Messung der Auswirkungen einer Nahrungsergänzung mit einem neuen Backprodukt auf die Darmmikrobiota und den Cholesterinstoffwechsel

Die ersten Ergebnisse der In-vitro-Tests des Projekts PreBIOil haben die Fähigkeit eines Olivenmehls beschrieben, die mikrobielle Population des menschlichen Darms auf eine Weise zu modulieren, die mit der von Inulin vergleichbar ist, das als Polysaccharid mit präbiotischer Wirkung gilt. Basierend auf diesen Ergebnissen und anderen Ergebnissen in der Literatur wurde das Backprodukt PreBIOil formuliert. Das Produkt enthält Mehl aus Oliven, Buchweizen, Erbsen und Kastanien.

Das übergeordnete Ziel der Studie besteht darin, zu beurteilen, ob die Einführung eines Backprodukts aus Olivenmehl, gemischt mit Buchweizen-, Erbsen- und Kastanienmehl, in die Ernährung das Profil der Darmmikrobiota und des Plasmacholesterins, insbesondere LDL, verändern kann. Die Studie ist als Nahrungsergänzung angelegt, doppelblind, randomisiert, parallel zur Kontrollgruppe, in der das folgende Produkt verglichen wird:

i) eine für ein neues Backprodukt konzipierte Studie PreBIOil (Test); ii) eine isoenergetische Backproduktkontrolle (Kontrolle).

Beschreibung des im Versuch ergänzten Lebensmittels Das Testprodukt ist ein neues Backprodukt, das aus einer Mischung aus Mehl aus Oliven, Buchweizen, Erbsen und Kastanien besteht und das Aussehen eines salzigen Kekses hat.

Die Teilnehmer müssen täglich etwa 90 Gramm Test- oder Kontrollprodukt konsumieren. Die genauen Mengen jeder Produktcharge werden nach der Bewertung der Nährwerteigenschaften des Endprodukts bestimmt, um bei beiden Produkten die gleiche Kalorienaufnahme zu gewährleisten.

Verdaulichkeit, Fermentierbarkeit und Modulation der Mikrobiota Buchweizen gilt als Nichtgetreide, das nicht nur Ballaststoffe, Mineralien und Vitamine wie B2 und B6 enthält, sondern aufgrund des Gehalts an Flavonoiden auch eine Quelle antioxidativer Verbindungen darstellt.

Das Erbsenmehl enthält wichtige Bestandteile für die menschliche Ernährung (Stärke, Eiweiß und andere Nährstoffe). Die mit dem Verzehr von Erbsen verbundenen gesundheitlichen Vorteile ergeben sich hauptsächlich aus der Konzentration und den Eigenschaften von Stärke, Protein, Ballaststoffen, Vitaminen, Mineralien und sekundären Pflanzenstoffen. Die in der Haut und in den Zellwänden des Keimblatts enthaltenen Ballaststoffe tragen zur Magen-Darm-Funktion bei. Der Stärkegehalt im Erbsenmehl zeichnet sich durch einen niedrigeren glykämischen Index aus. Die Proteine ​​der Erbse können Peptide mit antioxidativer Wirkung produzieren. Der Vitamin- und Mineralstoffgehalt von Erbsen kann eine wichtige Rolle bei der Vorbeugung von Mangelerkrankungen spielen, insbesondere solchen, die mit einem Mangel an Selen und Folat zusammenhängen. Erbsen enthalten eine Vielzahl sekundärer Pflanzenstoffe. Dazu gehören Polyphenole, die antioxidative und krebshemmende Wirkung haben können, Saponine, die hypocholesterinämische und krebshemmende Wirkung haben, und Oligosaccharide von Galaktose, die im Dickdarm präbiotische Vorteile haben können.

Die Nährstoffbestandteile des Kastanienmehls bestehen aus Kohlenhydraten, Eiweiß und Fett in der Zusammensetzung, sodass ein Energiewert von etwa 350–400 kcal/100 g entsteht. Kastanien werden eine positive Wirkung auf den Stoffwechsel der Darmbakterien zugeschrieben und sie sind eine Quelle für die langkettigen Fettsäuren C18:1 und C18:2 sowie Vitamine (Vitamin E). Das mögliche Vorhandensein von Polyphenolen ist auf die Außenschalen beschränkt, die im Allgemeinen bei der Herstellung des Mehls von der Frucht abgetrennt werden. Das aus Olivenpaste gewonnene Mehl wird in der wissenschaftlichen Literatur nicht hinsichtlich spezifischer Nährwerteigenschaften für die menschliche Ernährung beschrieben. Allerdings sind Oliven ein wesentlicher Bestandteil der mediterranen Ernährung, in der sie als Tafeloliven und Olivenöl verzehrt werden. Die Olivenfrucht enthält 50 % Wasser, 22 % Fett, etwa 19 % Kohlenhydrate und etwa 2 % Eiweiß; Der Polyphenolgehalt variiert im Bereich von 1–3 %. Die Oliven werden entweder als Olivenöl oder Tafeloliven verzehrt. Die Oliven zeichnen sich durch eine starke Bitterkeit aus, die hauptsächlich durch Oleuropain verursacht wird. Der Oleuropeingehalt kann in unreifen Oliven 140 mg/g Trockengewicht erreichen und nimmt ab. Mit zunehmender Fruchtreife werden Tafeloliven behandelt, um den bitteren Geschmack durch Prozesse wie Mazeration von Soda und Gärung in Salzlake zu mildern. Allerdings gehen beim Süßen der Bitterkeit einige wichtige in Oliven enthaltene Verbindungen wie Polyphenole und Ballaststoffe verloren. Es gibt keine Belege für die Fähigkeit der Polyphenole von nativem Olivenöl extra, das Risiko von Herz-Kreislauf-Erkrankungen zu reduzieren, aber ein großer Teil der möglichen Wirkungen der Bestandteile der Olive allein oder in Synergie mit den Polyphenolen ist noch unerforscht. Darüber hinaus wird ein großer Teil der in den Oliven enthaltenen wasserlöslichen Fraktion, darunter Ballaststoffe und Polyphenole mit nachweislich positiver Wirkung auf die menschliche Gesundheit, bei der Ölproduktion nicht entfernt. Es gibt Hinweise darauf, dass einige phenolische Fraktionen wie Secoiridoide schlecht von der Darmschleimhaut absorbiert werden und dann für die Mikroflora des Dickdarms verfügbar sind. Im Wesentlichen hätte das Öl in seiner Gesamtheit das größte Potenzial, da ein Lebensmittel die Zusammensetzung und Aktivität symbiotischer Mikroorganismen im menschlichen Darm positiv beeinflussen kann, wie experimentell bei anderen Obstarten beobachtet wurde.

Durch In-vitro-Simulation der Kolonfermentation wurde beobachtet, dass die Olivenpaste auch nach 30-minütigem Backen bei 180 °C in der Lage ist, die menschliche Darmmikrobiota mit einer präbiotischen Wirkung zu modulieren oder einen signifikanten Anstieg von Bifidobakterien zu induzieren. Eine solche In-vitro-Simulation wurde durch 24-stündige Inkubation in einem Batch-Fermentationssystem mit Kontrolle von pH-Wert und Temperatur nach Inokulation mit Fäkalien von fünf gesunden Personen durchgeführt. Die Analyse der Gesamtpolyphenole (die wichtigsten im Testprodukt enthaltenen Antioxidantien), die im Olivenmehl, in der Mehlmischung und im Testprodukt vorhanden sind, ergab einen Verlust an Gesamtpolyphenolen infolge des Backens von 40 %.

Klinische Ergebnisse Klinische Ergebnisse haben gezeigt, dass der tägliche Verzehr von 100 g Buchweizen in Form von Mehl zu einem Anstieg des HDL/Cholesterin-Verhältnisses und einer verbesserten Glukosetoleranz geführt hat Serumspiegel eines Entzündungsmarkers, Myeloperoxidase (MPO), zusätzlich zu einer Senkung des Gesamtcholesterins und einer besseren Lungenvitalität. Eine aktuelle Metaanalyse mehrerer Interventionsstudien zur menschlichen Ernährung mit der Ergänzung von Hülsenfrüchten, einschließlich Erbsen, zeigte, dass diese die Fähigkeit haben, den LDL-Cholesterinspiegel im Serum zu senken.

Interventionsstudien zur Ernährung mit Olivenölen, Nebenprodukten der Olivenverarbeitung und Produkten auf Olivenbasis wurden mit gesunden Freiwilligen und Probanden mit unterschiedlichem kardiovaskulärem Risiko durchgeführt. In diesen Studien wurden die täglichen Dosen der eingeführten Gesamtpolyphenole (von einigen mg/Tag bis 30 mg/Tag, bis zu 100 mg/Tag) je nach Art des Olivenöls und auch die Anreicherung mit Extrakten angegeben. Diese Eingriffe dauerten in vielen Fällen etwa einen Monat, und in den meisten Studien wurden die Auswirkungen antioxidativer und entzündungshemmender Veränderungen im Kreislaufsystem sowie die Werte der Plasmalipide und anderer Parameter im Zusammenhang mit oxidativem Stress gemessen. Insbesondere in der Studie „EUROLIVE“ an einer großen Stichprobe gesunder Personen wurde beobachtet, dass die Phenole des Olivenöls in der Lage waren, Blutfette vor Oxidation zu schützen, die Konzentration von HDL-Cholesterin zu erhöhen und das Verhältnis zwischen reduziertem und oxidiertem Glutathion zu verbessern. jedoch keine Veränderungen dell'F2-Isoprostan.

Im Jahr 2011 hat die Europäische Behörde für Lebensmittelsicherheit (EFSA) die Behauptung genehmigt, dass die Olivenöl-Polyphenole, insbesondere Hydroxytyrosol, LDL in einer Dosis von mindestens 5 mg/kg/Tag vor Oxidation schützen. Andere Studien haben auch gezeigt, dass Olivenöl-Polyphenole mit der Reduzierung von CRP, einer verringerten atherogenen Genexpression in Blutzellen und einem verringerten Blutdruck zusammenhängen. Obwohl es Belege für die Fähigkeit von Olivenöl-Polyphenolen gibt, das Risiko von Herz-Kreislauf-Erkrankungen zu reduzieren, ist ein großer Teil der möglichen Wirkungen der Bestandteile der Olive allein oder in Synergie noch unerforscht. Darüber hinaus wird ein großer Teil der in der Olive enthaltenen Ballaststoffe und Polyphenole bei der Ölgewinnung nicht extrahiert und als Nebenprodukt eliminiert.

Begründung der Studie Buchweizenmehl fügt Ballaststoffe und Flavonoide hinzu, Erbsenmehl enthält Kohlenhydrate mit niedrigem glykämischen Index, Eiweiß und ist auch eine Quelle von Antioxidantien, Kastanienmehl liefert präbiotische Substanzen und Vitamine. Als Olivenmehl bezeichnet man die Frucht der Olive mit ihren wasserlöslichen Bestandteilen (z.B. Ballaststoffe und Polyphenole) und in der löslichen Fraktion mehrfach ungesättigter und einfach ungesättigter Fettsäuren, Tocopherole und Carotinoide, die nur teilweise in natives Olivenöl extra übergehen. Diese Bestandteile sind hauptsächlich als Bestandteile von nativem Olivenöl extra konzipiert und haben wissenschaftliche Beweise dafür erbracht, dass sie zur Verbesserung des Lipidstoffwechsels und des Plasmalipidgerüsts, zur Herzgesundheit und zum Schutz vor oxidativem Stress beitragen.

Basierend auf verfügbaren klinischen und experimentellen Studien wurde vermutet, dass der Verzehr eines Backprodukts, das aus einer Mischung aus Mehl aus Olivenpaste, Buchweizen, Erbsen und Kastanien hergestellt wird, positive Auswirkungen auf Lipidplasma-Biomarker und Darmmikrobiota haben kann (z. B. eine Erhöhung). von Bifidobakterien) bei erwachsenen Teilnehmern mit einem mittleren bis hohen Cholesterinspiegel im Plasma, auch wenn dieser noch nicht pathologisch ist.

Konformitätserklärung Diese Studie wird in Übereinstimmung mit dem Protokoll und in Übereinstimmung mit der Guten Klinischen Praxis (GCP) durchgeführt, wie in ICH GCP für 1996, dem US Code of Federal Regulations (CFR) und der Deklaration von Helsinki beschrieben. Mit der Unterzeichnung dieses Protokolls erklärt sich der Forscher mit der Einhaltung dieser Anforderungen einverstanden.

Ziele der Studie

Das übergeordnete Ziel der Studie besteht darin, zu beurteilen, ob die Einführung eines neuen Backprodukts, das eine Mischung aus Mehl aus Olivenpaste, Buchweizen, Erbsen und Kastanien enthält, in die Ernährung Folgendes verändern kann:

Hauptziele:

1. Das Profil der fäkalen Mikrobiota;
2. Plasmaspiegel von Gesamtcholesterin, LDL, Verhältnis/Gesamt-LDL und HDL;
3. Die Plasmaspiegel von Triglyceriden;
4. Apolipoprotein ApoA-I, ApoB und Lp (a).

Sekundäre Ziele:

1. Die anthropometrischen Indizes 2 Die sekundären Metaboliten von Polyphenolen in menschlichen Bioflüssigkeiten 3. Die Profile der Metaboliten in Plasma und Urin, bewertet durch Analyse der Massenspektrometrie (MS); 4. Der Blutzucker- und Nüchterninsulinspiegel; 5. C-reaktives Protein (PRC); 6. Hochempfindliches C-reaktives Protein (hsPRC); 7. Isoprostan F2 im Urin; 8. oxidiertes LDL im Plasma.

Präsentation experimentelles Design Freiwillige Freiwillige der Teilnehmer werden identifiziert und in einem ambulanten Teil der Casa di Cura Eremo di Arco (TN) rekrutiert. Die Teilnehmer werden über die Ziele und Methoden der Studie informiert und anhand von Einschluss-/Ausschlusskriterien vorab ausgewählt. Der Teilnehmer unterschreibt die Einverständniserklärung und betritt das Studio nach dem Besuch bei T-1, der im ambulanten Teil der Casa di Cura Eremo di Arco (TN) durchgeführt wird, wo ein klinischer und biochemischer Gesundheitszustand durchgeführt wird. Um eine ordnungsgemäße Überwachung der Essgewohnheiten zu ermöglichen, führt der berechtigte Teilnehmer nach dem ersten Besuch ein Ernährungstagebuch.

Wenn die Probanden aufgrund aller Einschluss- und Ausschlusskriterien für die Studie in Frage kommen, werden sie randomisiert und erhalten bei Besuch T0 entweder ein Placebo oder die aktive Integration.

Die klinische Untersuchung sowie die Entnahme von Blut und Urin erfolgt nach ca. 10-stündigem Fasten zu Beginn der Einleitungsphase (Besuch T-1). Klinische Tests, Blutproben, Sammlung von Kot und Urin werden während der Besuche T0, T1 durchgeführt. Ein zusätzliches Ernährungstagebuch (4 aufeinanderfolgende Tage) wird bei den Besuchen T0 und vor T1 ausgefüllt. Unerwünschte Ereignisse sowie die Einnahme von Medikamenten und Nahrungsergänzungsmitteln werden von den Teilnehmern in einem speziellen Tagebuch festgehalten.

Die in die Studie einbezogenen Teilnehmer werden außerdem gebeten, eine sensorische Bewertung jedes angebotenen Lebensmittels auszufüllen, und zwar blind, beim ersten Geschmack und am Ende der 8-wöchigen Nahrungsergänzung für jedes Produkt

Studienablauf Rekrutierung von Teilnehmern Die Teilnehmer werden in einem ambulanten Teil der Casa di cura Eremo di Arco (TN) identifiziert und rekrutiert. Die Teilnehmer werden über die Zwecke und Methoden der Studie informiert und anhand von Einschluss-/Ausschlusskriterien vorab ausgewählt . Wenn der Teilnehmer berechtigt ist, unterschreibt er die Einverständniserklärung und betritt das Studio mit einem Besuch bei T-1, der während eines klinischen und biochemischen Gesundheitszustands durchgeführt wird. Die Probanden, die auf der Grundlage aller Einschluss-/Ausschlusskriterien für die Studie in Frage kommen, werden in die Studie aufgenommen und randomisiert, um die erste Nahrungsergänzung (Test oder Kontrolle) zu erhalten, um T0 zu erreichen (zwei Wochen später beim Einlauf). ).

Ergänzung

Nachdem die Eignung beurteilt wurde, werden die Teilnehmer randomisiert und erhalten die Integration des Backprodukts mit dem Test- oder Kontrollprodukt:

Die einzelnen Tagesdosen werden in Packungen verpackt, die von einer qualifizierten Gruppe kodiert werden. Die Supplementierung dauert acht Wochen, doppelblind, parallel. mit einem der beiden Produkte (zurückgeführt auf die Randomisierung).

Follow-up Das Projekt umfasst einen Zeitraum von acht Wochen mit Nahrungsergänzung, klinischen Untersuchungen und der Entnahme von Blut und Urin erfolgt nach einer Fastennacht über Nacht (ohne Wasserverbrauch) von etwa 10 Stunden, um T-1 zu besuchen. Klinische Tests, Blutentnahme, Kotsammlung und Urintests werden bei T0, T1 durchgeführt: T0 ist der Tag der ersten Integration, T1 wird acht Wochen nach Behandlungsbeginn sein. Das Ernährungstagebuch wird für den Besuch T-1 erstellt und vor den Besuchen T0 und T1 für die Datenerfassungsbesuche T0 und T1 verteilt.

Klinische Bewertung Elektrokardiogramm. Beim Screening (T-1) wird ein EKG durchgeführt. Die EKG-Aufzeichnungen werden vom ambulanten Teil des Pflegeheims Hermitage of Arco überprüft und interpretiert.

Der Blutdruck wird gemäß den Richtlinien für Bluthochdruck ISH / WHO 2004 gemessen. Anthropometrische Indizes. Gewicht und Größe werden auf einer Standardskala gemessen. Die Maßnahmen werden an Probanden ohne Schuhe, Mäntel oder warme Kleidung durchgeführt. Der Body-Mass-Index (BMI) wird in kg/m2 berechnet.

Der Taillenumfang (Nabelschnur) wird auf eine von den National Institutes of Health, dem National Heart, Lung, and Blood Institute festgelegte Weise gemessen. Das Verhältnis des Taillenumfangs zum Hüftverhältnis (WHR) wird berechnet.

Fragebögen Alle Informationen werden gesammelt und in validierten Fragebögen aufgezeichnet, einschließlich persönlicher Identifikation, Krankengeschichte und Informationen zu den Risikofaktoren für Herz-Kreislauf-Erkrankungen, Medikamenteneinnahme, körperliche Aktivität und Essgewohnheiten. Außerdem wird jeder Teilnehmer ein viertägiges Ernährungstagebuch führen.

Die in die Studie einbezogenen Teilnehmer werden außerdem gebeten, eine sensorische Bewertung jedes angebotenen Lebensmittels bei der ersten Blindverkostung und am Ende der 8-wöchigen Nahrungsergänzung auszufüllen.

Blutentnahme und Urinsammlung Das Blut (≤ 30 ml) wird nach 10-stündigem Fasten aus einer peripheren Vene entnommen. 24-Stunden-Urin wird gesammelt, das Volumen gemessen und die Probe bei -80 °C gelagert.

Sammlung von Stuhlproben Stuhlproben werden innerhalb von 12 Stunden nach der Probenentnahme verarbeitet. Aliquots jeder Stuhlprobe werden zur Analyse des Stoffwechselprofils direkt bei -80 °C eingefroren.

Labortests durch die Laboranalyse der Casa di Cura Eremo di Arco. Blutproben werden gemäß den Anforderungen der unmittelbar nach der Blutentnahme durchzuführenden Tests zentrifugiert. Plasma oder Serum werden abgetrennt, teilweise sofort getestet und der Rest bei -80 °C gelagert.

Gesamtcholesterin, HDL-Cholesterin, Triglyceride und Glukose werden mit einer enzymatischen Methode bewertet. LDL-Cholesterin wird analytisch mit der enzymatischen Methode gemessen.

Der Insulinspiegel wird durch Elektrochemiolumineszenz bestimmt. Das Blutbild und die Thrombozytenzahl werden mittels impedentiometrischer Methode bestimmt. Das C-reaktive Protein (CRP) wird durch einen turbidimetrischen Assay gemessen. Das hochempfindliche C-reaktive Protein (hsPCR) wird durch einen turbidimetrischen Assay gemessen.

Apolipoprotein AI (ApoA-I), ApoB und Lp (a) wurden durch Immunturbidimetrie bestimmt.

Der Test zur Überprüfung des Fehlens einer Glukosurie erfolgt durch Messung der Glukosekonzentration im Urin.

Labortests der Fondazione Edmund Mach [EMF] Stoffwechselprofil von Urin und Plasma. Die F2-Isoprostane werden im Urin als Maß für oxidativen Stress mit einem spezifischen EIA-Kit nach Reinigung durch Festphasenchromatographie (Säulen SepPack) gemessen.

Die Analyse des im Plasma oxidierten LDL wird mit Hilfe eines ELISA-Kits durchgeführt.

Die Urin- und Blutproben (Plasma und Serum) werden sowohl einer Analyse der gezielten Metabolomik (UPLC-MS/MS für nichtflüchtige Verbindungen und GC-MS/MS für flüchtige Verbindungen) als auch einer Analyse der nicht gezielten Metabolomik (ULPC) unterzogen -Q-TOF-MS und Nano -FTMS-Q-TOF nichtflüchtig und GC-TOF für die flüchtigen Verbindungen). Für Profile gezielter Plasmametaboliten wird das MS-basierte Biocrates AbsoluteIDQ® Kit P180 verwendet, das präzise quantitative Daten zu 180 menschlichen Metaboliten generiert, die mit dem Diabetesrisiko in Zusammenhang stehen. Darüber hinaus werden spezifische gezielte Analysen auf das Lipidprofil von Serumgallensäuren, kurzkettigen Fettsäuren (Short Chain Fatty Acids, SCFAs) und die Quantifizierung von Metaboliten der Polyphenole mikrobiellen Ursprungs in Bioflüssigkeiten (einschließlich Fäzes) mittels UPLC angewendet. QQQ-MS / MS.

Analyse der fäkalen Mikrobiota. Veränderungen in der fäkalen Mikrobiota bestimmter Bakterienpopulationen werden mithilfe der Methode der In-situ-Hybridisierung mit Fluoreszenzsonden (FISH) bewertet.

Auch Veränderungen in der fäkalen Mikrobiota werden mithilfe eines Metagenomik-Ansatzes unter Verwendung von Pyrosequenzierung 454 bewertet. Kurz gesagt, nach der Sammlung von Stuhlproben (n = 128, 2 Stuhlproben zu unterschiedlichen Zeitpunkten T0, T1 von 64 Probanden vor und nach dem Verzehr jedes Lebensmitteltests und Placebos) wird die bakterielle genomische DNA mit dem Kit SPIN FastDNA (MPbio) extrahiert ) spezifisch für Kot. Unter Verwendung von Primern, die für das bakterielle 16S-rRNA-Gen (hypervariable Region V1-V3) spezifisch sind, wird eine PCR-Amplifikation durchgeführt und anschließend die amplifizierte V1-V3 bei 454 einer Pyrosequenzierung unterzogen.

Wird den GS FLX Titanium Chemistry mit Adaptern Multiplex Identifier (MID) verwenden, um Sequenzen mit einer Länge von 600 bp zu erhalten, die durch Vergleich mit der öffentlich zugänglichen 16S-rRNA-rRNA-Datenbank über die Pipeline QIIME analysiert werden, die eine Zuordnung zur Gattungsebene Mensch ermöglicht Darmmikrobiota. Es werden insgesamt etwa 20.000 Sequenzen für jede Stuhlprobe produziert. Zur Qualitätskontrolle und Analyse der mikrobiellen Ökologie wird eine multivariate Statistik eingesetzt, um die Veränderungen in der Zusammensetzung der fäkalen Mikrobiota nach dem Verzehr von Lebensmitteltests oder Placebo zu korrelieren.

Randomisierung verblindet: Die Teilnehmer werden zufällig, aber gleichmäßig nach Geschlecht und Alter verteilt, einer von zwei Behandlungen zugeteilt: Backprodukttest oder Kontrollprodukt, sogar unter Verwendung spezifischer Software. Die klinischen Forscher, Prüfärzte und das Laborpersonal sind für die Randomisierung blind.

Behandlung Die Ergänzung wird in die tägliche Ernährung durch den Verzehr eines Backprodukts (Test) für einen täglichen Verzehr von 90 Gramm eines Produkts mit Mehl aus Oliven, Buchweizen, Erbsen und Kastanien eingeführt. Die Nahrung sorgt für eine analoge Kontrollkalorienaufnahme. Die untersuchten Produkte (Test oder Kontrolle) werden in Packungen geliefert, die in der Landessprache mit der Codenummer der Studie gekennzeichnet sind. der Name des Herstellers, die Anzahl der Patienten, die Anzahl der Studienbesuche. Die Produkte werden ab dem Besuch T0 an die Teilnehmer verteilt.

Studiendauer und Planung Nachdem die Eignung beurteilt wurde, werden die Teilnehmer nach dem Zufallsprinzip in zwei Gruppen (Produkttest oder Kontrolle) eingeteilt, die 8 Wochen lang mit Nahrungsergänzungsmitteln behandelt werden.

Die Gesamtdauer der Studie einschließlich der Anlaufphase (Run-in) und der Behandlung beträgt 10 Wochen.

Die Rekrutierung beginnt später und innerhalb von drei Monaten nach Genehmigung durch die Ethikkommission.

Der Einlauf beginnt innerhalb von zwei Wochen nach dem ersten Besuch (T-1). Die Probanden werden über einen Zeitraum von 10 Monaten rekrutiert und die Studie wird innerhalb von 12 Monaten ab dem Zeitpunkt der ersten Rekrutierung abgeschlossen.

Kriterien für den Studienabbruch Gemäß der Deklaration von Helsinki, den ICH-Standards für gute klinische Praxis und den „Food and Drug Administration (FDA) Regulations“ der Vereinigten Staaten hat eine Person das Recht, jederzeit von der Studie zurückzutreten aus irgendeinem Grund, unbeschadet der künftigen medizinischen Versorgung durch den Arzt oder die Einrichtung. Prüfer haben auch das Recht, die Studienteilnehmer zurückzuziehen (siehe unten). Für den Fall, dass eine Person (oder ein gesetzlich bevollmächtigter Vertreter) beschließt, in den Ruhestand zu gehen, werden alle Anstrengungen unternommen, um die Beobachtungen so gut wie möglich zu vervollständigen und zu dokumentieren. Zum Zeitpunkt des Rückzugs des Probanden sollte eine abschließende umfassende Beurteilung erfolgen, bei der der Grund für den Rückzug registriert werden muss und in jedem Fall versucht werden sollte, eine Nachuntersuchung durchzuführen.

Die Probanden können aus folgenden Gründen aus der Studie ausgeschlossen werden:

Verstoß gegen das Protokoll seitens des Experimentators. Keine sinnvolle Einhaltung durch den Probanden. Weigerung des Probanden, die Behandlung oder Kommentare fortzusetzen. Inakzeptable Toxizität. Entscheidung des Forschers, dass der Abschluss im besten medizinischen Interesse des Probanden liegt. Unklares Krankheitsereignis oder Komplikationen. Verwendung von Begleitmedikamente, die mit der Studie nicht vereinbar sind. Schwangerschaft Missbrauch von Alkohol oder Drogen Diejenigen, die die Studie abbrechen oder aus der Studie zurückgezogen werden, werden nicht ersetzt.

Verfahren zur Kündigung

Wenn eine Person die Studie vor Abschluss abbricht, werden der Grund und der Stichtag aufgezeichnet. Das Datum der letzten Lebensmitteldosis in der Studie sollte aufgezeichnet werden. Im Falle einer vorzeitigen Kündigung müssen folgende Verfahren durchgeführt werden:

Klinische Tests (systolisch und diastolisch, Herzfrequenz, Gewicht und Größe zur Berechnung des BMI sowie des Taillen- und Hüftumfangs).

Blut- und Kotabnahme sowie Urinsammlung. Ein Fragebogen zur Häufigkeit von Nahrungsmitteln (wöchentlich). Für den Fall, dass die Person nicht zu einem Nachuntersuchungsbesuch zurückkehren kann, werden die Ermittler versucht haben, die Person telefonisch zu kontaktieren, um etwaige unerwünschte Ereignisse zu verfolgen.

Wenn eine Person ihre Einwilligung zum Essen im Studio widerruft, werden Sie aufgefordert, zur Erhebung von Sicherheitsdaten ohne Behandlung in der Studie zu bleiben.

Die Verfahren zur Zuverlässigkeit des untersuchten Produkts. Die Produkte (Test oder Kontrolle) werden in Paketen bereitgestellt, die in der Landessprache mit der Codenummer der Studie, der Nummer des Standortcodes, dem Namen des Herstellers, der Anzahl der Teilnehmer usw. gekennzeichnet sind Anzahl der Besuche der Studie, Anzahl der Chargen, Anweisungen zur Lagerung und Verfallsdaten. Die Produkte werden ab dem Besuch T0 an die Teilnehmer verteilt.

Randomisierung der Codes Die Codes der Randomisierung nach Geschlecht und Alter für jeden Teilnehmer werden in einem versiegelten Umschlag von einer qualifizierten Gruppe für sensorische Qualität (QS der Abteilung für Ernährung und Lebensmittelqualität des Forschungs- und Innovationszentrums der Edmund Mach Foundation) gespeichert.

Datenquellenkontrolle Alle während der Studie gesammelten Daten werden aus Primärquellen bezogen und in schriftlichen Dokumenten und elektronischen Krankenakten als Betreff erfasst. Die Ergebnisse der klinischen Ergebnisse, Laborergebnisse und des EKG werden in der elektronischen Krankenakte des Probanden aufgezeichnet. Es werden keine Daten direkt in das „Case Report Form“ (CRF) eingefügt, ohne dass sie aus der Primärquelle, wie z. B. Papierakten oder elektronisch, übernommen werden.

Begleitende medikamentöse Therapie Alle Medikamente, die dem Probanden innerhalb eines Monats vor Beginn der Studie entnommen und/oder während der Studie verabreicht werden, gelten als begleitende Therapie. Eine solche Behandlung muss auf der entsprechenden Seite des CRF und in den Krankenakten der Probanden dokumentiert werden. Eventuelle Änderungen der Begleittherapie während der Studie müssen klar dokumentiert und der Grund für die Änderung dokumentiert werden.

An den Arzt jedes Teilnehmers wird ein Brief geschickt, in dem angegeben wird, welche Begleitbehandlungen mit der Studie nicht vereinbar sind. Die Einnahme der folgenden Medikamente ist während der Studie nicht gestattet: Blutverdünner, Antihypertensiva, Lipidsenker, Betablocker, systemische Kortikosteroide, Neuroleptika, Antibiotika, Abführmittel, Vitaminpräparate, Antioxidantien und Mineralstoffe, Ballaststoffe, Präbiotika (z Inulin, Oligofruktose) und Probiotika. Wenn der Proband daher medikamentöse Therapien benötigt, die mit der Studie nicht vereinbar sind, wird der Proband vom behandelnden Arzt angewiesen, die Studie abzubrechen und den Leiter der Studie zu informieren und die Verfahren für den vorzeitigen Abbruch zu befolgen.

Compliance-Bewertung Um die Compliance zur Nahrungsergänzung zu beurteilen, werden die Phenole im Urin bei Probanden gemessen, die bei T0, T1 durch Lebensmitteltests ergänzt werden. Darüber hinaus werden alle unbenutzten oder leeren Verpackungen am Ende jeder Woche an die Experimentatoren zurückgegeben.

Methoden Sicherheit In früheren Studien gab es keine Sicherheitsprobleme im Zusammenhang mit dem Verzehr von Produkten aus Oliven, Buchweizen, Erbsenmehl und Kastanienmehl.

Die Studie wird vom medizinischen und paramedizinischen Personal der Casa di Cura Eremo in Arco überwacht. Unerwünschte Ereignisse werden weiterhin während der gesamten Studie aufgezeichnet. Abnormale Laborwerte, die klinische Anzeichen oder Symptome hervorrufen oder eine therapeutische Intervention erfordern, werden dem Probanden unverzüglich mitgeteilt, wenn der Proband ausdrücklich den Wunsch geäußert hat, eine solche Mitteilung in Form einer Einverständniserklärung zu erhalten. Dem Probanden steht es frei, sich im Voraus von der Studie zurückzuziehen, wenn die Notwendigkeit einer therapeutischen Intervention mit der Studie nicht vereinbar ist oder wenn unerwünschte Ereignisse auftreten, die zu einer Änderung der Kriterien für die Aufnahme dieses Probanden in die Studie führen. Dem Probanden steht es weiterhin frei, jederzeit aus der Studie auszusteigen, falls die Studie aufgrund von Unannehmlichkeiten nach dem Verfahren zur vorzeitigen Beendigung erfolgt.

Statistische Analyse Die Grundmerkmale werden nach Art der Ergänzung aufgelistet: Kontinuierliche Variablen werden als Mittelwert +/- Standardabweichung oder Mediane mit Interquartilbereichen und als Prozentsatz für kategoriale Variablen ausgedrückt. Daten mit einer asymmetrischen Verteilung werden vor der Analyse einer Protokollverarbeitung unterzogen. Die Unterschiede zwischen den beiden Ergänzungen werden mit univariaten und multivariaten statistischen Methoden ausgewertet. Das Medium vor und nach dem Eingriff wird für wiederholte Messungen oder für gepaarte Daten mit dem Allgemeinen Linearen Modell (ANOVA) verglichen. Sie führen einfache und multiple lineare Regressionen durch, um die Beziehungen zwischen unabhängigen Variablen zu bestimmen; Außerdem werden wir den Test durchführen, um Unterschiede in der Compliance zu bewerten, die bei den verschiedenen Arten der Nahrungsergänzung festgestellt wurden. Die Ergebnisse werden als Mittelwert +/- SEM ausgedrückt und die Unterschiede werden als signifikant angesehen, wenn P <0,05. Daten mit einer asymmetrischen Verteilung werden vor der Analyse einer Protokollverarbeitung unterzogen.

Die Hauptanalyse basiert auf einem Vergleich der Unterschiede in den Durchschnittswerten nach dem Verzehr des Testprodukts und nach dem Verzehr der Kontrolle. Die Unterschiede zwischen den Mittelwerten am Ende jeder Ergänzung (T1) im Verhältnis zum relativen mittleren Ausgangswert (T0) werden ebenfalls gemessen.

Die Zeitunterschiede zwischen den Behandlungsarmen werden durch Varianzanalyse für wiederholte Messungen bewertet. Das Signifikanzniveau wird in zwei Teilen als <0,05 angesehen.

Die Probengröße für jede Ergänzung wurde auf 32 festgelegt, um eine Abnahme des LDL-Cholesterins im Plasma um etwa 15,44 mg/dl mit einer Standardabweichung von 14,28 mg/dl unter Verwendung der Gleichung von Snedecor und Cochran mit α gleich 0,05 und 1 festzustellen -β gleich 0,9 (Dell et al., 2002). Nach dieser Formel beträgt die Mindestanzahl der einzuschreibenden Fächer 28. Unter Berücksichtigung möglicher Studienabbrecher erhielten 32 Personen eine Nahrungsergänzung mit dem Testprodukt und 32 Personen eine Nahrungsergänzung mit einem Kontrollprodukt, also insgesamt 64 freiwillige Probanden in dieser Studie.

Die Bewertung erfolgt auf der Grundlage der Häufigkeit der Abnahme des LDL-Cholesterins im Plasma und auf der Grundlage der Messwerte (Mittelwert und Standardabweichung) des LDL-Cholesterins, die in einer parallelen Studie veröffentlicht wurden, die im European Journal of Nutrition veröffentlicht wurde. Der Parameter LDL-Cholesterin hat nicht nur eine Wirkung auf die menschliche Gesundheit, sondern ist auch restriktiver und erfordert längere Beobachtungszeiten als das Ausmaß der Veränderung der Darmflora.

Direkter Zugriff auf Quelldaten/-dokumente. Regulierungsbehörden möchten möglicherweise Überprüfungen der klinischen Forschung durchführen, um die Einhaltung der GCP-Grundsätze zu bewerten. Auch Aufsichtsbehörden möchten möglicherweise eine Inspektion durchführen (während des Versuchs oder nach dessen Abschluss). Wenn eine Inspektion durch eine Regulierungsbehörde und/oder die Ethikkommission für klinische Studien c/o APSS Trento erforderlich ist, muss der Forscher zustimmen, den Regulierungsbehörden Zugang zur Dokumentation im Zusammenhang mit der Studie zu gewähren.

Datenverwaltung und Aufzeichnungen Als Quelle der Daten und Dokumentation wird der erste Ort definiert, an dem die Daten aufgezeichnet werden. Eventuelle Originaldokumente sollten nicht am selben Ort aufbewahrt und zur Verfügung gestellt werden. Der Forscher muss die Originaldokumente jeder an der Studie teilnehmenden Person aufbewahren.

Die im CRF während des Versuchs gesammelten Daten werden anonymisiert dokumentiert und durch Zahlen oder Symbole gekennzeichnet. Wenn es in Ausnahmefällen aus Sicherheits- oder Regulierungsgründen erforderlich ist, die Person zu identifizieren, sind OlioCRU Ltd und der Forscher verpflichtet, diese Informationen vertraulich zu behandeln.

Alle im CRF eingegebenen Daten müssen lesbar sein und mit schwarzer Tinte aufgezeichnet werden. Sollten Sie eine Korrektur benötigen, können Sie dies tun, indem Sie den Eintrag in einer einzigen Zeile löschen und die korrekten Informationen neben dem Artikel selbst eingeben. Die Korrektur muss vom Prüfer oder einer von ihm benannten qualifizierten Person paraphiert und datiert werden.