Endometriell mottaglighet hos patienter med återkommande implantationsfel som ett förberedande steg för PET

Studiedesign: Icke-randomiserad klinisk prövning

Inklusionskriterier: kvinnor med anamnes på återkommande implantationssvikt med historik av överföring av minst 4 embryon av god kvalitet i minst 3 färska eller frysta cykler

• Kvinnor är yngre än 40 år

  • BMI (25–33)

  • Icke diabetiker Studiegrenar: 2

    1. Kvinnor för fryst embryoöverföring eller ny ICSI-cykel som uppfyller tidigare kriterier (studiearm).

    2. Kontrollgrupp av fertila patienter (fertila patienter som får lokala mekaniska preventivmedel som referensgrupp). För att hjälpa till att identifiera avskurna värden för alla relaterade gener.

       Provstorlek: 60 Intervention

       Fas 1

    1. Nyligen genomförda laborationer (dag 2 serum FSH, LH TSH, PROLACTIN serum E 2) inom 6 ms
    2. Vita tabletter av cycloprogenova 4 mg /12 timmar två gånger / dag
    3. Tillsätt progesteron på (dag 9) 600 mg per dag.
    4. På dag 5 av start progesteron gör endometriebiopsi med pipplle endometrial sugkyrett
    5. Indirekt immunfluorescens med QRT-PCR av endometrievävnaden för 11 gener som är nödvändiga för implantation och underhåll av graviditet. Klassificera EB som pre-receptive, receptive och post-receptive och planera nästa dag för överföring.
    6. Gener som ska studeras: de mest tillgängliga generna kommer att studeras.
    1. Homeobox-genen (HOXA-10) uppreglerad
    2. LIF uppreglerad
    3. Alpha VB3 integren och dess ligand osteopontin detekteras positivt
    4. ECM uppreglerad
    5. Parakrina stromala faktorer, +ve (EGF (epidermal tillväxtfaktor), heparinbindande EGF)

• VE 17 B östradiol (E2 faktorer) 6- L selektin uppreglerad 7- E-cadherin (nedreglerad) 8- Intercellulära celladhesionsmolekyler högt uttryckta 9- Mucin 1 nedreglerad vid implantation 10- IL-6 uppreglerade 11- IL-1 och IL - 1 R uppreglerad 12- Prostaglandintransportör (PGT) reducerad i mitten av sent sekretion. Fas 2 7- I studiearmen Nästa cykel starta aktiv ttt-cykel av frusen ET (vit tablett Cykloprogenova två gånger dagligen, sedan på dag 9 gör transvaginal UL när endometrietjockleken är mer än 9 mm starta progesteron till dag 5 för överföring av frysta embryon eller ny ICSI-cykel enligt standardprotokoll (långa eller antagonistprotokoll enligt varje patientdata). välj sedan en av de föreslagna behandlingarna

  1. Intrauterin injektion av humana koriongonadotropiner före överföring
  2. Granulocytkolonistimulerande faktor ges intrauterin (300 mcg/ml på dagen för OP eller progesteronadministrering av FET
  3. Rekombinant LIF
  4. Eller kombination av 1 och 2 Vanliga åtgärder som ska göras i alla situationer
  1. Lågdos aspirin 75 mg dagligen
  2. Steroider 5 mg hostakortin dagligen
  3. Endometrieskadacykel före aktiv cykelbehandling

  8- Teknik för QRT-PCR av endometriemottaglighetsgener RNA-extraktion Celler från alla studerade grupper kommer att lyseras och totalt RNA isolerades med RNAeasy Mini Kit (Qiagen) och analyserades vidare för kvantitet och kvalitet med Beckman dubbelspektrofotometer (USA).

Realtids-PCR (qRT-PCR) För kvantitativt uttryck av HOXA-10, LIF, Alpha VB3 integren och dess ligand osteopontin, ECM, EGF, E2 FACTOR, L-selektin, E-cadherin, ICAM, Mucin1, IL-6, IL1 IL-IR och PGT; följande procedur kommer att bedömas. 10 ng av det totala RNA:t från varje prov kommer att användas för cDNA-syntes genom omvänd transkription med högkapacitet cDNA Reverse Transcriptase-kit (Applied Biosystem, USA). cDNA:t kommer därefter att amplifieras med Syber Green I PCR Master Kit (Fermentas) i en 48-brunnars platta med hjälp av Step One-instrumentet (Applied Biosystem, USA) enligt följande: 10 minuter vid 95 ºC för enzymaktivering följt av 40 cykler av 15 sekunder vid 95 ºC, 20 sekunder vid 55 ºC och 30 sekunder vid 72 ºC för amplifieringssteget. Förändringar i uttrycket av varje målgen kommer att normaliseras i förhållande till de genomsnittliga kritiska tröskelvärdena (CT) för β-aktin som hushållsgen genom ΔΔCt-metoden. Vi kommer att använda 1 μM av båda primrarna specifika för varje målgen. DNA-sekvensering kommer att bedömas för alla studerade gener