妊娠後期におけるB群レンサ球菌の膣内コロニー形成を減少させる経口プロバイオティクス

グループ B 連鎖球菌 (GBS) または Streptococcus agalactiae は、健康な女性集団の 10 ～ 30% に存在するグラム陽性菌です (1)。 妊娠中および分娩期を通じて、GBS による母体のコロニー形成は、乳児への細菌の垂直感染につながる可能性があります。 これは、早期発症型 GBS 感染症として知られる新生児敗血症、肺炎、および髄膜炎、ならびに母体の尿路感染症、関節炎、および肺炎を引き起こす可能性があります (2)。 GBS 感染を防ぐために、さまざまな戦略がテストされました。 出生前GBSスクリーニングは、分娩中に抗菌薬予防を受けるべき保菌女性を特定できることが証明されました。 この戦略により、新生児敗血症の発生率がほぼ 80% 大幅に減少しました (3)。 その結果、早期発症新生児敗血症の発生率を比較した場合、スクリーニングはリスク関連の手順よりも優れていたため、GBS スクリーニングの一般的な使用が米国とアメリカの推奨事項に統合されました (4)。 その後、GBS スクリーニングは、欧州コンセンサス会議の推奨事項の一部にもなりました (3)。

健康な女性の泌尿生殖器微生物叢は、いくつかの要因への曝露に応じて組成が異なる約 50 種の生物で構成されています。 妊娠中の女性のフローラは、生殖器感染症から保護する上で重要な役割を果たしているさまざまな乳酸桿菌種によって支配されています (5). 乳酸桿菌の欠乏は、膣内の微生物バランスを乱す可能性があり、その結果、GBS などの病原体のコロニー形成に対する感受性が高まる可能性があります (6)。 ガルドネレラ・バギナリスによって実証されたように、ラクトバチルス菌株は、インビトロ設定でこれらの病原体のバイオフィルムを破壊し、それらの増殖を阻害することができます (7)。 これにより、感染症を予防または治療するために、膣にプロバイオティクスを使用するようになりました. 乳酸桿菌株を含むプロバイオティクスの補給は、後に治癒率を改善し、再発性感染症を防ぐことが証明されました (8).

私たちの部門では、妊娠ケアには出生前の相談が含まれており、女性は 10 + 0 (10 週 + 0 日) から 16 + 0 (16 週 + 0 日) の妊娠週の間の計画分娩に登録します。 この診察中、彼らは膣内フローラのグラム染色分析による無症候性膣感染症の定期的なスクリーニングを受けます(9)。 膣感染症の場合は、4～6 週間後にフォローアップの塗抹検査を受けます。 定期的な妊娠ケアは、公式の母子小冊子に記載されているオーストリア政府の福祉プログラムに従って、外来の婦人科医のオフィスで行われます。 この国の妊娠管理プログラムは、女性とその胎児の健康上の予防措置に使用され、所定のポイントで義務的な検査が行われます (10)。 ヨーロッパのガイドラインでは、妊娠 35 + 0 週から 37 + 0 週の間にグループ B レンサ球菌 (GBS) による膣内定着の出生前スクリーニングを推奨しています。 ）。

私たちの部門での出産のための定期的な登録中に、女性は私たちの研究に参加するよう求められます. 適格性の評価は、（i）単胎妊娠、（ii）差し迫った流産がない、（iii）最近抗生物質またはプロバイオティクス治療を受けていない女性で実施されます。 インフォームドコンセントの後、研究参加者は、最初の研究訪問のために妊娠34 + 0週から36 + 0週の間に提示するよう求められます。 この訪問では、CDC が推奨する膣から直腸への混合スワブが、膣入口部と肛門直腸から採取されます。 組み合わせたインキュベーションにより、GBS の検出率が最大 30% 増加することが知られています (11)。 滅菌スワブは、外側膣壁および後部膣円蓋から膣液を採取した後、肛門括約筋に挿入した後に得られます。 培養ベースの方法では、それらは輸送培地に適用され、その後微生物検査室で接種されます。 接種後、選択的増菌ブロス（TransVag Broth）を使用し、続いて 18 ～ 24 時間インキュベーションします。 その後、さらに 18 ～ 24 時間、選択培地を使用して継代培養を行います。 コロニーが存在する場合、グループ A または B 連鎖球菌が存在するかどうかを判断するために、それらを抽出します (12、13)。 GBS 陽性結果のしきい値は、スワブあたり 102 コロニー形成単位 (CFU) を超えると見なされます。

GBSスクリーニング結果が陰性の場合、女性は研究から除外されます。 GBS スクリーニング結果が陽性の場合、女性は無作為に verum またはプラセボ群に割り付けられます。 この研究は、前向き無作為化プラセボ対照二重盲検モノセントリックデザインに従います。 無作為化は、臨床試験のためのウェブベースの患者無作為化サービスである Randomizer® (Institute for Medical Informatics, Statistics and Documentation, Medical University of Graz) を使用して実行されます。 ヴェルムグループに割り当てられた女性は、ラクトバチルス・クリスパタス Lbv88、ラクトバチルス・ラムノサス Lbv96、ラクトバチルス・ジェンセン Lbv116、およびラクトバチルス・ガッセリ Lbv150 を含む、4 つの実行可能な乳酸菌株 (HSO ヘルスケア GmbH、ウィーン、オーストリア) の特許取得済み栄養補助食品を受け取ります。 この補給は、病原性微生物に対するバリア効果を介して微生物生態系で作用し、腸内腔から膣領域に移行することが証明されているため、腸内環境異常症および再発性感染症に関連する症状を緩和または予防することさえできます (14-16)。 サプリメントには、14 日間の 1 日 2 回 (朝/夜) の経口摂取が含まれます。 プラセボ群の女性は、同じ外観の経口ポテト-マルトデキストリンベースのプラセボを受け取り、これも 1 日 2 回 (朝/晩) 14 日間与えられます. 患者、治験責任医師、および微生物学スタッフは、割り当てられた治療について知らされません。 治験薬の組成は次のとおりです: L.crispatus Lbv88 (DSM 22566) 1 x 10^9 保証生細胞数 (CFU/用量)、L. rhamnosus Lbv96 (DSM 22560) 1 x 10^9 CFU/用量、 L. jensenii Lbv116 (DSM 22567) 0.2 x 10^9 CFU/回、L. gasseri Lbv150N (DSM 22583) 0.3 x 10^9 CFU/回、ポテト マルトデキストリン、不溶性食物繊維、二酸化ケイ素。

各参加者から、妊娠 36 + 0 ～ 38 + 0 週の間の 2 回目の研究訪問中に、連続した膣スワブが採取されます (つまり、最初の研究訪問の 2 週間後)。 滅菌スワブを入手し、前述のように接種します。 GBS スクリーニング結果が陽性の場合、(i) 患者にはその後通知され、結果は (ii) 母子小冊子および (iii) PIA 胎児データベース、バージョン 5.6.16.917 (General Electric Company) に記録されます。 、GE視点、ミュンヘン、ドイツ）。 この手順は、分娩中のペニシリン治療を確実にするために必要であり、現在のガイドラインと日常的な慣行に従います (2)。 両方の研究訪問中に、研究訪問1で急性感染症（すなわち、細菌性膣炎、トリコモナス症、カンジダ症）の女性を除外し、さらに得るために、膣スワブも採取して膣内細菌叢のグラム染色分析を行います。彼らの植物相に関する情報。

私たちの研究の主要なエンドポイントは、GBS 陰性状態への回復です。 副次評価項目には、(i) 早期発症新生児敗血症の発生率 (生後 7 日未満)、(ii) 遅発性新生児敗血症の発生率 (生後 7 日以上)、(iii) 妊娠出産時年齢、妊娠 37 + 0 週以降の満期分娩として記録、(iv) 妊娠 36 + 6 週以前の分娩として定義される早産率、(v) 新生児の出生時体重として定義される出生時体重分娩時間、(vi) 1 分間のアプガースコアが 0 を超える乳児の正期産または早産と定義される生児出生率、および (vii) 分娩様式 (すなわち、自然経膣分娩) 、帝王切開、または器械的経腟分娩）。

当科では、1日約10名の患者さんが定期的に分娩登録を行っています。 それらのすべては、研究の適格性について評価されます。 これらの患者の約 60% は、感染のない正常な膣フローラを呈し、1 日あたり 6/10 の潜在的に適格な患者の数につながります。 ヨーロッパにおける母親の GBS 保菌率に関するシステマティック レビューでは、6.5% から 36% の範囲の率が報告されています。 保菌率は、東ヨーロッパで 19.7% から 29.3%、西ヨーロッパで 11% から 21%、スカンジナビアで 24.3% から 36%、南ヨーロッパで 6.5% から 32% とさまざまでした (17)。 したがって研究者は、我々の産科集団内での GBS 定着率は約 25% であると結論付けています。 これにより、1 日あたり 1.5/6 人の潜在的に適格な患者が得られ、無作為化に割り当てることができます。

本研究の検出力は、二分されたエンドポイント: 回復 y/n を使用して計算されました。 (すなわち、GBS 陰性として定義)。 サンプルサイズの計算では、研究者は、verum グループの女性の 43% が主要エンドポイント (つまり、GBS 陰性状態への回復) を達成すると想定しています。 この計算は、以前に公開された臨床および前臨床データ (18-20) に基づいています。 研究者は、プラセボ群で 18% の回復率を期待しています。 これらの仮定の下で、両側有意水準 α = 0.05 でのカイ 2 乗検定は、グループあたり N = 70 のサンプルでグループ差を検出する 90% の検出力を持ちます。 したがって、10% の脱落率に関して、研究者は、研究訪問 1 で N = 1040 をスクリーニングする必要があります。 ) GBS陽性になります。 これらのうち、グループごとに N = 78 がランダム化され、10% の推定ドロップアウトの後、グループごとに N = 70 になります。 治験責任医師は、研究に含めるために 1040 人の患者をスクリーニングするのに 9 ～ 12 か月かかります。

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