東部地域におけるカルバペネムに対する感受性の低下を伴う腸内細菌の蔓延 (CARBAFREST)

ペニシリンの導入により、細菌が産生する酵素によるベータラクタム系抗生物質の不活化が実証されました。 最近まで、カルバペネムは、重篤な感染症における最後の手段となる分子であるこれらの酵素の影響を比較的免れたサブクラスでした。 最近、カルバペネムを加水分解する酵素であるカルバペネマーゼの普及が一部の国で増加しています。 しかし、これらのカルバペネマーゼは、カルバペネムに対する感受性の低下に関与する唯一のメカニズムではなく、いくつかの耐性メカニズムの連動に関連している場合もあります。 この新たな耐性菌の流行状況に関するデータは、その検出を改善し、患者の感染を管理し、流行の発生を防ぐために不可欠です。 これに関連して、研究者らは、カルバペネムに対する感受性が低下している腸内細菌科の有病率を推定し、この種の細菌による感染の危険因子を探すために、北東部地域間での研究を提案している。 この研究は、フランス北東部にある 5 つの教育病院 (ブザンソン、ディジョン、ナンシー、ランス、ストラスブール) と 2 つの総合病院 (コルマール、トロワ) で実施されました。 1 年間、フランス微生物学会 (CA-SFM) の 2012 年アンチバイオグラム委員会に従ってカルバペネムに対する感受性が低下したすべての腸内細菌科分離株 (CDSE) (エルタペネムの MIC > 0.5 μg/mL) が収集され、細菌科に送られます。ランス大学病院の研究室。 これらの株の中から 105 株がランダムに選択されます。 臨床研究は以下のように実施される：センターに含まれるCDSE分離株を有する患者ごとに、対照患者2名が選択される。 彼らは、2 つの腸内細菌科分離株を有し、カルバペネムに対する感受性の低下がなく、同じセンターで CDSE 分離株をフォローしている患者です。

微生物学的研究: 分離株の同定は、MALDI-TOF (Bruker Daltonics、ブレーメン、ドイツ) を使用して実行されます。 抗生物質感受性は、欧州抗菌薬感受性試験委員会 (EUCAST) ガイドライン (www.EUCAST.org) に従ってディスク拡散法によって決定されます。 および拡張スペクトルβ-ラクタマーゼ (ESBL) はダブルディスク シナジー テストによって検出され、カルバペネム最小発育阻止濃度 (イミペネム、エルタペネム、ドリペネムおよびメロペネムに対する MIC) は E-test® ストリップを使用して測定されます。 メタロ-β-ラクタマーゼ産生は、MβL Etest (bioMérieux、Marcy l'Etoile、フランス) でスクリーニングされました。 ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) を使用して検出されたベータラクタマーゼ。 カルバペネマーゼをコードする遺伝子 (blaKPC、blaVIM、blaIMP、blaNDM、blaOXA-23 様、blaOXA-24 様、blaOXA-58 様、および blaOXA-48 様) を、マルチプレックス PCR と、シンプレックス PCR を使用した blaIMI および blaGES を使用してスクリーニングしました。 検出されたすべての blaOXA-48 様はその後配列決定されました。 遺伝子 blaTEM、blaSHV、blaCTX-M、および blaOXA は、特異的なプライマーを使用する PCR によって検出されました。 プラスミドを介した AmpC 型遺伝子 blaACC、blaFOX、blaMOX、blaDHA、blaCMY、および blaMIR をマルチプレックス PCR を使用してスクリーニングしました。 すべてのβ-ラクタマーゼは配列決定されています。 キノロン耐性決定領域 (QRDR) の変異は、gyrA、gyrB、parC、および parE 遺伝子の PCR および配列決定によって同定されます。 Qnr および qepA 遺伝子はリアルタイム PCR で検出され、aac(6')-Ib-cr はパイロシーケンスで検出され、oqxAB は従来の PCR で検出されます。 ジェノタイピングは、パルスフィールドゲル電気泳動 (PFGE) および多座位配列タイピング (MLST) を使用して実行されます。

統計分析: 質的変数は Chi2 検定と両側フィッシャー直接確率検定で分析されます。 量的変数はマン・ホイットニー検定を使用して比較されます。 次に、多変量解析が実行されます。単変量解析の p <0.20 を入力しきい値として、出力を 0.20 に設定し、段階的因子を説明変数とするロジスティック回帰です。結果は、P < 0.05 の場合に統計的に有意であると見なされます。

期待される結果 : この研究では、関与するさまざまな種の割合、他のメカニズムと比較したカルバペネマーゼの割合、MIC の耐性レベルが得られます。 過去の抗生物質治療、基礎疾患の重症度、クローン株の伝播などのリスク要因が明らかになり、実施すべき予防管理措置を特定できるようになります。