子宮内膜ヘパリン結合上皮成長因子の発現

この前向き研究は、UKM 医療センターで 1 年間実施される予定です。 PCOS およびコントロールの女性は、産科および婦人科の医療支援クリニックから採用されます。

この調査のサンプル サイズは、Dupont & Plummer 1998 の Power and Sample Size Calculator を使用して、対応のある t 検定応答バージョン 3.1.2 で計算されます。 Mengling et al. による体外受精 (IVF) 後の妊娠の成功率を予測する際に、着床のウィンドウ中の Hb-EGF 発現の平均のエンドポイントを使用します。 2016 (11) は、その具体的な成果の 1 つです。 このプログラムを使用して自動生成されたサンプル サイズは 8 科目です。 サンプルのドロップアウト率が 30% であることを考慮すると、この研究で必要な合計サンプル サイズは各アーム 10 人の被験者であり、合計サンプル サイズは 40 になります。

参加者は、PCOS 診断とアジア成人人口肥満指数 (BMI) に従って 4 つのグループに分けられます。

1. BMIが27を超える無排卵性PCOS女性（OB-PCOS）
2. BMIが25未満の無排卵性PCOS女性（NW-PCOS）
3. BMI が 27 を超える健康で妊娠可能な女性 (OB-C)
4. BMI 25 未満の健康で妊娠可能な女性 (NW-C)

PCOSグループでは、一般的に無排卵周期であるため、分泌中期の子宮内膜の着床ウィンドウは、以前に公開された方法に基づいて10日間毎日経口微粉化プロゲステロン（ウトロゲスタン200mg）に続いて示すことができます。

通常の定期的な月経を伴う対照群の志願者は、手順に関してカウンセリングを受け、排卵について監視されます。 子宮内膜生検は、超音波および尿中LHが排卵を確認してから7〜9日後に発生した着床ウィンドウ（中分泌子宮内膜）中に取得されます。

子宮内膜サンプルは、すべての参加者の Pipelle de Cornier カテーテルを使用して取得されます。 採取された子宮内膜サンプルは 2 つの部分に分けられます。子宮内膜年代測定のための組織病理学的検査 (HPE) 用の部分と、リアルタイム PCR 分析用に摂氏 -80 度の液体窒素で凍結された部分。

子宮内膜年代測定では、Noyesの基準に従って、すべてのサンプルを古典的な組織学的分析によって分析しました。

製造元の指示に従って、RNA easy kitを使用して子宮内膜組織から全量のRNAを単離した。 ペレットは 30ul の RNAase-DNAse フリー水に懸濁されます。 最後に、ナノドロップを使用して RNA の濃度と品質を決定します。 製造元の指示に従うことにより、全 RNA は cDNA に逆転写されます。 cDNA のターゲットは、ヘパリン結合上皮成長因子のプライマーです。 QRT-PCR は、Sybergreen Master Mix を使用して実行され、製造元のプロトコルに従って QRT-PCR 検出機を使用して検出されます。 反応は、リアルタイム PCR マシンで 40 サイクル、次のサイクル温度で実行されました。 95 ºC で 15 秒間維持します。 相対定量化は、利用可能なハウスキーピング遺伝子に対して正規化することによって計算されます。 陽性対照と陰性対照は、各分析実行に含まれます。