Prävalenz von Enterobakterien mit verringerter Anfälligkeit für Carbapeneme in der östlichen Interregion (CARBAFREST)

Bei der Einführung von Penicillinen wurde eine Inaktivierung von Beta-Lactam-Antibiotika durch von Bakterien produzierte Enzyme nachgewiesen. Bis vor Kurzem waren Carbapeneme eine von diesen Enzymen relativ verschonte Unterklasse, was sie zum letzten Ausweg bei schweren Infektionen macht. In einigen Ländern ist in jüngster Zeit die Verbreitung von Carbapenem-hydrolysierenden Enzymen, den Carbapenemasen, gestiegen. Diese Carbapenemasen sind jedoch nicht der einzige Mechanismus, der zu einer verminderten Anfälligkeit gegenüber Carbapenemen führt, die manchmal mit dem Zusammenspiel mehrerer Resistenzmechanismen verbunden ist. Die verfügbaren Daten zur epidemischen Situation dieser neuen Resistenz sind für die Verbesserung ihrer Erkennung, die Behandlung von Infektionen bei Patienten und die Verhinderung des Auftretens von Epidemien von entscheidender Bedeutung. In diesem Zusammenhang schlagen die Forscher eine Studie in der nordöstlichen Interregion vor, um die Prävalenz von Enterobacteriaceae mit geringerer Anfälligkeit für Carbapeneme abzuschätzen und nach Risikofaktoren für eine Infektion mit dieser Art von Bakterien zu suchen. Die Studie wird in fünf Lehrkrankenhäusern (Besançon, Dijon, Nancy, Reims und Straßburg) und zwei Allgemeinkrankenhäusern (Colmar und Troyes) im Nordosten Frankreichs durchgeführt. Ein Jahr lang werden alle Enterobacteriaceae-Isolate mit einer verminderten Empfindlichkeit gegenüber Carbapenemen (CDSE) gemäß dem Antibiogramm-Komitee 2012 der Französischen Gesellschaft für Mikrobiologie (CA-SFM) (MHK von Ertapenem > 0,5 μg/ml) gesammelt und an die Bakteriologie geschickt Labor des Universitätsklinikums Reims. Unter diesen Stämmen werden 105 zufällig ausgewählt. Die klinische Studie wird wie folgt durchgeführt: Für jeden in einem Zentrum eingeschlossenen Patienten mit CDSE-Isolat werden 2 Kontrollpatienten ausgewählt. Dabei handelt es sich um Patienten mit den beiden Enterobacteriaceae-Isolaten, die keine verringerte Empfindlichkeit gegenüber Carbapenemen aufweisen und die das CDSE-Isolat im selben Zentrum erhalten.

Mikrobiologische Studie: Die Identifizierung von Isolaten erfolgt mittels MALDI-TOF (Bruker Daltonics, Bremen, Deutschland). Die Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika wird durch die Scheibendiffusionsmethode gemäß den Richtlinien des European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) bestimmt (www.EUCAST.org). und Beta-Lactamase mit erweitertem Spektrum (ESBLs) werden durch den Doppelscheiben-Synergietest nachgewiesen und die minimalen Carbapenem-Hemmkonzentrationen (MHK gegenüber Imipenem, Ertapenem, Doripenem und Meropenem) werden mithilfe von E-test®-Streifen bestimmt. Die Metallo-β-Lactamase-Produktion wurde mit dem MβL Etest (bioMérieux, Marcy l'Etoile, Frankreich) überprüft. Beta-Lactamasen werden mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR) nachgewiesen. Carbapenemase-kodierende Gene (blaKPC, blaVIM, blaIMP, blaNDM, blaOXA-23-like, blaOXA-24-like, blaOXA-58-like und blaOXA-48-like) wurden mithilfe von Multiplex-PCRs und blaIMI und blaGES mit Simplex-PCRs gescreent. Alle nachgewiesenen blaOXA-48-like wurden anschließend sequenziert. Die Gene blaTEM, blaSHV, blaCTX-M und blaOXA wurden durch PCR unter Verwendung spezifischer Primer nachgewiesen. Plasmidvermittelte AmpC-Typ-Gene blaACC, blaFOX, blaMOX, blaDHA, blaCMY und blaMIR wurden mithilfe von Multiplex-PCRs gescreent. Alle Beta-Lactamasen sind sequenziert. Mutationen in der Chinolonresistenz-bestimmenden Region (QRDR) werden durch PCR und Sequenzierung in den Genen gyrA, gyrB, parC und parE identifiziert. Qnr- und qepA-Gene werden durch Echtzeit-PCR, aac(6')-Ib-cr durch Pyrosequenzierung und oqxAB durch konventionelle PCR nachgewiesen. Die Genotypisierung erfolgt mittels Pulsfeld-Gelelektrophorese (PFGE) und Multilocus-Sequenztypisierung (MLST).

Statistische Analyse: Qualitative Variablen werden mit dem Chi2-Test und dem zweiseitigen exakten Fisher-Test analysiert. Quantitative Variablen werden mit dem Mann-Whitney-Test verglichen. Anschließend wird eine multivariate Analyse durchgeführt: logistische Regression mit schrittweisen Faktoren als erklärenden Variablen, wobei p <0,20 in der univariaten Analyse als Eingabeschwelle und Ausgabe auf 0,20 festgelegt ist. Die Ergebnisse gelten als statistisch signifikant, wenn P < 0,05.

Erwartete Ergebnisse: Diese Studie wird den Anteil der verschiedenen beteiligten Spezies, der Carbapenemase im Vergleich zu den anderen Mechanismen und den Grad der Resistenz bei MIC ermitteln. Risikofaktoren wie eine frühere Antibiotikabehandlung, der Schweregrad der zugrunde liegenden Erkrankung oder die Übertragung klonaler Stämme werden nachgewiesen, sodass präventive Kontrollmaßnahmen zur Umsetzung ermittelt werden können.