Potencial de desarrollo embrionario en un nuevo sistema IVM de 2 pasos (CAPA-IVM-Sib)
Ensayo que investiga el potencial de desarrollo de los embriones obtenidos después de la maduración bifásica de ovocitos in vitro (IVM) de ovocitos que incluye un paso de cultivo de maduración previa ("paso de capacitación") en comparación con IVM estándar.
La maduración in vitro es una opción válida para pacientes con PCO(S) en la clínica de TRA diaria, sin embargo, la maduración y el desarrollo embriológico aún no alcanzan los niveles de eficiencia obtenidos por el tratamiento estándar con COS. Para mejorar aún más la calidad del embrión después de la IVM, se planteó la hipótesis de mantener intactas la conexión y la comunicación entre el ovocito y las células del cúmulo durante un cultivo prolongado de premaduración antes de que se iniciara la IVM. Esto se ha investigado y establecido utilizando un péptido natriurético de tipo C (CNP) bloqueador meiótico.
El péptido CNP está presente en altas concentraciones en el folículo en crecimiento, es producido por el compartimento de las células de la granulosa mural y se une al receptor 2 del péptido natriurético (NRP2) presente en las células del cúmulo. La unión de CNP a NRP2 conduce a un aumento de cGMP intracelular en las células del cúmulo, que viaja a través de las proyecciones transzonales al ovocito. En el ovocito, cGMP bloqueará la reanudación de la meiosis.
Usando CNP como inhibidor natural de la meiosis, se diseñó un nuevo medio para permitir que los ovocitos y las células del cúmulo circundantes se comuniquen y, por lo tanto, adquieran competencia para un período de cultivo adicional: la fase de premaduración o fase de Capacitación (CAPA). Este sistema se desarrolló en ratones, se probó en humanos en UZ Brussel con material de investigación (toelating federal EC: CFE-FCE ADV_073_ZUBrussel, toelating lokaal EC: 2016/411 BUN 143201630723) y se usó en un entorno clínico en Vietnam.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
El sistema IVM actual en uso en la clínica tiene un enfoque de un solo paso y parece ser menos eficiente en comparación con los hallazgos de la investigación y la literatura que utilizan un sistema CAPA-IVM bifásico en términos de maduración.
Para determinar la eficiencia del sistema bifásico CAPA-IVM, tanto la IVM estándar como la CAPA-IVM se realizarán en ovocitos hermanos: la maduración en la IVM estándar en el centro del investigador es en promedio del 47,5 %, donde CAPA-IVM alcanza el 62 % de maduración en la literatura .
Los investigadores pretenden demostrar la superioridad del sistema CAPA-IVM en términos de maduración. También se compararán la fecundación y el desarrollo embrionario.
Las participantes admitidas en el estudio recibirán tanto el tratamiento IVM estándar para parte de los ovocitos de la participante como el sistema CAPA IVM bifásico para la segunda parte de los ovocitos de la participante.
En un ovario se realizará una recogida regular de ovocitos (OPU) con ovocitos asignados al tratamiento IVM estándar, en el otro ovario se aplicará el sistema CAPA IVM. Esto significa que los ovocitos que se liberan del entorno folicular deben exponerse inmediatamente al péptido CNP inhibidor y, por lo tanto, los tubos para recolectar el líquido folicular de los folículos perforados se llenan previamente con medio suplementado con CNP. El procedimiento OPU es idéntico para ambos ovarios y de acuerdo con nuestro procedimiento estándar OPU IVM con la única diferencia de tubos vacíos o prellenados para recolectar líquido folicular.
Los ovocitos de los 2 ovarios se procesan por separado en el laboratorio de acuerdo con el protocolo atribuido.
Después de la IVM de los ovocitos, los ovocitos maduros se someten a ICSI con esperma de la pareja o de donante. La muestra de esperma de la pareja se congelará a más tardar el día de la extracción del óvulo y se descongelará el día de la inyección intracitoplasmática de esperma (ICSI): debido al uso de 2 protocolos IVM diferentes con 2 líneas de tiempo diferentes (30 horas de maduración versus 24 horas+ 30 horas de maduración), la ICSI se llevará a cabo en dos días consecutivos con una pajilla de espermatozoides recién descongelada para cada día.
Se sigue el desarrollo del embrión hasta el día 3 (etapa de clivaje) después de la ICSI. Todos los embriones de calidad suficiente serán vitrificados para una transferencia embrionaria diferida en un ciclo de terapia hormonal sustitutiva (TRH). Se seleccionará un embrión para la transferencia de embriones en función de los parámetros de evaluación de la calidad morfológica, siendo el de mejor calidad la primera opción para la transferencia, independientemente del método IVM anterior. Los ciclos de transferencia de un solo embrión congelado se repiten hasta el embarazo.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Brussels, Bélgica, 1090
- UZ Brussel
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios de inclusión:
- Pacientes con SOP(S)
- Hormona antimülleriana ≥ 3,6 ng/mL
- Recuento de folículos antrales basales ≥ 20
- Todos los rangos de prueba
Criterio de exclusión:
- Muestra de semen obtenida quirúrgicamente
- Endometriosis de grado 3 o 4, anomalías uterinas menores o mayores
- Pruebas genéticas preimplantacionales
- Cebado con Letrozol
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Tratamiento
- Asignación: Aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación paralela
- Enmascaramiento: Único
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Experimental: CAPA MIV
CAPA IVM es un sistema de maduración in vitro de 2 pasos en el que un paso de cultivo adicional, en el que los ovocitos se mantienen en parada meiótica por la presencia del péptido natriurético tipo C (CNP) durante 22-24 horas, precede a la in etapa de maduración in vitro en la que el medio de maduración se complementa con anfirregulina (AREG).
El 'Sistema IVM' de Medicult-Origio se utiliza como medio base.
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El medio CAPA mantiene los ovocitos en parada meiótica durante 22-24 horas. El medio IVM permite que los ovocitos reanuden la meiosis. Medio CAPA: 10 % de albúmina sérica humana (HSA) + 10 nM de estradiol (E2) + 25 nM de CNP + 5 ng/ml de insulina + 1 mUI/ml de hormona estimulante del folículo (FSH) Medio IVM: 10 % de HSA + 10 nM de E2 + 5 ng/ml de insulina + 101 mIU/ml FSH + 100 ng/ml AREG CNP: péptido que se encuentra de forma natural en los folículos para mantener la detención meiótica, E2: estrógeno, mejora los efectos de CNP, Insulina: factor de crecimiento básico utilizado en cultivos celulares y componente del medio LAG comercialmente disponible de la IVM estándar sistema, AREG: efector aguas abajo del receptor LHCG que ayuda a la reanudación meiótica. HSA, FSH y hCG tienen la marca CE. Actualmente, el medio CAPA IVM aún no está disponible como medio disponible comercialmente con la marca CE y debe prepararse internamente. |
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Sin intervención: MIV estándar
La IVM se realiza como un protocolo de un solo paso en el que los ovocitos se exponen inmediatamente a un medio de maduración in vitro durante 30 horas.
Este es el procedimiento estándar actual en la práctica clínica que utiliza el 'Sistema IVM' disponible comercialmente de Medicult-Origio.
Medio IVM estándar: 10 % HSA + 75 mIU/ml FSH + 100 mIU/ml hCG
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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maduración de ovocitos
Periodo de tiempo: la maduración de los ovocitos se evalúa después de 30 horas en el protocolo IVM estándar y después de 54 horas después de CAPA IVM
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la capacidad del ovocito para extruir el primer cuerpo polar
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la maduración de los ovocitos se evalúa después de 30 horas en el protocolo IVM estándar y después de 54 horas después de CAPA IVM
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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tasa de uso
Periodo de tiempo: la tasa de utilización se establecerá 3 días después de ICSI
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los embriones de calidad suficiente para ser vitrificados para una transferencia embrionaria diferida
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la tasa de utilización se establecerá 3 días después de ICSI
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Tasa de fertilización
Periodo de tiempo: La presencia de 2 pronúcleos se valora entre las 18-20 horas posteriores a la ICSI
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la capacidad del ovocito para activarse y formar pronúcleos
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La presencia de 2 pronúcleos se valora entre las 18-20 horas posteriores a la ICSI
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parámetros morfológicos que describen la calidad del embrión por ovocito fertilizado
Periodo de tiempo: la evaluación del desarrollo del embrión se realiza 3 días después de la ICSI
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Potencial de desarrollo embrionario estimado por características morfológicas: embriones con 6 células o más, menos del 20% de fragmentación, tamaño celular acorde al patrón de división y ausencia de blastómeros multinucleados se consideran embriones de buena calidad.
Como parámetros secundarios, la presencia de vacuolas o granulación en la mayoría de los blastómeros excluirá al embrión del grupo de 'buena calidad' independientemente de los parámetros mencionados anteriormente.
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la evaluación del desarrollo del embrión se realiza 3 días después de la ICSI
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criotolerancia embrionaria
Periodo de tiempo: El primer calentamiento se realiza dentro de un mes después de la OPU en un nuevo ciclo de TRH y se repite hasta el embarazo hasta 1 año después de la extracción de óvulos.
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el daño provocado por el proceso de vitrificación y calentamiento sobre la supervivencia celular dentro del embrión y la capacidad del embrión vitrificado/calentado para reanudar las divisiones de división
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El primer calentamiento se realiza dentro de un mes después de la OPU en un nuevo ciclo de TRH y se repite hasta el embarazo hasta 1 año después de la extracción de óvulos.
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Colaboradores e Investigadores
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Investigadores
- Investigador principal: Michel De Vos, MD, PhD, VUB- UZ Brussel
Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Romero S, Lolicato F, Sanchez F, Van Ranst H, Krueger F, Segonds-Pichon A, De Vos M, Andrews S, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. DNA methylation and mRNA expression of imprinted genes in blastocysts derived from an improved in vitro maturation method for oocytes from small antral follicles in polycystic ovary syndrome patients. Hum Reprod. 2019 Sep 29;34(9):1640-1649. doi: 10.1093/humrep/dez121.
- Romero S, Sanchez F, Lolicato F, Van Ranst H, Smitz J. Immature Oocytes from Unprimed Juvenile Mice Become a Valuable Source for Embryo Production When Using C-Type Natriuretic Peptide as Essential Component of Culture Medium. Biol Reprod. 2016 Sep;95(3):64. doi: 10.1095/biolreprod.116.139808. Epub 2016 Aug 3.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
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Términos relacionados con este estudio
Otros números de identificación del estudio
- 2020-CAPA-IVM-Sibling
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
producto fabricado y exportado desde los EE. UU.
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