifikke bakteriepopulationer vil blive evalueret ved hjælp af metoden til in situ hybridisering med fluorescerende prober (FISH).

Ændringer i den fækale mikrobiota vil også blive evalueret ved hjælp af en metagenomisk tilgang ved hjælp af pyrosequencing 454. Kort sagt, efter indsamling af afføringsprøver (n = 128, 2 afføringsprøver på forskellige tidspunkter T0, T1 fra 64 forsøgspersoner før og efter indtagelse af hver fødevaretest og placebo) vil det bakterielle genomiske DNA udtrækkes ved hjælp af sættet SPIN FastDNA (MPbio) ) specifikt for afføring. Ved at bruge primere, der er specifikke for det bakterielle 16S rRNA-gen (hypervariabel region V1-V3) vil det blive udført ved PCR-amplifikation og derefter underkaste den amplificerede V1-V3 ved 454 pyrosequencing.

Vil bruge GS FLX Titanium Chemistry med adaptere Multiplex Identifier (MID) til at få sekvenser med en længde på 600 bp, der vil blive analyseret ved at sammenligne databasen med 16S rRNA fylogenetisk, offentligt tilgængelig, via pipelinen QIIME, der tillader tildeling til slægtsniveauet for mennesker tarmmikrobiota. Det vil blive produceret i alt omkring 20.000 sekvenser for hver afføringsprøve. Som kvalitetskontrol og analyse af mikrobiel økologi vil det blive brugt som en multivariat statistisk for at korrelere ændringerne i sammensætningen af ​​den fækale mikrobiota efter indtagelse af fødevaretest eller placebo.

Randomisering blindet Deltagerne vil blive tildelt tilfældigt, men ligeligt fordelt efter køn og alder til en af ​​to behandlinger: bageriprodukttest eller kontrolprodukt, selv ved brug af specifik software. De kliniske forskere, efterforskere og laboratoriepersonale vil blive blindet over for randomiseringen.

Behandling Tilskuddet vil blive introduceret i den daglige kost gennem indtagelse af et bageriprodukt (test) til et dagligt forbrug på 90 gram produkt indeholdende mel af oliven, fra boghvede, fra ærter, kastanjer. Maden vil give et analogt kontrol kalorieindtag. Produkterne under undersøgelse (test eller kontrol) vil blive leveret i pakker, der vil være mærket på det lokale sprog med undersøgelsens kodenummer. producentens navn, antallet af patienter, antallet af undersøgelsesbesøg. Produkterne vil blive uddelt til deltagerne fra besøget T0.

Undersøgelsens varighed og planlægning Efter berettigelse vil blive vurderet, vil deltagerne blive randomiseret i to grupper (produkttest eller kontrol), der vil følge 8 ugers kosttilskud.

Den samlede varighed af undersøgelsen, inklusive opstartsperioden (indkøring) og behandlingen vil være 10 uger.

Rekrutteringen starter senere og inden for tre måneder efter godkendelse af den etiske komité.

Indkøringen begynder inden for to uger efter det første besøg (T-1). Forsøgspersonerne vil blive rekrutteret over en periode på 10 måneder, og undersøgelsen vil blive afsluttet inden for 12 måneder fra tidspunktet for den første rekruttering.

Kriterier for afbrydelse af undersøgelse I overensstemmelse med Helsinki-erklæringen, ICH-standarder for god klinisk praksis og "Food and Drug Administration (FDA) Regulations" i USA, har en person ret til at trække sig fra undersøgelsen til enhver tid og uanset årsag, uden at det berører fremtidig lægebehandling fra lægen eller institutionen. Efterforskere har også ret til at trække studiefagene tilbage (se nedenfor). I tilfælde af at en person (eller en juridisk autoriseret repræsentant) beslutter sig for at trække sig, vil der blive gjort alt for at udfylde og rapportere observationerne så godt som muligt. Der bør foretages en endelig samlet vurdering på tidspunktet for udmeldelsen af ​​forsøgspersonen, hvor årsagen til tilbagetrækningen skal registreres, og under alle omstændigheder bør der forsøges foretaget en opfølgende evaluering.

Forsøgspersonerne kan fjernes fra undersøgelsen af ​​følgende årsager:

Brud på protokollen fra forsøgslederen Ikke meningsfuld overholdelse af forsøgspersonens forsøgspersons afvisning af at fortsætte behandlingen eller kommentarer Uacceptabel toksicitet Forskerens beslutning om, at lukningen er i forsøgspersonens bedste medicinske interesse Uklare tilfælde af sygdom eller komplikationer. samtidig medicin, der er uforenelig med undersøgelsen. Graviditet Misbrug af alkohol eller stoffer De, der stopper eller trækker sig fra undersøgelsen, vil ikke blive erstattet.

Procedure for opsigelse

Hvis en person stopper før afslutningen af ​​undersøgelsen, vil årsagen og skæringsdatoen blive registreret. Datoen for den sidste dosis mad i undersøgelsen skal noteres. I tilfælde af tidlig opsigelse skal følgende procedurer udføres:

Kliniske tests (systolisk og diastolisk, puls, vægt og højde for at beregne BMI og talje- og hofteomkreds).

Tager blod og afføring og urinopsamling. Et spørgeskema med madfrekvens (ugentlig). I tilfælde af at personen ikke kan vende tilbage til opfølgningsbesøg, vil efterforskerne have famlet efter at kontakte personen telefonisk for at spore eventuelle uønskede hændelser.

Hvis en person trækker samtykket til at modtage mad i studiet, vil du blive opfordret til at forblive i undersøgelsen uden at modtage behandling for indsamling af sikkerhedsdata.

Procedurerne for pålideligheden af ​​det undersøgte produkt Produkterne (test eller kontrol) leveres i pakker, der er mærket på det lokale sprog med undersøgelsens kodenummer, stedets kodenummer, producentens navn, antallet af deltagere, antal besøg af undersøgelsen, antallet af parti, instruktioner for opbevaring og udløbsdatoer. Produkterne vil blive uddelt til deltagerne fra besøget T0.

Koder randomisering Koderne for randomisering efter køn og alder for hver deltager vil blive opbevaret i en forseglet kuvert af en kvalificeret gruppe af sensorisk kvalitet (QS fra Department of Nutrition and Food Quality of the Research and Innovation Centre of the Edmund Mach Foundation).

Datakildekontrol Alle data indsamlet under undersøgelsen vil blive indhentet fra primære kilder og vil blive registreret i skriftlige dokumenter og elektroniske lægejournaler som emne. Resultaterne af kliniske resultater, laboratorieresultater og EKG vil blive registreret i forsøgspersonens elektroniske journalfil. Ingen data vil blive indsat direkte i "sagsbetænkningsformularen" (CRF), uden at blive overført fra den primære kilde, såsom papirjournaler eller elektronisk.

Samtidig lægemiddelterapi Enhver medicin, der tages fra forsøgspersonen inden for en måned før starten af ​​undersøgelsen og/eller administreres under undersøgelsen, vil blive betragtet som samtidig behandling. En sådan behandling skal dokumenteres på den relevante side af CRF og forsøgspersonernes lægejournaler. Eventuelle ændringer i den samtidige behandling under undersøgelsen skal tydeligt registreres, og årsagen til ændringen skal dokumenteres.

Et brev vil blive sendt til lægen for hver deltager, der specificerer, hvilke behandlinger der er samtidig uforenelige med undersøgelsen. Brugen af ​​følgende lægemidler vil ikke være tilladt under undersøgelsen: blodfortyndende midler, antihypertensiva, lipidsænkende lægemidler, betablokkere, systemiske kortikosteroider, neuroleptika, antibiotika, afføringsmidler, vitamintilskud, antioxidanter og mineraler, kostfibre, præbiotika (f.eks. inulin, oligofructose) og probiotika. Derfor, hvis forsøgspersonen kræver lægemiddelbehandlinger, der er uforenelige med undersøgelsen, bliver forsøgspersonen underrettet af den behandlende læge om at afslutte undersøgelsen og informere lederen af ​​undersøgelsen og følge procedurerne for den tidlige afslutning.

Compliance Rating For at vurdere compliance til kosttilskud vil de blive målt phenoler i urinen hos forsøgspersoner, der vil blive suppleret med fødevaretests ved T0, T1. Derudover vil al den ubrugte eller tomme emballage i slutningen af ​​hver uge blive returneret til forsøgslederne.

Metoder Sikkerhed Der var ingen sikkerhedsproblemer under tidligere undersøgelser relateret til forbrug af produkter fremstillet af oliven, boghvede, ærtemel, kastanjemel.

Undersøgelsen vil blive overvåget af medicinsk og paramedicinsk personale på Casa di Cura Eremo i Arco. Bivirkninger vil stadig blive registreret under hele undersøgelsen. Unormale laboratorieværdier, der inducerer kliniske tegn eller symptomer eller kræver terapeutisk intervention, vil straks blive underrettet til forsøgspersonen, hvis forsøgspersonen eksplicit har udtrykt ønske om at modtage sådan kommunikation i form af informeret samtykke. Forsøgspersonen vil frit kunne trække sig fra undersøgelsen på forhånd, hvis behov for terapeutisk intervention ikke er foreneligt med undersøgelsen, eller hvis du oplever uønskede hændelser, der forårsager en ændring i kriterierne for inddragelse af dette emne i undersøgelsen. Forsøgspersonen vil stadig være fri til at trække sig fra undersøgelsen til enhver tid, i tilfælde af at undersøgelsen skyldes ubehag efter proceduren for tidlig afslutning.

Statistisk analyse De grundlæggende træk er opstillet efter suppleringstype: kontinuerte variabler er udtrykt som middel +/- standardafvigelse eller medianer med interkvartile intervaller og som en procentdel for kategoriske variable. Data med en asymmetrisk fordeling vil følge en logbehandling før analyse. Forskellene mellem de to kosttilskud vil blive evalueret med univariate og multivariate statistiske metoder. Mediet før og efter interventionen vil blive sammenlignet med den generelle lineære model (ANOVA) for gentagne målinger eller for parrede data. Du vil udføre simple og multiple lineære regressioner for at bestemme sammenhængen mellem uafhængige variable; Vi vil også køre testen for at evaluere forskelle i overensstemmelse, der er opdaget i typerne af tilskud. Resultaterne er udtrykt som middel +/- SEM, og forskellene vil blive betragtet som signifikante, når P <0,05. Data med en asymmetrisk fordeling vil følge en logbehandling før analyse.

Hovedanalysen vil være baseret på en sammenligning af forskellene i middelniveauer efter indtagelse af testprodukt og efter indtagelse af kontrol. Forskellene mellem middelværdierne ved afslutningen af ​​hvert tilskud (T1) i forhold til den relative middelværdi (T0) vil også blive målt.

Forskellene i tid mellem behandlingsarme vil blive evalueret ved variansanalyse for gentagne målinger. Signifikansniveauet vil blive betragtet som <0,05 i to haler.

Prøvestørrelsen for hvert tilskud er blevet bestemt til 32 for at påvise et fald i LDL-kolesterol i plasma svarende til ca. 15,44 mg/dl med en standardafvigelse på 14,28 mg/dl ved at bruge ligningen Snedecor og Cochran med α lig med 0,05 og 1 -β lig med 0,9 (Dell et al., 2002). Ifølge denne formel er det mindste antal fag, der skal tilmeldes, lig med 28. Under hensyntagen til eventuelt frafald, 32 personer til supplering med testproduktet og 32 personer til supplering med kontrolprodukt for i alt 64 frivillige forsøgspersoner i denne undersøgelse.

Vurderingen er foretaget på baggrund af forekomsten af ​​faldet af LDL-kolesterol i plasma, på baggrund af målene (middelværdi og standardafvigelse) af LDL-kolesterol rapporteret i en parallel undersøgelse offentliggjort i European Journal of Nutrition. Parameteren LDL-kolesterol er, ud over at være en anerkendt effekt på menneskers sundhed, mere restriktiv og kræver længere observationstider end omfanget af modifikationen af ​​tarmmikrofloraen.

Direkte adgang til kildedata/dokumenter Tilsynsmyndigheder kan ønske at udføre kontrol af klinisk forskning for at evaluere overholdelse af principperne for GCP. Tilsynsmyndigheder kan også ønske at foretage en inspektion (under forsøget eller efter dets afslutning). Hvis en inspektion kræves af en regulerende myndighed og/eller den etiske komité for kliniske forsøg c/o APSS Trento, skal forskeren acceptere at give adgang, regulerende myndigheder, dokumentationen relateret til undersøgelsen.

Datastyring og registreringer Kilden til data og dokumentation er defineret som det første sted, hvor dataene registreres. Eventuelle originale dokumenter og bør ikke opbevares og gøres tilgængelige på samme sted. Forskeren skal opbevare de originale dokumenter for hver person, der deltager i undersøgelsen.

De data, der indsamles på CRF under forsøget, vil blive dokumenteret på en anonym måde, og de vil blive identificeret med tal eller symboler. Hvis det under ekstraordinære omstændigheder er nødvendigt af sikkerhedsmæssige eller reguleringsmæssige årsager at identificere personen, er OlioCRU Ltd og forskeren forpligtet til at holde sådanne oplysninger fortrolige.

Alle data, der indtastes i CRF, skal være læselige og registreret med sort blæk. Skulle du have brug for en rettelse, skal det ske ved at slette indtastningen med en enkelt linje og indtaste de korrekte oplysninger ud for selve varen. Rettelsen skal paraferes og dateres af efterforskeren eller en udpeget kvalificeret person.