口服益生菌可减少妊娠晚期阴道 B 族链球菌定植

B 族链球菌 (GBS) 或无乳链球菌是一种革兰氏阳性菌，存在于 10-30% 的健康女性中 (1)。 在整个怀孕期间和分娩期间，GBS 的母体定植可导致细菌垂直传播给婴儿。 这可能导致新生儿败血症、肺炎和脑膜炎（称为早发性 GBS 感染），以及母体尿路感染、关节炎和肺炎 (2)。 测试了各种策略来防止 GBS 感染。 产前 GBS 筛查已被成功证明可以识别被定植的女性，她们应该接受产时抗菌药物预防。 这一策略使新生儿败血症的发病率大幅降低了近 80% (3)。 因此，在比较早发性新生儿败血症的发生率时，GBS 筛查的普遍使用被整合到美国和美国的建议中，因为筛查优于风险相关程序 (4)。 后来，GBS 筛选也成为欧洲共识会议 (3) 推荐的一部分。

健康女性的泌尿生殖系统微生物群落包含大约 50 种生物，它们的组成因暴露于多种因素而不同。 孕妇的菌群以多种乳酸菌为主，它们在保护她们免受生殖器感染方面发挥着重要作用 (5)。 乳酸杆菌缺乏会扰乱阴道内的微生物平衡，这可能会增加对 GBS 等病原体定植的易感性 (6)。 正如阴道加德纳菌所证明的那样，乳杆菌菌株可以在体外环境中破坏这些病原体的生物膜，从而抑制它们的生长 (7)。 这导致使用益生菌填充阴道，以预防或治疗感染。 后来证明，补充含有乳杆菌菌株的益生菌可以提高治愈率并预防复发性感染 (8)。

在我们的部门，怀孕护理包括产前咨询，妇女在 10 + 0（10 周加 0 天）和 16 + 0（16 周加 0 天）妊娠周之间登记计划分娩。 在这次会诊期间，他们通过对阴道菌群的革兰氏染色分析 (9) 进行无症状阴道感染的常规筛查。 如果出现阴道感染，他们会在 4-6 周后进行后续涂片检查。 根据官方母婴手册中记载的奥地利政府福利计划，常规妊娠护理在门诊妇科医生办公室进行。 该国家孕期保健计划用于妇女及其胎儿的健康预防措施，包括在预定时间点进行的强制性检查 (10)。 欧洲指南建议在孕周 35 + 0 和 37 + 0 之间对 B 组链球菌 (GBS) 的阴道定植进行产前筛查，这由门诊妇科医生根据需要进行，但在奥地利通常不包括在社会健康保险中 (3 ).

在我们部门的例行分娩登记期间，将要求女性参加我们的研究。 资格评估将在以下情况的妇女中进行：(i) 单胎妊娠，(ii) 没有即将发生的流产，(iii) 最近没有接受过抗生素或益生菌治疗。 知情同意后，研究参与者将被要求在 34 + 0 和 36 + 0 妊娠周之间进行首次研究访问。 在此次就诊时，将从阴道口和肛门直肠采集 CDC 推荐的阴道-直肠联合拭子。 已知联合孵育可将 GBS 的检出率提高高达 30% (11)。 从阴道外侧壁和阴道后穹窿收集阴道液后，将获得无菌拭子，然后插入肛门括约肌。 对于基于培养的方法，将它们应用于运输介质，然后在微生物实验室中接种。 接种后，将使用选择性增菌肉汤（TransVag Broth），然后孵育 18 至 24 小时。 随后将使用选择性培养基进行亚培养 18 至 24 小时。 如果存在菌落，将对它们进行提取以确定是否存在 A 组或 B 组链球菌 (12, 13)。 GBS 阳性结果的阈值将被视为每个拭子大于 102 个菌落形成单位 (CFU)。

如果 GBS 筛查结果为阴性，女性将被排除在研究之外。 如果 GBS 筛查结果呈阳性，女性将被随机分配到 verum 或安慰剂组。 该研究将遵循前瞻性随机安慰剂对照双盲单中心设计。 随机化将使用 Randomizer®（格拉茨医科大学医学信息学、统计和文献研究所）进行，这是一种基于网络的临床试验患者随机化服务。 被分配到 verum 组的女性将获得四种活乳酸杆菌菌株（HSO Health Care GmbH，维也纳，奥地利）的专利膳食补充剂，其中包含卷曲乳杆菌 Lbv88、鼠李糖乳杆菌 Lbv96、詹氏乳杆菌 Lbv116 和加氏乳杆菌 Lbv150。 事实证明，这种补充剂可以从肠腔转移到阴道区域，通过对病原微生物的屏障作用作用于微生物生态系统，从而可以缓解甚至预防与生态失调和反复感染相关的症状 (14-16)。 补充将包括每天两次（早上/晚上）口服摄入，持续 14 天。 安慰剂组中的女性将接受外观相同的口服马铃薯麦芽糖糊精安慰剂，该安慰剂也将每天两次（早上/晚上）服用，持续 14 天。 患者、研究人员和微生物学工作人员将对治疗分配不知情。 研究药物的组成如下： L.crispatus Lbv88 (DSM 22566) 1 x 10^9 Guaranteed viable cell count (CFU/dose), L. rhamnosus Lbv96 (DSM 22560) 1 x 10^9 CFU/dose, L. jensenii Lbv116 (DSM 22567) 0.2 x 10^9 CFU/剂量、L. gasseri Lbv150N (DSM 22583) 0.3 x 10^9 CFU/剂量、马铃薯麦芽糖糊精、不溶性膳食纤维和二氧化硅。

在 36 + 0 和 38 + 0 妊娠周（即第一次研究访问后 2 周）的第二次研究访问期间，将对每位参与者进行连续的阴道拭子采集。 如前所述，将获得无菌拭子并进行接种。 如果 GBS 筛查结果呈阳性，(i) 随后将通知患者，结果将记录在 (ii) 母子手册和 (iii) PIA 胎儿数据库 5.6.16.917 版（通用电气公司）中, GE 观点，慕尼黑，德国）。 该程序对于确保产时青霉素治疗是必要的，这将遵循现行指南和常规做法 (2)。 在两次研究访问期间，还将采集阴道拭子对阴道菌群进行革兰氏染色分析，以排除在研究访问 1 时患有急性感染（即细菌性阴道病、滴虫病、念珠菌病）的女性，并进一步了解关于他们的植物群的信息。

我们研究的主要终点将是恢复到 GBS 阴性状态。 次要终点将包括 (i) 早发性新生儿败血症的发生率（出生后小于 7 天），(ii) 迟发性新生儿败血症的发生率（出生后大于 7 天），(iii) 妊娠期分娩年龄，记录为在 37 + 0 孕周或之后足月分娩，(iv) 早产率，定义为在 36 + 6 孕周或之前分娩，(v) 新生儿出生体重，定义为体重分娩时间，(vi) 活产率，定义为 1 分钟时 Apgar 评分 > 0 的婴儿足月分娩或早产，以及 (vii) 分娩方式（即自然阴道分娩） 、剖腹产或器械阴道分娩）。

每天大约有 10 名患者在我们部门进行例行登记以进行分娩。 所有这些人都将被评估是否有资格参加这项研究。 这些患者中大约 60% 会出现正常的阴道菌群而没有感染，这将导致每天有 6/10 可能符合条件的患者数量。 一项关于欧洲母体 GBS 定植流行率的系统评价报告的发生率为 6.5% 至 36%。 运输率在东欧 19.7% 到 29.3%、西欧 11% 到 21%、斯堪的纳维亚半岛 24.3% 到 36% 和南欧 6.5% 到 32% 之间变化 (17)。 因此，研究人员得出结论，我们产科人群中的 GBS 定植率约为 25%。 这将导致每天有 1.5/6 可能符合条件的患者数量，然后他们可以被分配到随机化。

本研究的功效是使用二分终点计算的：恢复 y/n。 （即定义为 GBS 阴性）。 对于样本量计算，研究人员假设 verum 组中 43% 的女性将达到主要终点（即恢复到 GBS 阴性状态）。 该计算基于先前公布的临床和临床前数据 (18-20)。 研究人员预计安慰剂组的康复率为 18%。 在这些假设下，双侧显着性水平 α = 0.05 的卡方检验将具有 90% 的功效来检测每组 N = 70 的样本中的组差异。 对于 10% 的退出率，研究人员因此需要在研究访问 1 时筛选 N = 1040，这将导致 624/1040 (60%) 名患者没有感染，其中 156/624 (25%) ) 将是 GBS 阳性。 其中，每组 N = 78 将被随机分配，这将导致在估计退出 10% 后每组 N = 70。 研究人员将需要 9-12 个月的时间来筛选 1040 名患者以进行研究。

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参考：

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