追踪健康组织中黑色素瘤细胞的传播 (DISSEMELA)

在西方世界，黑色素瘤的发病率在过去 50 年里不断上升，目前据报道是 20-29 岁女性中最常见的肿瘤。 BRAF、NRAS 和 c-kit 基因在细胞增殖中起着重要作用，并且在黑色素瘤中以非常高的频率发生突变。 尽管最近使用新药取得了治疗突破，但转移性黑色素瘤仍然是一种危及生命的疾病。 黑色素瘤的主要问题之一涉及导致转移扩散的初始步骤，更好地理解是预防黑色素瘤的关键步骤，并且确定新的分子机制正在实施以改善我们的治疗武器库。

拟议的工作旨在使用最近开发的强大的电子冰冷 PCR 技术以及经典免疫组织化学研究人类黑色素瘤早期扩散的假设。 为此，研究人员将利用黑色素瘤的治疗依赖于正常瘤周皮肤和前哨淋巴结的二次切除这一事实。 这种肿瘤周围组织很大（直径为 2 至 6 厘米），在皮下组织中含有淋巴管，该组织被认为是黑素细胞转移途径的宿主，并且部分可用于分析。

将找到 2005 年至 2009 年间在巴黎队列 Melan-队列、Cochin 医院和 Gustave Roussy 研究所随访的所有 Ib 和 II 期黑色素瘤患者。 将对从原发性肿瘤的石蜡包埋切片中提取的 DNA 进行 PCR 分析。 将选择显示 BRAF（BRAFV600E、BRAFV600K）、NRAS（密码子 61）或 c-kit 基因突变的患者。 将从健康的周围皮肤以及健康的前哨淋巴结中获得存档的石蜡包埋组织。 将对从这些标本中提取的 DNA 进行焦磷酸测序和电子冰冷 PCR，以在其通常位置发生上述基因的突变为目标。 免疫荧光抗 BRAFV600E 或抗肿瘤/起始/干细胞将在相同组织上进行。 这些简单的技术将使用一种敏感的分子生物学工具来测试，在患有黑色素瘤的人类中，是否在组织病理学健康的前哨淋巴结和瘤周皮肤中存在黑色素瘤细胞的早期传播。 这些克隆细胞在这些健康组织中的存在将与患者 5 年后的存活相关联，并将允许开发新的治疗随访和策略。