Måling av virkningen av kosttilskudd med et nytt bakeprodukt på tarmmikrobiota og kolesterolmetabolisme

De første resultatene av in vitro-testing av prosjektet PreBIOil har avgrenset kapasiteten til et olivenmel til å modulere den mikrobielle populasjonen i den menneskelige tarmen på en måte som kan sammenlignes med inulin som er anerkjent som polysakkarid med en kapasitet prebiotisk. Basert på disse resultatene, og til andre i litteraturen, har bakeriproduktet PreBIOil blitt formulert. Produktet inneholder mel av oliven, bokhvete, erter og kastanje.

Det overordnede målet med studien er å vurdere om introduksjonen i kostholdet av et bakeriprodukt tilberedt med olivenmel, blandet med bokhvete-, erte- og kastanjemel kan endre profilen til tarmmikrobiotaen og plasmakolesterolet, spesielt LDL. Studien er satt opp som kosttilskudd, dobbeltblind, randomisert, parallelt med kontrollgruppen, hvor følgende produkt skal sammenlignes:

i) et nytt bakeriprodukt designet studie PreBIOil (test); ii) en bakeriproduktkontrollisoenergetisk (kontroll).

Beskrivelse av maten supplert i forsøket. Testproduktet er et nytt bakt produkt formulert med en blanding av mel fra oliven, bokhvete, erter og kastanje og ser ut som en salt kjeks.

Deltakerne må daglig innta ca. 90 gram test- eller kontrollprodukt. Den nøyaktige mengden av hvert produktparti vil bli bestemt etter vurdering av ernæringsegenskapene til det ferdige produktet for å gi samme kaloriinntak med de to produktene.

Fordøyelighet, fermenterbarhet og modulering av mikrobiotaen Bokhvete regnes som en ikke-kornblanding som i tillegg til å inneholde fiber, mineraler og vitaminer, som B2 og B6, også representerer en kilde til antioksidantforbindelser på grunn av innholdet av flavonoider.

Ertemelet inneholder viktige komponenter for menneskelig kosthold (stivelse, protein og andre næringsstoffer). Helsefordelene forbundet med inntak av erter kommer hovedsakelig fra konsentrasjonen og egenskapene til stivelse, protein, fiber, vitaminer, mineraler og fytokjemikalier. Fiberen i integumentet og i celleveggene til cotyledon bidrar til gastrointestinal funksjon. Stivelsesinnholdet i ertemel er preget av lavere glykemisk indeks. Proteinene fra erter kan produsere peptider med antioksidantaktivitet. Vitamin- og mineralinnholdet i erter kan spille en viktig rolle i forebyggingen av mangelsykdommer, spesielt de som er knyttet til mangel på selen og folat. Erter inneholder en rekke fytokjemikalier. Disse inkluderer polyfenoler som kan ha antioksidanter og antikreft, saponiner som er tilstede hypokolesterolemica og antikreftaktiviteter, og oligosakkarider av galaktose som kan ha prebiotiske fordeler i tykktarmen.

Ernæringskomponentene i kastanjemel består av karbohydrater, protein og fett i sammensetningen for å gi en energiverdi på ca. 350-400 kcal / 100 g. Kastanjer har blitt kåret til å ha en positiv effekt på metabolismen av tarmbakterier og er en kilde til langkjedede fettsyrer C18:1 og C18:2 og vitaminer (vitamin E). Den mulige tilstedeværelsen av polyfenoler er begrenset til de ytre skallene, vanligvis skilt fra frukten under produksjonen av melet. Melet som kommer fra olivenpasta er ikke beskrevet i den vitenskapelige litteraturen for spesifikke ernæringsmessige egenskaper for det menneskelige kostholdet. Imidlertid er oliven en integrert del av middelhavsdietten der de konsumeres som bordoliven og olivenolje. Olivenfrukten inneholder 50 % vann, 22 % fett, ca. 19 % karbohydrater og ca. 2 % protein; polyfenolinnholdet varierer i området 1-3%. Olivenene konsumeres eller som olivenolje eller bordoliven. Oliven er preget av sterk bitterhet, forårsaket hovedsakelig dall'oleuropein. Oleuropeinet kan nå 140 mg / g tørrvekt i umodne oliven og reduseres og etter hvert som frukten modnes behandles bordoliven for å dempe den bitre smaken gjennom prosesser som maserasjonsbrus og gjæring i saltlake. Men i prosessen med å søte bitterheten over mistet noen viktige forbindelser som finnes i oliven som polyfenoler og fiber. Det er ingen bevis på evnen til ekstra virgin olivenoljepolyfenoler som reduserer risikoen for hjerte- og karsykdommer, men en stor del av de mulige effektene av komponentene i oliven alene eller i synergi med polyfenolene er fortsatt uutforsket. I tillegg fjernes ikke en stor del av den vannløselige fraksjonen i olivenene, mellom hvilke fibre og polyfenoler med påvist gunstig aktivitet på menneskers helse, i prosessen med oljeproduksjon. Det er bevis på at noen fenolfraksjoner som secoiridoider absorberes dårlig av tarmslimhinnen og er da tilgjengelige for tykktarmsmikrofloraen. I hovedsak vil oljen i sin helhet ha det største potensialet ettersom en mat gunstig kan modulere sammensetningen og aktiviteten til mikroorganismer symbiotiske menneskets tarm, som observert eksperimentelt for andre typer frukt.

Ved hjelp av simulering in vitro av kolonfermentering er det observert at olivenpastaen, selv etter baking ved 180°C i 30 ', er i stand til å modulere den menneskelige tarmmikrobiotaen med en prebiotisk effekt eller indusere en betydelig økning av bifidobakterier. Slik simulering in vitro ble utført ved inkubasjon i 24 timer i et batchfermenteringssystem med kontroll av pH og temperatur, etter inokulering med avføring fra fem friske individer. Analysen av totale polyfenoler (hovedantioksidanter som er tilstede i testproduktet) som er tilstede i melet av oliven, i blandingen av melet og i testproduktet påviste et tap av totale polyfenoler, som et resultat av baking tilsvarende 40 %.

Kliniske resultater Kliniske resultater har vist at daglig inntak av 100 g bokhvete i form av mel har bestemt økningen i HDL/kolesterol-forholdet og forbedret glukosetoleranse, og nylig ble det observert at inntak av kjeks laget av bokhvete har redusert serumnivå av en markør for betennelse, myeloperoksidase (MPO) i tillegg til en reduksjon av totalt kolesterol med bedre lungevitalkapasitet. En fersk metaanalyse av flere intervensjonsstudier på menneskelig kosthold med tilskudd av belgfrukter, inkludert erter, viste deres evne til å redusere serumnivået av LDL-kolesterol.

Intervensjonsstudier på kosthold med olivenolje, biprodukter fra bearbeiding av oliven og olivenbaserte produkter er utført med friske frivillige og forsøkspersoner med ulike grader av kardiovaskulær risiko. Av disse studiene har blitt indikert de daglige dosene av totale polyfenoler introdusert (fra noen få mg / dag til 30 mg / dag, opptil 100 mg / dag) avhengig av typen olivenolje og også berikelse med ekstrakter. Disse intervensjonene hadde i mange tilfeller en varighet på rundt en måned, og de fleste studiene målte effekten av antioksidant- og antiinflammatoriske endringer i sirkulasjonssystemet, sammen med verdiene av plasmalipider og andre parametere knyttet til oksidativt stress. Spesielt i studien "EUROLIVE", på et stort utvalg av friske individer, ble det observert at fenolene i olivenolje var i stand til å beskytte blodlipider mot oksidasjon, øke konsentrasjonen av HDL-kolesterol og forholdet mellom redusert og oksidert glutation, men ingen endringer dell'F2-isoprostane.

I 2011 godkjente European Food Safety Authority (EFSA) påstanden om at olivenoljepolyfenolene, spesielt hydroksytyrosol, beskytter LDL mot oksidasjon, i en dose større enn eller lik 5 mg/kg/dag. Andre studier har også vist at olivenoljepolyfenoler er relatert til reduksjon av CRP, redusert aterogent genuttrykk i blodceller og redusert blodtrykk. Selv om det er bevis på evnen til olivenoljepolyfenoler til å redusere risikoen for hjerte- og karsykdommer, er en stor del av de mulige effektene av komponentene i oliven alene eller i synergi fortsatt uutforsket. Dessuten blir en stor del av fibrene og polyfenolene i oliven ikke ekstrahert i prosessen med oljeutvinning og eliminert som et biprodukt.

Begrunnelse for studien Bokhvetemelet tilfører fiber og flavonoider, ertemelet inneholder karbohydrater med lav glykemisk indeks, protein og er også en kilde til antioksidanter, kastanjemel bringer prebiotiske stoffer og vitaminer. Mel oliven er frukten av oliven er med sine vannløselige komponenter (f.eks. Fibre og polyfenoler) og i den løselige fraksjonen av flerumettede og enumettede fettsyrer, tokoferoler og karotenoider som bare delvis passerer ekstra virgin oliven. Disse komponentene er hovedsakelig utformet som komponenter av ekstra virgin olivenolje og har vitenskapelig gitt bevis for å bidra til forbedring av lipidmetabolismen og plasmalipider, til hjertehelsen og beskytter mot oksidativt stress.

Basert på tilgjengelige kliniske og eksperimentelle studier har det blitt antydet at inntak av et bakt produkt laget av en blanding av mel fra olivenpasta, bokhvete, erter og kastanjer kan ha positive effekter på lipidplasmabiomarkører og tarmmikrobiota (for eksempel en økning av bifidobakterier) hos voksne deltakere med plasmainnhold av kolesterol i middels til høye nivåer, selv om de ennå ikke er patologiske.

Erklæring om samsvar Denne studien vil bli utført i samsvar med protokollen og i samsvar med Good Clinical Practice (GCP), som beskrevet i ICH GCP for 1996, US Code of Federal Regulations (CFR) og Helsinki-erklæringen. Med signeringen av denne protokollen samtykker forskeren i å overholde disse kravene.

Mål for studien

Det overordnede målet med studien er å vurdere om introduksjonen i kostholdet av et nytt bakeriprodukt som inneholder en blanding av mel fra olivenpasta, bokhvete, erter, kastanjer er i stand til å endre:

Primære mål:

1. Profilen til fekal mikrobiota;
2. Plasmanivåer av totalt kolesterol, LDL, ratio / total LDL og HDL;
3. Plasmanivåene av triglyserider;
4. Apolipoprotein ApoA-I, ApoB og Lp (a).

Sekundære mål:

1. De antropometriske indeksene 2 De sekundære metabolittene til polyfenoler i humane biovæsker 3. Profilene til metabolitter i plasma og urin vurdert ved analyse av massespektrometri (MS); 4. Blodsukker og fastende insulinnivåer; 5. C-reaktivt protein (PRC); 6. Høysensitivt C-reaktivt protein (hsPRC); 7. urinisoprostan F2; 8. oksidert LDL i plasma.

Presentasjonseksperimentell design Deltakeres frivillige vil bli identifisert og rekruttert ved en poliklinisk del av Casa di Cura Eremo di Arco (TN). Deltakerne vil bli informert om formål og metoder for studien og vil bli forhåndsvalgt basert på kriterier for inkludering/ekskludering. Deltakeren vil signere det informerte samtykket og vil gå inn i studio etter besøket til T-1, utført på poliklinisk del av Casa di Cura Eremo di Arco (TN) hvor det vil bli utført en klinisk og biokjemisk helsestatus. For å tillate riktig overvåking av spisevaner, vil den kvalifiserte deltakeren, etter det første besøket, fylle ut en matdagbok.

Hvis forsøkspersoner vil være kvalifisert for studien basert på alle kriteriene for inkludering og ekskludering, vil de bli randomisert til å motta enten placebo eller aktiv integrasjon ved besøk T0.

Den kliniske undersøkelsen, og oppsamling av blod og urin vil foregå etter faste i ca. 10 timer ved starten av oppstartsperioden (besøk T-1). Kliniske tester, blodprøver, oppsamling av avføring og urin vil bli utført ved besøk T0, T1. Ytterligere matdagbok (4 påfølgende dager) vil bli fylt ved besøk T0 og i forkant av T1. Bivirkninger, inntak av medisiner og kosttilskudd vil bli registrert av deltakerne i en spesiell dagbok.

Deltakerne som er inkludert i studien vil også bli bedt om å fylle ut en sensorisk evaluering av hver mat som tilbys i blinde, den første smaken og ved slutten av 8 ukers tilskudd for hvert produkt

Studieprosedyre Rekruttering av deltakere Deltakerne vil bli identifisert og rekruttert ved en poliklinisk del av Casa di cura Eremo di Arco (TN) Deltakerne vil bli informert om formål og metoder for studien og vil bli forhåndsvalgt basert på kriterier for inkludering/ekskludering . Hvis kvalifisert, vil deltakeren signere det informerte samtykket og vil gå inn i studioet med et besøk til T-1, som vil bli utført under en klinisk og biokjemisk helsetilstand. Forsøkspersonene som vil være kvalifisert for studien basert på alle kriteriene for inkludering/ekskludering, vil bli inkludert i studien og randomisert til å motta det første kosttilskuddet (test eller kontroll) for å besøke T0 (to uker senere ved innkjøringen) ).

Supplement

Etter at kvalifikasjonen er vurdert, vil deltakerne bli randomisert for å motta integrasjonen med bakeriproduktet med test- eller kontrollproduktet:

De daglige enkeltdosene vil bli pakket i pakninger kodet av en kvalifisert gruppe. Tilskudd vil vare åtte uker, dobbeltblind, parallelt. med ett av de to produktene (tilskrevet randomisering).

Oppfølging Prosjektet vil bestå av en periode på åtte uker med tilskudd, kliniske undersøkelser og innsamling av blod og urin vil bli gjort etter en nattfaste (ekskl. vannforbruk) på ca. 10 timer for å besøke T-1. Kliniske tester, blodprøvetaking, innsamling av avføring og urinprøver vil bli gjennomført besøk til T0, T1: T0 er dagen for første integrering, T1 vil være åtte uker etter behandlingsstart. Matdagboken vil bli satt sammen for besøk T-1 og distribuert før besøk T0 og T1 for datainnsamlingsbesøk T0 og T1.

Klinisk evaluering Elektrokardiogram. Et EKG vil bli utført ved screening (T-1). EKG-sporingene vil bli gjennomgått og tolket av poliklinisk del av sykehjemmet Hermitage of Arco.

Blodtrykket vil bli målt i henhold til retningslinjene for hypertensjon ISH / WHO 2004 Antropometriske indekser Vekt og høyde vil bli målt på en standard skala. Tiltakene vil bli utført på emner uten sko, kåper eller varme klær. Kroppsmasseindeks, BMI, er beregnet som kg/m2.

Midjeomkretsen (umbilical) vil bli målt på en måte som bestemmes av National Institutes of Health, National Heart, Lung, and Blood Institute. Forholdet mellom omkretsen av midje og hofteforhold (WHR) beregnes.

Spørreskjema All informasjon vil bli samlet inn og registrert i validerte spørreskjemaer, inkludert personlig identifikasjon, sykehistorie og informasjon om risikofaktorer for hjerte- og karsykdommer, medisinbruk, fysisk aktivitet og spisevaner. Det vil også bli skrevet en firedagers matdagbok av hver deltaker.

Deltakerne som er inkludert i studien vil også bli bedt om å fylle ut en sensorisk evaluering av hver mat som tilbys i den første blindsmakingen og ved slutten av 8 ukers tilskudd.

Prøvetaking av blod og urinprøve Blodet (≤ 30 ml) vil bli tatt fra en perifer vene, etter 10 timers faste. 24 timers urin vil bli samlet, volumet målt og prøven vil bli lagret ved -80 ° C.

Innsamling av avføringsprøver Avføringsprøver vil bli behandlet innen 12 timer etter prøvetaking. Alikvoter av hver fekal prøve vil bli frosset direkte ved -80 ° C for analyse av metabolomisk profil.

Laboratorietester fra laboratorieanalysen av Casa di Cura Eremo di Arco Blodprøver vil bli sentrifugert i henhold til kravene til testene som skal utføres umiddelbart etter blodprøvetaking. Plasma eller serum vil bli separert, delvis umiddelbart testet og den gjenværende fraksjonen lagret ved -80 ° C.

Totalkolesterol, HDL-kolesterol, triglyserider og glukose vil bli evaluert med enzymatisk metode. LDL-kolesterol vil bli målt analytisk med enzymatisk metode.

Insulinnivåer vil bli vurdert ved elettrochemioluminescenza. Blodtelling og antall blodplater vil bli vurdert med impedentiometrisk metode. Det C-reaktive proteinet (CRP) vil bli målt ved turbidimetrisk analyse. Det høysensitive C-reaktive proteinet (hsPCR) vil bli målt ved turbidimetrisk analyse.

Apolipoprotein AI (ApoA-I), ApoB og Lp (a) ble bestemt ved immunturbidimetri.

Testen for verifisering av fravær av glukosuri vil bli gjort ved å måle konsentrasjonen av glukose i urinen.

Laboratorietester av Fondazione Edmund Mach [EMF] Urin- og plasmametabolomisk profil. F2-isoprostanene vil bli målt i urinen som et mål på oksidativt stress, ved hjelp av spesifikt EIA-sett, etter rensing ved kromatografi fast fase (kolonner SepPack).

Analysen av LDL oksidert i plasma vil bli utført ved hjelp av ELISA-sett.

Prøvene av urin og blod (plasma og serum) vil bli utsatt både for analyse av målrettet metabolomikk (UPLC-MS / MS for ikke-flyktige forbindelser og GC-MS / MS for flyktige forbindelser) som analyserer ikke-målrettet metabolomikk (ULPC) -Q -TOF-MS og Nano -FTMS-Q-TOF ikke-flyktig og GC-TOF for de flyktige forbindelsene). For profiler av målrettede plasmametabolitter vil det bli brukt det MS-baserte Biocrates AbsoluteIDQ ® Kit P180, som genererer nøyaktige kvantitative data om 180 humane metabolitter knyttet til risikoen for diabetes. I tillegg vil spesifikk målrettet analyse bli brukt på lipidprofilen til serum gallesyrer, kortkjedede fettsyrer (kortkjedede fettsyrer, SCFA) og kvantifisering av metabolitter av polyfenolene av mikrobiell opprinnelse i biovæsker (inkludert feces) med UPLC / QQQ-MS / MS.

Analyse av fekal mikrobiota. Endringer i avføringsmikrobiotaen til spesifikke bakteriepopulasjoner vil bli evaluert ved bruk av metoden for in situ hybridisering med fluorescerende prober (FISH).

Også endringer i fekal mikrobiota vil bli evaluert ved hjelp av en metagenomikk-tilnærming ved bruk av pyrosekvensering 454. Kort sagt, etter innsamling av avføringsprøver (n = 128, 2 avføringsprøver til forskjellige tider T0, T1 fra 64 forsøkspersoner før og etter inntak av hver mattest og placebo) vil bakteriell genomisk DNA trekke ut ved å bruke settet SPIN FastDNA (MPbio) ) spesifikt for avføring. Ved å bruke primere spesifikke for det bakterielle 16S rRNA-genet (hypervariabel region V1-V3) vil det bli utført ved PCR-amplifisering og deretter underkaste den amplifiserte V1-V3 ved 454 pyrosekvensering.

Vil bruke GS FLX Titanium Chemistry med adaptere Multiplex Identifier (MID) for å få sekvenser med lengde 600 bp som vil bli analysert ved å sammenligne databasen med 16S rRNA fylogenetisk, offentlig tilgjengelig, via rørledningen QIIME som tillater tilordning til slektsnivået til mennesker tarmmikrobiota. Det vil bli produsert totalt rundt 20 000 sekvenser for hver avføringsprøve. Som kvalitetskontroll og analyse av mikrobiell økologi, vil det bli brukt en multivariat statistikk for å korrelere endringene i sammensetningen av fekal mikrobiota etter inntak av mattesting eller placebo.

Randomisering blindet Deltakerne vil bli tildelt tilfeldig, men likt fordelt etter kjønn og alder til en av to behandlinger: bakeriprodukttest eller kontrollprodukt selv ved bruk av spesifikk programvare. De kliniske forskerne, etterforskerne og laboratoriepersonell vil bli blindet for randomiseringen.

Behandling Tilskuddet vil bli introdusert i det daglige kostholdet gjennom inntak av et bakeriprodukt (test) for et daglig forbruk av 90 gram produkt som inneholder mel av oliven, fra bokhvete, fra erter, kastanjer. Maten vil gi et analogt kontrollkaloriinntak. Produktene som undersøkes (test eller kontroll) vil bli levert i pakninger som er merket på det lokale språket med studiens kodenummer. produsentens navn, antall pasienter, antall studiebesøk. Produktene vil bli delt ut til deltakerne fra besøket T0.

Studievarighet og planlegging Etter at kvalifikasjonen vil bli vurdert, vil deltakerne bli randomisert i to grupper (produkttest eller kontroll) som vil følge 8 uker med kosttilskudd.

Den totale varigheten av studien, inkludert oppstartsperioden (innkjøring) og behandlingen vil være 10 uker.

Rekrutteringen vil starte senere og innen tre måneder etter godkjenning fra Etikkkomiteen.

Innkjøringen vil begynne innen to uker etter første besøk (T-1). Forsøkspersonene vil bli rekruttert over en periode på 10 måneder, og studien vil bli fullført innen 12 måneder fra tidspunktet for første rekruttering.

Kriterier for avslutning av studien I samsvar med Helsinki-erklæringen, ICHs standarder for god klinisk praksis og "Food and Drug Administration (FDA) Regulations" i USA, har en person rett til å trekke seg fra studien når som helst og uansett grunn, uten fordommer for fremtidig medisinsk behandling fra legen eller institusjonen. Utredere har også rett til å trekke studieemnene (se nedenfor). I tilfelle en person (eller en juridisk autorisert representant) bestemmer seg for å trekke seg, vil det bli gjort alt for å fullføre og rapportere observasjonene så godt som mulig. Det bør foretas en endelig helhetlig vurdering ved uttak av faget hvor årsaken til utmeldingen skal registreres og uansett bør det forsøkes foreta en oppfølgingsevaluering.

Forsøkspersonene kan fjernes fra studien av følgende grunner:

Brudd på protokollen fra eksperimentatoren Ikke meningsfull etterlevelse av forsøkspersonen. forsøkspersonens nektelse av å fortsette behandlingen eller kommentarer Uakseptabel toksisitet Forskerens avgjørelse om at stengingen er i pasientens beste medisinske interesse Uklar sykdom eller komplikasjoner. samtidige medisiner som er uforenlige med studien. Graviditet Misbruk av alkohol eller rusmidler De som avbryter eller trekker seg fra studien vil ikke bli erstattet.

Prosedyre for avslutning

Hvis en person stopper før studien er fullført, vil årsaken og avskjæringsdatoen bli registrert. Datoen for siste dose mat i studien bør noteres. Ved tidlig avslutning må følgende prosedyrer utføres:

Kliniske tester (systolisk og diastolisk, hjertefrekvens, vekt og høyde for å beregne BMI og midje- og hofteomkrets).

Tar blod og avføring og urinsamling. Et spørreskjema om matfrekvens (ukentlig). I tilfelle den enkelte ikke kan komme tilbake for oppfølgingsbesøk, vil etterforskerne ha tatt kontakt med personen på telefon for å spore eventuelle uønskede hendelser.

Hvis en person trekker tilbake samtykket til å motta mat i studio, vil du bli oppfordret til å forbli i studien uten å motta behandling for innsamling av sikkerhetsdata.

Prosedyrene for påliteligheten til produktet som studeres Produktene (test eller kontroll) vil bli levert i pakker merket på det lokale språket med studiens kodenummer, nummeret på stedets kode, produsentens navn, antall deltakere, antall besøk av studien, antall partier, instruksjoner for lagring og utløpsdatoer. Produktene vil bli delt ut til deltakerne fra besøket T0.

Koder randomisering Kodene for randomisering etter kjønn og alder, for hver deltaker vil bli lagret i en forseglet konvolutt av kvalifisert gruppe av sensorisk kvalitet (QS av Department of Nutrition and Food Quality of the Research and Innovation Center of the Edmund Mach Foundation).

Datakildekontroll Alle data som samles inn under studien vil bli hentet fra primærkilder, og vil bli registrert i skriftlige dokumenter og elektroniske journaler som emne. Resultatene av kliniske resultater, laboratorieresultater og EKG vil bli registrert i den elektroniske journalfilen til forsøkspersonen. Ingen data vil bli lagt inn direkte i «saksrapportskjemaet» (CRF), uten å bli overført fra primærkilden, for eksempel papirjournal eller elektronisk.

Samtidig medikamentell terapi Enhver medisin tatt fra forsøkspersonen innen en måned før studiestart og/eller administrert under studien vil bli vurdert som samtidig behandling. Slik behandling må dokumenteres på riktig side av CRF og pasientjournalene. Eventuelle endringer i den samtidige behandlingen under studien må noteres tydelig og årsaken til endringen bør dokumenteres.

Et brev vil bli sendt til legen til hver deltaker, som spesifiserer hvilke behandlinger som er samtidig uforenlige med studien. Bruk av følgende legemidler vil ikke være tillatt under studien: blodfortynnende, antihypertensiva, lipidsenkende legemidler, betablokkere, systemiske kortikosteroider, neuroleptika, antibiotika, avføringsmidler, vitamintilskudd, antioksidanter og mineraler, kostfiber, prebiotika (f.eks. inulin, oligofruktose) og probiotika. Derfor, hvis forsøkspersonen krever medikamentell behandling som er uforenlig med studien, blir forsøkspersonen varslet av den behandlende legen om å avslutte studien og informere lederen av studien og følge prosedyrene for tidlig avslutning.

Samsvarsvurdering For å vurdere etterlevelse av tilskudd, vil de bli målt urinfenoler i forsøkspersoner som vil bli supplert med mattester ved T0, T1. I tillegg vil all ubrukt eller tom emballasje på slutten av hver uke bli returnert til forsøkslederne.

Metoder Sikkerhet Det var ingen sikkerhetsproblemer under tidligere studier knyttet til inntak av produkter laget av oliven, bokhvete, ertemel, kastanjemel.

Studien vil bli overvåket av medisinsk og paramedisinsk personale ved Casa di Cura Eremo i Arco. Bivirkninger vil fortsatt bli registrert gjennom hele studien. Unormale laboratorieverdier som induserer kliniske tegn eller symptomer eller krever terapeutisk intervensjon vil umiddelbart bli varslet til forsøkspersonen, dersom forsøkspersonen eksplisitt har uttrykt ønske om å motta slik kommunikasjon i form av informert samtykke. Forsøkspersonen vil stå fritt til å trekke seg fra studien på forhånd dersom behov for terapeutisk intervensjon ikke er forenlig med studien, eller hvis du opplever uønskede hendelser som forårsaker en endring i kriteriene for inkludering av denne personen i studien. Forsøkspersonen vil fortsatt stå fritt til å trekke seg fra studien når som helst, i tilfelle studien skyldes ubehag etter prosedyren for tidlig avslutning.

Statistisk analyse Grunntrekkene er listet opp etter type supplering: kontinuerlige variabler uttrykkes som gjennomsnittlig +/- standardavvik eller medianer med interkvartile områder og i prosent for kategoriske variabler. Data med en asymmetrisk fordeling vil følge en loggbehandling før analyse. Forskjellene mellom de to tilleggene vil bli evaluert med univariate og multivariate statistiske metoder. Mediet før og etter intervensjonen vil bli sammenlignet med den generelle lineære modellen (ANOVA) for gjentatte mål eller for sammenkoblede data. Du vil utføre enkle og multiple lineære regresjoner for å bestemme sammenhengene mellom uavhengige variabler; Vi vil også kjøre testen for å evaluere forskjeller i samsvar som er oppdaget i typene tilskudd. Resultatene er uttrykt som gjennomsnitt +/- SEM og forskjellene vil anses som signifikante når P <0,05. Data med en asymmetrisk fordeling vil følge en loggbehandling før analyse.

Hovedanalysen vil være basert på en sammenligning av forskjellene i gjennomsnittsnivåer etter inntak av testprodukt og etter inntak av kontroll. Forskjellene mellom middelverdiene ved slutten av hvert tilskudd (T1) i forhold til den relative middelverdien (T0) vil også bli målt.

Forskjellene i tid mellom behandlingsarmene vil bli evaluert ved variansanalyse for gjentatte mål. Signifikansnivået vil bli vurdert som <0,05 i to haler.

Prøvestørrelsen for hvert tilskudd er bestemt til 32 for å oppdage en reduksjon av LDL-kolesterol i plasma lik ca. 15,44 mg/dl med et standardavvik på 14,28 mg/dl ved å bruke ligningen Snedecor og Cochran med α lik 0,05 og 1 -β lik 0,9 (Dell et al., 2002). I henhold til denne formelen er minimum antall fag å melde seg på lik 28. Med hensyn til mulig frafall, 32 personer for tilskudd med testproduktet og 32 personer for tilskudd med kontrollprodukt for totalt 64 frivillige forsøkspersoner i denne studien.

Vurderingen er gjort på grunnlag av rikelig reduksjon av LDL-kolesterol i plasma, på grunnlag av målene (gjennomsnitt og standardavvik) av LDL-kolesterol rapportert i en parallell studie publisert i European Journal of Nutrition. Parameteren LDL-kolesterol, i tillegg til å være en anerkjent effekt på menneskers helse, er mer restriktiv og krever observasjonstider lengre enn omfanget av modifikasjonen av tarmmikrofloraen.

Direkte tilgang til kildedata/dokumenter Reguleringsmyndigheter kan ønske å utføre kontroller av klinisk forskning for å evaluere samsvar med prinsippene for GCP. Reguleringsmyndigheter kan også ønske å gjennomføre en inspeksjon (under forsøket eller etter at det er fullført). Hvis en inspeksjon kreves av en regulatorisk myndighet og/eller etisk komité for kliniske studier c/o APSS Trento, må forskeren samtykke i å gi tilgang, regulatoriske myndigheter, dokumentasjonen knyttet til studien.

Databehandling og poster Kilden til dataene og dokumentasjonen er definert som det første stedet hvor dataene blir registrert. Eventuelle originale dokumenter og bør ikke oppbevares og gjøres tilgjengelig på samme sted. Forskeren skal oppbevare originaldokumentene for hver person som deltar i studien.

Dataene som samles inn på CRF under rettssaken vil bli dokumentert på en anonym måte, og de vil bli identifisert med tall eller symboler. Hvis det under eksepsjonelle omstendigheter er nødvendig, av sikkerhetsmessige eller forskriftsmessige grunner, å identifisere personen, er OlioCRU Ltd og forskeren pålagt å holde slik informasjon konfidensiell.

Alle data som legges inn i CRF skal være lesbare og registrert med svart blekk. Skulle du trenge en retting, bør det gjøres ved å slette oppføringen med en enkelt linje og angi riktig informasjon ved siden av selve varen. Rettelsen må paraferes og dateres av etterforskeren, eller en kvalifisert person utpekt.