Potencjał rozwojowy zarodka w nowatorskim 2-etapowym systemie IVM (CAPA-IVM-Sib)
Próba badająca potencjał rozwojowy zarodków uzyskanych po dwufazowym dojrzewaniu oocytów in vitro (IVM) oocytów, w tym etap hodowli przed dojrzewaniem („etap kapacytacji”) w porównaniu ze standardowym IVM.
Dojrzewanie in vitro jest ważną opcją dla pacjentów z PCO(S) w codziennej klinice ART, jednak dojrzewanie i rozwój embriologiczny nie są jeszcze zgodne z poziomami wydajności uzyskiwanymi przy standardowym leczeniu COS. Aby jeszcze bardziej poprawić jakość zarodków po IVM, postawiono hipotezę, że połączenie i komunikacja między oocytem a komórkami wzgórka nienaruszone przez przedłużoną hodowlę przed dojrzewaniem przed rozpoczęciem IVM. Zostało to zbadane i ustalone przy użyciu blokera mejotycznego peptydu natriuretycznego typu C (CNP).
Peptyd CNP jest obecny w wysokim stężeniu w rosnącym pęcherzyku, jest wytwarzany przez kompartment komórek warstwy ziarnistej ściany i wiąże się z receptorem peptydu natriuretycznego 2 (NRP2) obecnym w komórkach wzgórka. Wiązanie CNP z NRP2 prowadzi do wewnątrzkomórkowego wzrostu cGMP w komórkach wzgórka, który przemieszcza się przez projekcje międzystrefowe do oocytu. W oocycie cGMP zablokuje wznowienie mejozy.
Wykorzystując CNP jako naturalny inhibitor mejozy, zaprojektowano nową pożywkę, aby umożliwić komunikację oocytu i otaczających go komórek wzgórka, a tym samym uzyskanie kompetencji na dodatkowy okres hodowli: fazę przed dojrzewaniem lub fazę pojemności (CAPA). System ten został opracowany na myszach, przetestowany na ludziach w UZ Brussel na materiale badawczym (toelating federalaal EC: CFE-FCE ADV_073_ZUBrussel, toelating lokaal EC: 2016/411 BUN 143201630723) i zastosowany w warunkach klinicznych w Wietnamie.
Przegląd badań
Szczegółowy opis
Obecny system IVM stosowany w klinice ma podejście jednoetapowe i wydaje się być mniej wydajny w porównaniu z wynikami badań i piśmiennictwa wykorzystującymi dwufazowy system CAPA-IVM pod względem dojrzewania.
Aby potwierdzić skuteczność dwufazowego systemu CAPA-IVM, zarówno standardowe IVM, jak i CAPA-IVM zostaną przeprowadzone na oocytach rodzeństwa: dojrzewanie w standardowym IVM w centrum badacza wynosi średnio 47,5%, podczas gdy CAPA-IVM osiąga 62% dojrzewania w literaturze .
Celem badaczy jest udowodnienie wyższości systemu CAPA-IVM w zakresie dojrzewania. Porównywane będzie również zapłodnienie i rozwój zarodka.
Uczestniczki dopuszczone do badania otrzymają zarówno standardowe leczenie IVM dla części oocytów uczestniczki, jak i dwufazowy system CAPA IVM dla drugiej części oocytów uczestniczki.
W jednym jajniku nastąpi regularne pobieranie oocytów (OPU) z komórek jajowych przypisanych do standardowego leczenia IVM, w drugim jajniku zastosowany zostanie system CAPA IVM. Oznacza to, że oocyty, które są uwalniane ze środowiska pęcherzyka, muszą być natychmiast wystawione na działanie hamującego peptydu CNP, a zatem probówki do zbierania płynu pęcherzykowego z nakłutych pęcherzyków są wstępnie wypełnione pożywką uzupełnioną CNP. Procedura OPU jest identyczna dla obu jajników i jest zgodna z naszą standardową procedurą OPU IVM, z tą różnicą, że do pobrania płynu pęcherzykowego są puste lub wstępnie napełnione probówki.
Oocyty z 2 jajników są oddzielnie przetwarzane w laboratorium zgodnie z przypisanym protokołem.
Po IVM oocytów dojrzałe oocyty poddaje się ICSI z nasieniem partnera lub nasieniem dawcy. Próbka nasienia partnera zostanie zamrożona najpóźniej w dniu pobrania komórki jajowej i rozmrożona w dniu docytoplazmatycznej iniekcji plemnika (ICSI): dzięki zastosowaniu 2 różnych protokołów IVM z 2 różnymi liniami czasowymi (dojrzewanie 30 godzin w porównaniu z 24 godzinami + 30 godzin dojrzewania), ICSI będzie odbywać się przez dwa kolejne dni ze świeżo rozmrożoną słomką plemników na każdy dzień.
Rozwój zarodka śledzono do 3 dnia (stadium rozszczepiania) po ICSI. Wszystkie zarodki o odpowiedniej jakości zostaną poddane witryfikacji do odroczonego transferu zarodków w cyklu hormonalnej terapii zastępczej (HTZ). Jeden zarodek zostanie wybrany do transferu na podstawie parametrów oceny jakości morfologicznej, z lepszą jakością jako pierwszym wyborem do transferu, niezależnie od poprzedzającej metody IVM. Zamrożone cykle transferu pojedynczych zarodków są powtarzane aż do ciąży.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Faza
- Nie dotyczy
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Brussels, Belgia, 1090
- UZ Brussel
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Pacjenci z PCO(S).
- Hormon anty-Mullerowski ≥ 3,6 ng/ml
- Podstawowa liczba pęcherzyków antralnych ≥ 20
- Wszystkie stopnie próby
Kryteria wyłączenia:
- Próbka nasienia pobrana chirurgicznie
- Endometrioza stopnia 3 lub 4, mniejsze lub większe nieprawidłowości macicy
- Preimplantacyjne badania genetyczne
- Płukanie Letrozolem
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Leczenie
- Przydział: Randomizowane
- Model interwencyjny: Przydział równoległy
- Maskowanie: Pojedynczy
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Eksperymentalny: CAPA IVM
CAPA IVM to dwuetapowy system dojrzewania in vitro, w którym dodatkowy etap hodowli, w którym oocyty są utrzymywane w stanie zatrzymania mejotycznego przez obecność peptydu natriuretycznego typu C (CNP) przez 22-24 godziny, poprzedza etap dojrzewania in vitro, w którym pożywkę do dojrzewania uzupełnia się amfireguliną (AREG).
„System IVM” firmy Medicult-Origio jest używany jako podłoże podstawowe.
|
Pożywka CAPA utrzymuje komórki jajowe w zatrzymaniu mejozy przez 22-24 godziny. Pożywka IVM umożliwia oocytom wznowienie mejozy. Podłoże CAPA: 10% albumina surowicy ludzkiej (HSA) + 10 nM estradiol (E2) + 25 nM CNP + 5 ng/ml Insulina + 1 mIU/ml hormon folikulotropowy (FSH) Podłoże IVM: 10% HSA + 10 nM E2 + 5 ng/ml Insulina + 101mIU/ml FSH + 100ng/ml AREG CNP: peptyd naturalnie występujący w mieszkach włosowych w celu utrzymania zatrzymania mejotycznego, E2: estrogen, wzmacnia działanie CNP, Insulina: podstawowy czynnik wzrostu stosowany w hodowlach komórkowych i składnik dostępnej na rynku pożywki LAG standardowego IVM system, AREG: dalszy efektor receptora LHCG, który pomaga wznowić mejozę. HSA, FSH i hCG są oznaczone znakiem CE. Podłoże CAPA IVM nie jest obecnie dostępne jako dostępne w handlu podłoże z oznaczeniem CE i należy je przygotować we własnym zakresie. |
|
Brak interwencji: Standardowy IVM
IVM przeprowadza się jako protokół jednoetapowy, w którym oocyty są natychmiast wystawiane na działanie pożywki do dojrzewania in vitro przez 30 godzin.
Jest to obecnie standardowa procedura w praktyce klinicznej z wykorzystaniem dostępnego na rynku systemu „IVM” firmy Medicult-Origio.
Standardowa pożywka IVM: 10% HSA + 75mIU/ml FSH + 100mIU/ml hCG
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
dojrzewanie oocytów
Ramy czasowe: dojrzewanie oocytów ocenia się po 30 godzinach w standardowym protokole IVM i po 54 godzinach po CAPA IVM
|
zdolność komórki jajowej do wytłoczenia pierwszego ciała kierunkowego
|
dojrzewanie oocytów ocenia się po 30 godzinach w standardowym protokole IVM i po 54 godzinach po CAPA IVM
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
wskaźnik wykorzystania
Ramy czasowe: wskaźnik wykorzystania zostanie ustalony 3 dni po ICSI
|
zarodki o wystarczającej jakości do witryfikacji w celu odroczonego transferu zarodków
|
wskaźnik wykorzystania zostanie ustalony 3 dni po ICSI
|
|
Współczynnik zapłodnienia
Ramy czasowe: Obecność 2 przedjądrzy ocenia się między 18 a 20 godziną po ICSI
|
zdolność komórki jajowej do aktywacji i tworzenia przedjądrzy
|
Obecność 2 przedjądrzy ocenia się między 18 a 20 godziną po ICSI
|
|
parametry morfologiczne opisujące jakość zarodka przypadającego na zapłodnioną komórkę jajową
Ramy czasowe: ocenę rozwoju zarodka przeprowadza się 3 dni po ICSI
|
potencjał rozwojowy zarodka oszacowany na podstawie cech morfologicznych: zarodki składające się z co najmniej 6 komórek, fragmentacja poniżej 20 %, wielkość komórek zgodna ze wzorem podziału i brak blastomerów wielojądrzastych uważa się za zarodki dobrej jakości.
Jako parametry drugorzędowe obecność wakuoli lub ziarnin w większości blastomerów wyklucza zarodek z grupy „dobrej jakości” niezależnie od wcześniej wymienionych parametrów.
|
ocenę rozwoju zarodka przeprowadza się 3 dni po ICSI
|
|
kriotolerancja zarodków
Ramy czasowe: Pierwsze ocieplenie wykonuje się w ciągu miesiąca po OPU w nowym cyklu HTZ i powtarza się do ciąży do 1 roku po pobraniu komórki jajowej.
|
szkody wyrządzone przez proces witryfikacji i ogrzewania na przeżywalność komórek w zarodku oraz zdolność zeszklonego/ocieplonego zarodka do wznowienia podziałów rozszczepienia
|
Pierwsze ocieplenie wykonuje się w ciągu miesiąca po OPU w nowym cyklu HTZ i powtarza się do ciąży do 1 roku po pobraniu komórki jajowej.
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: Michel De Vos, MD, PhD, VUB- UZ Brussel
Publikacje i pomocne linki
Publikacje ogólne
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Romero S, Lolicato F, Sanchez F, Van Ranst H, Krueger F, Segonds-Pichon A, De Vos M, Andrews S, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. DNA methylation and mRNA expression of imprinted genes in blastocysts derived from an improved in vitro maturation method for oocytes from small antral follicles in polycystic ovary syndrome patients. Hum Reprod. 2019 Sep 29;34(9):1640-1649. doi: 10.1093/humrep/dez121.
- Romero S, Sanchez F, Lolicato F, Van Ranst H, Smitz J. Immature Oocytes from Unprimed Juvenile Mice Become a Valuable Source for Embryo Production When Using C-Type Natriuretic Peptide as Essential Component of Culture Medium. Biol Reprod. 2016 Sep;95(3):64. doi: 10.1095/biolreprod.116.139808. Epub 2016 Aug 3.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Rzeczywisty)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Szacowany)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Inne numery identyfikacyjne badania
- 2020-CAPA-IVM-Sibling
Plan dla danych uczestnika indywidualnego (IPD)
Planujesz udostępniać dane poszczególnych uczestników (IPD)?
Informacje o lekach i urządzeniach, dokumenty badawcze
Bada produkt leczniczy regulowany przez amerykańską FDA
Bada produkt urządzenia regulowany przez amerykańską FDA
produkt wyprodukowany i wyeksportowany z USA
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .