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新しい 2 ステップ IVM システムにおける胚発生の可能性 (CAPA-IVM-Sib)

2024年11月21日 更新者:Universitair Ziekenhuis Brussel

標準 IVM と比較して、成熟前培養ステップ (「容量ステップ」) を含む卵母細胞のインビトロ卵母細胞成熟 (IVM) で二相性の後に得られた胚の発生能を調査する試験。

In vitro 成熟は、毎日の ART クリニックでの PCO(S) 患者にとって有効なオプションですが、成熟と胚発生は、標準的な COS 治療によって得られる効率レベルとまだ一致していません。 IVM 後の胚の質をさらに向上させるために、IVM を開始する前に、卵母細胞と卵丘細胞の間の接続と通信を長期の成熟前培養のために無傷に保つという仮説が立てられました。 これは、減数分裂ブロッカー C 型ナトリウム利尿ペプチド (CNP) を使用して調査および確立されています。

CNP ペプチドは、成長中の卵胞に高濃度で存在し、壁の顆粒膜細胞コンパートメントによって生成され、卵丘細胞に存在するナトリウム利尿ペプチド受容体 2 (NRP2) に結合します。 NRP2 に CNP が結合すると、卵丘細胞の細胞内 cGMP が増加し、卵母細胞への帯状突起を通って移動します。 卵母細胞では、cGMP が減数分裂の再開をブロックします。

減数分裂の天然の阻害剤として CNP を使用して、卵母細胞と周囲の卵丘細胞が通信できるように新しい培地が設計されたため、追加の培養期間である成熟前段階またはキャパシテーション段階 (CAPA) の能力が得られます。 このシステムはマウスで開発され、UZ Brussel で研究資料 (toelating federaal EC: CFE-FCE ADV_073_ZUBrussel、toelating lokaal EC: 2016/411 BUN 143201630723) でヒトでテストされ、ベトナムの臨床現場で使用されました。

調査の概要

詳細な説明

クリニックで使用されている現在の IVM システムは、単一ステップのアプローチを採用しており、成熟の点で二相性の CAPA-IVM システムを使用した研究や文献の調査結果と比較して効率が悪いようです。

二相性 CAPA-IVM システムの効率を確認するために、標準 IVM と CAPA-IVM の両方が兄弟卵母細胞で実行されます: 調査センターの標準 IVM の成熟は平均 47.5% であり、CAPA-IVM は文献で 62% の成熟に達します。 .

研究者は、成熟の面で CAPA-IVM システムの優位性を証明することを目指しています。 また、受精と胚発生を比較します。

研究への参加を認められた参加者は、参加者の卵母細胞の一部に対する標準 IVM 治療と、参加者の卵母細胞の 2 番目の部分に対する二相性 CAPA IVM システムの両方を受けます。

一方の卵巣では、通常の卵母細胞ピックアップ (OPU) が行われ、卵母細胞は標準 IVM 処理に割り当てられ、もう一方の卵巣では CAPA IVM システムが適用されます。 これは、卵胞環境から解放された卵母細胞が、阻害する CNP ペプチドに直ちにさらされる必要があることを意味します。したがって、穿刺された卵胞から卵胞液を収集するためのチューブには、CNP 添加培地があらかじめ充填されています。 OPU 手順は両方の卵巣で同一であり、標準的な OPU IVM 手順に従って、卵胞液を収集するための空のチューブまたは事前に充填されたチューブの唯一の違いがあります。

2 つの卵巣からの卵母細胞は、属性プロトコルに従ってラボで別々に処理されます。

卵母細胞の IVM の後、成熟した卵母細胞は、パートナーの精子またはドナー精子との ICSI に供されます。 パートナーの精子サンプルは、遅くとも採卵日に凍結され、卵細胞質内精子注入法 (ICSI) の日に解凍されます。これは、2 つの異なるタイムライン (30 時間の成熟と 24 時間以上の成熟) を持つ 2 つの異なる IVM プロトコルの使用によるものです。 30 時間の成熟)、ICSI は、毎日新鮮な解凍した精子細胞のストローを使用して 2 日間連続して行われます。

胚発生は、ICSI 後 3 日目 (卵割段階) まで続きます。 十分な品質のすべての胚は、ホルモン補充療法 (HRT) サイクルでの遅延胚移植のためにガラス化されます。 形態学的品質評価パラメーターに基づいて胚移植用に 1 つの胚が選択され、前の IVM 方法に関係なく、移植の最初の選択肢としてより良い品質が選択されます。 凍結単一胚移植サイクルは、妊娠まで繰り返されます。

研究の種類

介入

入学 (実際)

23

段階

  • 適用できない

連絡先と場所

このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。

研究場所

参加基準

研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。

適格基準

就学可能な年齢

14年~32年 (大人)

健康ボランティアの受け入れ

いいえ

説明

包含基準:

  • PCO(S)患者
  • 抗ミュラー管ホルモン≧3.6ng/mL
  • 基底胞状卵胞数≧20
  • トライアルの全ランク

除外基準:

  • 外科的に採取された精液サンプル
  • グレード 3 または 4 の子宮内膜症、軽度または重度の子宮異常
  • 着床前遺伝子検査
  • レトロゾールによるプライミング

研究計画

このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。

研究はどのように設計されていますか?

デザインの詳細

  • 主な目的:処理
  • 割り当て:ランダム化
  • 介入モデル:並列代入
  • マスキング:独身

武器と介入

参加者グループ / アーム
介入・治療
実験的:CAPA IVM
CAPA IVM は、卵母細胞が C 型ナトリウム利尿ペプチド (CNP) の存在によって 22 ~ 24 時間減数分裂停止状態に保たれる追加の培養ステップが、インビトロ成熟システムの前にある 2 ステップのインビトロ成熟システムです。成熟培地にアンフィレグリン (AREG) を添加する体外成熟ステップ。 Medicult-Origioの「IVMシステム」をベース培地として使用。

CAPA 培地は、卵母細胞を減数分裂停止状態に 22 ~ 24 時間保持します。 IVM 培地は、卵母細胞が減数分裂を再開できるようにします。

CAPA 培地: 10% ヒト血清アルブミン (HSA) + 10nM エストラジオール (E2) + 25nM CNP + 5ng/ml インスリン + 1mIU/ml 卵胞刺激ホルモン (FSH) IVM 培地: 10% HSA + 10nM E2 + 5ng/ml インスリン + 101mIU/ml FSH + 100ng/ml AREG CNP: 減数分裂停止を維持するために卵胞に自然に発生するペプチド、E2: エストロゲン、CNP の効果を高める、インスリン: 細胞培養で使用される基本的な成長因子、および標準 IVM の市販の LAG 培地の成分システム、AREG: 減数分裂の再開を助ける LHCG 受容体の下流エフェクター。 HSA、FSH、hCG は CE ラベルが付いています。 CAPA IVM 培地は現在、CE マーク付きの市販の培地としてまだ入手できず、社内で準備する必要があります。

介入なし:標準 IVM
IVM は、卵母細胞がすぐに in vitro 成熟培地に 30 時間さらされるシングル ステップ プロトコルとして実行されます。 これは、Medicult-Origio の市販の「IVM システム」を使用した臨床診療における現在の標準的な手順です。 標準 IVM 培地: 10% HSA + 75mIU/ml FSH + 100mIU/ml hCG

この研究は何を測定していますか?

主要な結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
卵母細胞の成熟
時間枠:卵母細胞の成熟は、標準 IVM プロトコルでは 30 時間後、CAPA IVM 後は 54 時間後に評価されます。
卵母細胞が最初の極体を押し出す能力
卵母細胞の成熟は、標準 IVM プロトコルでは 30 時間後、CAPA IVM 後は 54 時間後に評価されます。

二次結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
稼働率
時間枠:利用率はICSIの3日後に確立されます
遅延胚移植のためにガラス化するのに十分な品質の胚
利用率はICSIの3日後に確立されます
受精率
時間枠:2 つの前核の存在は、ICSI の 18 ~ 20 時間後に評価されます。
卵母細胞が活性化されて前核を形成する能力
2 つの前核の存在は、ICSI の 18 ~ 20 時間後に評価されます。
受精卵母細胞あたりの胚の質を表す形態学的パラメータ
時間枠:胚発生評価はICSIの3日後に行われます
形態学的特性によって推定される胚発生能: 6 細胞以上、20% 未満の断片化、分裂パターンによる細胞サイズ、および多核割球の欠如を有する胚は、良質の胚と見なされます。 二次パラメータとして、割球の大部分における液胞または肉芽の存在は、前述のパラメータに関係なく、胚を「良質」グループから除外します。
胚発生評価はICSIの3日後に行われます
胚凍結耐性
時間枠:最初の加温は、新しい HRT サイクルで OPU 後 1 か月以内に行われ、採卵後 1 年まで妊娠まで繰り返されます。
胚内の細胞生存に対するガラス化および加温プロセスによってもたらされる損傷、およびガラス化/加温された胚が卵割分裂を再開する能力
最初の加温は、新しい HRT サイクルで OPU 後 1 か月以内に行われ、採卵後 1 年まで妊娠まで繰り返されます。

協力者と研究者

ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。

捜査官

  • 主任研究者:Michel De Vos, MD, PhD、VUB- UZ Brussel

出版物と役立つリンク

研究に関する情報を入力する責任者は、自発的にこれらの出版物を提供します。これらは、研究に関連するあらゆるものに関するものである可能性があります。

一般刊行物

研究記録日

これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。

主要日程の研究

研究開始 (実際)

2020年7月16日

一次修了 (実際)

2021年5月30日

研究の完了 (実際)

2023年12月31日

試験登録日

最初に提出

2020年2月14日

QC基準を満たした最初の提出物

2020年2月24日

最初の投稿 (実際)

2020年2月26日

学習記録の更新

投稿された最後の更新 (推定)

2024年11月25日

QC基準を満たした最後の更新が送信されました

2024年11月21日

最終確認日

2024年11月1日

詳しくは

本研究に関する用語

その他の研究ID番号

  • 2020-CAPA-IVM-Sibling

個々の参加者データ (IPD) の計画

個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?

いいえ

医薬品およびデバイス情報、研究文書

米国FDA規制医薬品の研究

いいえ

米国FDA規制機器製品の研究

いいえ

米国で製造され、米国から輸出された製品。

いいえ

この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。

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