健康な組織におけるメラノーマ細胞の播種の追跡 (DISSEMELA)

西側世界では、黒色腫の発生率は過去 50 年間常に上昇しており、現在 20 ～ 29 歳の女性に最も多い腫瘍であると報告されています。 BRAF、NRAS、および c-kit 遺伝子は、細胞増殖において重要な役割を果たしており、メラノーマでは非常に高い頻度で変異しています。 新薬の使用により得られた最近の治療上のブレークスルーにもかかわらず、転移性黒色腫は依然として生命を脅かす疾患のままです。 メラノーマの主な問題の 1 つは、転移の拡大につながる最初のステップに関するものであり、より良い理解がその防止の重要なステップであり、新しい分子メカニズムの特定が私たちの治療兵器の改善に実装されます。

提案された研究は、最近開発された e-ice cold PCR の強力な技術と古典的な免疫組織化学を使用して、ヒト黒色腫の早期拡大の仮説を研究することを目的としています。 そうするために、研究者は黒色腫の治療が正常な腫瘍周囲皮膚とセンチネルリンパ節の二次切除に依存しているという事実を利用します。 この腫瘍周囲組織は大きく (直径 2 ～ 6 cm)、メラノサイトの転移経路をホストすると考えられている組織である皮下組織にリンパ管が含まれており、部分的に分析に利用できます。

2005年から2009年の間に含まれるパリのコホート、メランコホート、コーチン病院、およびギュスターヴ・ルシー研究所で追跡されたステージIbおよびIIの黒色腫のすべての患者が検出されます。 原発腫瘍のパラフィン包埋切片から抽出した DNA に対して PCR 分析を行います。 BRAF (BRAFV600E、BRAFV600K)、NRAS (コドン 61) または c-kit 遺伝子に変異を示す患者が選択されます。 健康な病巣周囲の皮膚および健康なセンチネルリンパ節からのアーカイブパラフィン包埋組織が得られる。 上記の遺伝子の通常の位置にある変異を標的とするパイロシーケンシングおよび e-ice cold PCR は、これらの標本から抽出された DNA に対して行われます。 免疫蛍光抗BRAFV600Eまたは抗腫瘍/開始/幹細胞は、同じ組織で行われます。 これらの単純な技術は、高感度の分子生物学ツールを使用して、黒色腫を有するヒトにおいて、組織病理学的に健康なセンチネルリンパ節および腫瘍周囲皮膚に黒色腫細胞の早期播種があるかどうかをテストします。 これらの健康な組織におけるこれらのクローン細胞の存在は、5 年後の患者の生存と相関し、新しい治療フォローアップと戦略の開発を可能にします。