반복적인 착상 실패 환자의 PET 준비 단계로서의 자궁내막 수용성

연구 설계: 비무작위 임상 시험

포함 기준: 3회 이상의 신선 또는 냉동 주기에서 4개 이상의 양질의 배아를 이식한 이력과 함께 재발성 착상 실패 병력이 있는 여성

• 40세 미만의 여성

  • BMI(25~33)

  • 비 당뇨병 연구 무기: 2

    1. 이전 기준을 충족하는 새로운 ICSI 주기 또는 냉동 배아 이식을 위한 여성(연구 부문).

    2. 가임기 환자의 대조군(참조군으로 국소 기계적 피임을 받는 가임기 환자). 관련된 모든 유전자의 컷오프 값을 식별하는 데 도움이 됩니다.

       샘플 크기: 60 개입

       1단계

    1. 최근 실험실(2일 혈청 FSH, LH TSH , PROLACTIN 혈청 E 2) 6ms 이내
    2. 시클로프로제노바 4mg/12hs 백색정제 1일 2회
    3. (9일째) 하루 600mg의 프로게스테론을 추가합니다.
    4. 프로게스테론 시작 5일째에 pipplle 자궁내막 흡입 큐렛을 사용하여 자궁내막 생검을 수행합니다.
    5. 착상 및 임신유지에 필요한 11개 유전자에 대한 자궁내막조직의 QRT-PCR을 이용한 간접면역형광법. EB를 사전 수용, 수용 및 사후 수용으로 분류하고 다음 날 이전을 계획합니다.
    6. 연구할 유전자: 가장 접근하기 쉬운 유전자를 연구합니다.
    1. 호메오박스 유전자(HOXA-10) 상향조절
    2. LIF 상향 조정
    3. Alpha VB3 integren과 그 리간드 osteopontin이 양성으로 검출됩니다.
    4. ECM 상향 조정
    5. 주변분비 기질 인자, +ve(EGF(표피 성장 인자), 헤파린 결합 EGF)

• VE 17 B 에스트라디올(E2 인자) 6- L 셀렉틴 상향 조절 7- E-카데린( 하향 조절) 8- 세포간 세포 부착 분자 고도로 발현 9- 이식 시 하향 조절 뮤신 1 10- IL-6 상향 조절 11- IL-1 및 IL - 1R 상향 조절된 12-프로스타글란딘 수송체(PGT)는 중기 후반 분비물에서 감소했습니다. 2단계 7- 연구 부문에서 다음 주기는 동결 ET의 활성 ttt 주기를 시작합니다(Cycloprogenova의 흰색 정제를 매일 2회 투여한 다음 9일째 자궁내막 두께가 9mm 이상일 때 질식 US를 수행합니다. 동결 배아 이식을 위해 5일까지 프로게스테론을 시작하거나 표준 프로토콜에 따른 새로운 ICSI 주기(모든 환자 데이터에 따른 긴 프로토콜 또는 길항제 프로토콜). 그런 다음 제안된 치료 중 하나를 선택합니다.

  1. 이식 전 인간 융모막 성선 자극 호르몬의 자궁 내 주사
  2. 과립구 콜로니 자극 인자 자궁내 투여(OP 당일 300mcg/ml 또는 FET의 프로게스테론 투여)
  3. 재조합 LIF
  4. 또는 1과 2의 조합 모든 상황에서 수행되는 일반적인 조치
  1. 저용량 아스피린 매일 75mg
  2. 매일 5mg의 호스타코르틴 스테로이드
  3. 활성 주기 치료 전 자궁내막 손상 주기

  8- 자궁내막 수용성 유전자의 QRT-PCR 기법 RNA 추출 모든 연구 그룹의 세포를 용해시키고 총 RNA를 RNAeasy Mini Kit(Qiagen)로 분리한 다음 Beckman dual spectrophotometer(USA)로 양과 질에 대해 추가로 분석했습니다.

Real Time PCR (qRT-PCR) HOXA-10, LIF, Alpha VB3 integren 및 그 리간드 osteopontin, ECM, EGF, E2 FACTOR, L-selectin, E-cadherin, ICAM, Mucin1, IL-6, IL1의 정량적 발현 , IL-1R 및 PGT; 다음 절차가 평가됩니다. High capacity cDNA Reverse Transcriptase kit(Applied Biosystem, USA)를 사용하여 역전사에 의해 각 샘플의 총 RNA 10ng을 cDNA 합성에 사용합니다. cDNA는 이후 다음과 같이 Step One 기기(Applied Biosystem, USA)를 사용하여 48웰 플레이트에서 Syber Green I PCR 마스터 키트(Fermentas)로 증폭됩니다. 효소 활성화를 위해 95ºC에서 10분 후 40주기의 증폭 단계의 경우 95ºC에서 15초, 55ºC에서 20초, 72ºC에서 30초. 각 표적 유전자의 발현 변화는 ΔΔCt 방법에 의해 하우스키핑 유전자로서 β-액틴의 평균 임계 역치(CT) 값에 대해 정규화될 것이다. 각 표적 유전자에 특이적인 두 프라이머 모두 1μM을 사용합니다. 연구된 모든 유전자에 대해 DNA 시퀀싱을 평가합니다.