着床失敗を繰り返した患者における子宮内膜受容性を PET の準備段階として検討

研究デザイン: 非ランダム化臨床試験

包含基準：再発性着床失敗の既往歴のある女性で、少なくとも3回の新鮮または凍結サイクルで少なくとも4つの良質の胚の移植歴がある

• 40歳未満の女性

  • BMI (25 - 33)

  • 非糖尿病研究アーム: 2

    1. -凍結胚移植または以前の基準を満たす新しいICSIサイクルの女性（研究群）。

    2. 肥沃な患者の対照群（対照群として局所機械的避妊を受けている肥沃な患者）。 すべての関連遺伝子のカットオフ値の同定に役立ちます。

       サンプルサイズ: 60 介入

       フェーズ 1

    1. 最近のラボ (2 日目の血清 FSH、LH TSH、PROLACTIN 血清 E 2) 6 ミリ秒以内
    2. シクロプロゲノバの白色錠剤 4 mg /12 時間 2 回 / 日
    3. (9 日目) 1 日あたり 600 mg のプロゲステロンを追加します。
    4. プロゲステロン開始の5日目に、pipplle子宮内膜吸引キュレットを使用して子宮内膜生検を行います
    5. 子宮内膜組織の​​着床と妊娠維持に必要な 11 の遺伝子の QRT-PCR を使用した間接免疫蛍光法。 EB を受容前、受容、受容後に分類し、移植の翌日を計画します。
    6. 研究対象の遺伝子: 最もアクセスしやすい遺伝子が研究されます。
    1. ホメオボックス遺伝子 (HOXA-10) のアップレギュレート
    2. LIFアップレギュレート
    3. Alpha VB3インテグレンとそのリガンドであるオステオポンチンが陽性に検出されます
    4. ECMのアップレギュレート
    5. 傍分泌間質因子、+ve (EGF (上皮成長因子)、ヘパリン結合 EGF)

• VE 17 B エストラジオール (E2 因子) 6- L セレクチンが上方制御 7- E-カドヘリン ( 下方制御) 8- 細胞間細胞接着分子が高度に発現 9- ムチン 1 が移植時に下方制御 10- IL-6 が上方制御 11- IL-1 および IL - 1 R がアップレギュレートされた 12- プロスタグランジン輸送体 (PGT) が中後期の分泌で減少。 フェーズ 2 7- 研究群で 次のサイクルは、凍結 ET のアクティブな ttt サイクルを開始します (シクロプロジェノバの白い錠剤を 1 日 2 回投与し、その後 9 日目に子宮内膜の厚さが 9 mm を超える場合は経膣 US を実行します 凍結胚の移植のために 5 日目までプロゲステロンを開始します または標準プロトコルによる新しい ICSI サイクル (すべての患者データに応じた長いプロトコルまたはアンタゴニスト プロトコル)。 次に、提案された治療法の1つを選択します

  1. 移植前のヒト絨毛性ゴナドトロピンの子宮内注射
  2. 子宮内投与された顆粒球コロニー刺激因子（OPの日に300 mcg / mlまたはFETのプロゲステロン投与
  3. 組換えLIF
  4. または 1 と 2 の組み合わせ
  1. 低用量アスピリンを毎日75mg
  2. ステロイド 毎日ホスタコルチン5mg
  3. アクティブサイクル治療前の子宮内膜損傷サイクル

  8- 子宮内膜受容性遺伝子の QRT-PCR 法 RNA 抽出 研究したすべてのグループの細胞を溶解し、RNAeasy Mini Kit (Qiagen) を使用して全 RNA を分離し、Beckman デュアル分光光度計 (USA) を使用して量と質をさらに分析しました。

リアルタイム PCR (qRT-PCR) HOXA-10、LIF、アルファ VB3 インテグレンおよびそのリガンドであるオステオポンチン、ECM、EGF、E2 FACTOR、L-セレクチン、E-カドヘリン、ICAM、Mucin1、IL-6、IL1 の定量的発現用、IL-1RおよびPGT。次の手順で評価されます。 High capacity cDNA Reverse Transcriptase kit (Applied Biosystem、米国) を使用した逆転写による cDNA 合成には、各サンプルからの 10 ng の全 RNA を使用します。 続いて、Syber Green I PCR Master Kit (Fermentas) を用いて、Step One 装置 (Applied Biosystem、USA) を使用して、次のように 48 ウェル プレートで cDNA を増幅します。増幅ステップでは、95ºC で 15 秒、55ºC で 20 秒、72ºC で 30 秒。 各標的遺伝子の発現の変化は、ΔΔCt法により、ハウスキーピング遺伝子としてのβ-アクチンの平均臨界閾値（CT）値に対して正規化されます。 各標的遺伝子に特異的な両方のプライマーを 1 μM 使用します。 DNA配列決定は、研究されたすべての遺伝子について評価されます