Потенциал развития эмбриона в новой двухэтапной системе IVM (CAPA-IVM-Sib)
Испытание по изучению потенциала развития эмбрионов, полученных после двухфазного созревания ооцитов in vitro (IVM), включая этап предварительного созревания культивирования («этап капацитации») по сравнению со стандартным IVM.
Созревание in vitro является подходящим вариантом для пациентов с поликистозом яичников (СПКЯ) в ежедневной клинике ВРТ, однако созревание и эмбриологическое развитие еще не соответствуют уровням эффективности, достигаемым при стандартном лечении COS. Для дальнейшего улучшения качества эмбрионов после IVM было высказано предположение, что соединение и связь между ооцитом и клетками кумулюса должны оставаться нетронутыми для длительного предварительного созревания культуры до начала IVM. Это было исследовано и установлено с использованием блокатора мейоза натрийуретического пептида С-типа (CNP).
Пептид CNP присутствует в высоких концентрациях в растущем фолликуле, продуцируется компартментом пристеночных гранулезных клеток и связывается с рецептором натрийуретического пептида 2 (NRP2), присутствующим в клетках кумулюса. Связывание CNP с NRP2 приводит к повышению внутриклеточного уровня цГМФ в клетках кумулюса, который проходит через трансзональные выступы к ооциту. В ооците цГМФ блокирует возобновление мейоза.
Используя CNP в качестве естественного ингибитора мейоза, была разработана новая среда, позволяющая ооцитам и окружающим клеткам кумулюса взаимодействовать и, следовательно, приобретать компетентность в течение дополнительного периода культивирования: фазы предварительного созревания или фазы капацитации (CAPA). Эта система была разработана на мышах, протестирована на людях в Брюсселе на исследовательском материале (федеральный стандарт ЕС: CFE-FCE ADV_073_ZUBrussel, местный стандарт ЕС: 2016/411 BUN 143201630723) и использовалась в клинических условиях во Вьетнаме.
Обзор исследования
Подробное описание
Текущая система IVM, используемая в клинике, имеет одноэтапный подход и кажется менее эффективной по сравнению с исследованиями и литературными данными с использованием двухфазной системы CAPA-IVM с точки зрения созревания.
Чтобы убедиться в эффективности двухфазной системы CAPA-IVM, как стандартная IVM, так и CAPA-IVM будут выполняться на родственных ооцитах: созревание в стандартной IVM в исследовательском центре составляет в среднем 47,5%, где CAPA-IVM достигает 62% созревания в литературе. .
Исследователи стремятся доказать превосходство системы CAPA-IVM с точки зрения созревания. Также будут сравнивать оплодотворение и развитие эмбриона.
Участники, допущенные к исследованию, будут получать как стандартное лечение IVM для части ооцитов участника, так и двухфазную систему CAPA IVM для второй части ооцитов участника.
В одном яичнике будет проводиться регулярный забор ооцитов (OPU) с ооцитами, предназначенными для стандартной обработки IVM, в другом яичнике будет применена система CAPA IVM. Это означает, что ооциты, освобожденные из фолликулярной среды, должны быть немедленно подвергнуты воздействию ингибирующего пептида CNP, и поэтому пробирки для сбора фолликулярной жидкости из проколотых фолликулов предварительно заполнены средой с добавлением CNP. Процедура OPU идентична для обоих яичников и соответствует нашей стандартной процедуре OPU IVM с единственным отличием: пустые или предварительно заполненные пробирки для сбора фолликулярной жидкости.
Ооциты из двух яичников отдельно обрабатываются в лаборатории в соответствии с установленным протоколом.
После ИВМ ооцитов зрелые ооциты подвергают ИКСИ со спермой партнера или донорской спермой. Образец спермы партнера будет заморожен не позднее дня извлечения яйцеклетки и будет разморожен в день интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ): из-за использования 2 разных протоколов IVM с 2 разными временными шкалами (созревание 30 часов против 24 часов+). 30 часов созревания), ИКСИ будет проводиться два дня подряд со свежеразмороженной соломинкой сперматозоидов каждый день.
Развитие эмбриона отслеживают до 3-х суток (этап дробления) после ИКСИ. Все эмбрионы достаточного качества будут витрифицированы для отложенного переноса эмбрионов в рамках цикла заместительной гормональной терапии (ЗГТ). Один эмбрион будет выбран для переноса эмбрионов на основе параметров оценки морфологического качества, при этом лучшее качество будет первым выбором для переноса, независимо от предшествующего метода IVM. Циклы переноса замороженных одиночных эмбрионов повторяются до наступления беременности.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Фаза
- Непригодный
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Brussels, Бельгия, 1090
- UZ Brussel
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Описание
Критерии включения:
- Пациенты с поликистозом яичников (S)
- Антимюллеровский гормон ≥ 3,6 нг/мл
- Базальное количество антральных фолликулов ≥ 20
- Все ранги суда
Критерий исключения:
- Образец спермы, полученный хирургическим путем
- Эндометриоз 3 или 4 степени, малые или большие аномалии матки
- Преимплантационное генетическое тестирование
- Прайминг летрозолом
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Основная цель: Уход
- Распределение: Рандомизированный
- Интервенционная модель: Параллельное назначение
- Маскировка: Одинокий
Оружие и интервенции
Группа участников / Армия |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Экспериментальный: КАПА ИВМ
CAPA IVM представляет собой двухэтапную систему созревания in vitro, в которой дополнительный этап культивирования, на котором ооциты удерживаются в состоянии мейотической остановки в присутствии натрийуретического пептида С-типа (CNP) в течение 22–24 часов, предшествует этапу культивирования. этап созревания в лабораторных условиях, на котором среда созревания дополняется амфирегулином (AREG).
«Система IVM» компании Medicult-Origio используется в качестве базовой среды.
|
Среда CAPA удерживает ооциты в состоянии остановки мейоза в течение 22-24 часов. Среда IVM позволяет ооцитам возобновить мейоз. Среда CAPA: 10 % человеческий сывороточный альбумин (HSA) + 10 нМ эстрадиола (E2) + 25 нM CNP + 5 нг/мл инсулина + 1 мМЕ/мл фолликулостимулирующего гормона (FSH) Среда IVM: 10 % HSA + 10 нM E2 + 5 нг/мл инсулина + 101 мМЕ/мл ФСГ + 100 нг/мл AREG CNP: природный пептид, присутствующий в фолликулах для поддержания остановки мейоза, E2: эстроген, усиливает действие CNP, инсулин: основной фактор роста, используемый в клеточных культурах и компонент коммерчески доступной среды LAG стандартной IVM система, AREG: нижестоящий эффектор рецептора LHCG, который способствует возобновлению мейоза. HSA, FSH и hCG имеют маркировку CE. Среда CAPA IVM в настоящее время еще недоступна как коммерчески доступная среда с маркировкой CE, и ее необходимо приготовить на месте. |
|
Без вмешательства: Стандартный ИВМ
IVM выполняется как одноэтапный протокол, в котором ооциты немедленно подвергаются воздействию среды для созревания in vitro в течение 30 часов.
Это текущая стандартная процедура в клинической практике с использованием коммерчески доступной «системы IVM» компании Medicult-Origio.
Стандартная среда IVM: 10% ЧСА + 75 мМЕ/мл ФСГ + 100 мМЕ/мл ХГЧ
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
созревание ооцитов
Временное ограничение: созревание ооцитов оценивают через 30 часов по стандартному протоколу IVM и через 54 часа после CAPA IVM
|
способность ооцита вытеснять первое полярное тельце
|
созревание ооцитов оценивают через 30 часов по стандартному протоколу IVM и через 54 часа после CAPA IVM
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Коэффициент использования
Временное ограничение: коэффициент использования будет установлен через 3 дня после ИКСИ
|
эмбрионы достаточного качества для витрификации для отсроченного переноса эмбрионов
|
коэффициент использования будет установлен через 3 дня после ИКСИ
|
|
Скорость внесения удобрений
Временное ограничение: Наличие 2 пронуклеусов оценивают через 18-20 часов после ИКСИ.
|
способность ооцита активироваться и образовывать пронуклеусы
|
Наличие 2 пронуклеусов оценивают через 18-20 часов после ИКСИ.
|
|
морфологические параметры, характеризующие качество эмбриона на оплодотворенный ооцит
Временное ограничение: оценка развития эмбриона проводится через 3 дня после ИКСИ
|
потенциал развития эмбриона, оцениваемый по морфологическим признакам: эмбрионы с 6 клетками и более, фрагментацией менее 20%, размерами клеток по схеме деления и отсутствием многоядерных бластомеров считаются эмбрионами хорошего качества.
В качестве вторичных параметров наличие вакуолей или грануляций в большинстве бластомеров исключает эмбрион из группы «хорошего качества» независимо от ранее упомянутых параметров.
|
оценка развития эмбриона проводится через 3 дня после ИКСИ
|
|
криотолерантность эмбриона
Временное ограничение: Первое согревание проводят в течение одного месяца после ОПУ в новом цикле ЗГТ и повторяют до беременности до 1 года после забора яйцеклеток.
|
ущерб, нанесенный процессом витрификации и нагревания выживаемости клеток внутри эмбриона, и способность витрифицированного/нагретого эмбриона возобновить деление дробления
|
Первое согревание проводят в течение одного месяца после ОПУ в новом цикле ЗГТ и повторяют до беременности до 1 года после забора яйцеклеток.
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Главный следователь: Michel De Vos, MD, PhD, VUB- UZ Brussel
Публикации и полезные ссылки
Общие публикации
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Romero S, Lolicato F, Sanchez F, Van Ranst H, Krueger F, Segonds-Pichon A, De Vos M, Andrews S, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. DNA methylation and mRNA expression of imprinted genes in blastocysts derived from an improved in vitro maturation method for oocytes from small antral follicles in polycystic ovary syndrome patients. Hum Reprod. 2019 Sep 29;34(9):1640-1649. doi: 10.1093/humrep/dez121.
- Romero S, Sanchez F, Lolicato F, Van Ranst H, Smitz J. Immature Oocytes from Unprimed Juvenile Mice Become a Valuable Source for Embryo Production When Using C-Type Natriuretic Peptide as Essential Component of Culture Medium. Biol Reprod. 2016 Sep;95(3):64. doi: 10.1095/biolreprod.116.139808. Epub 2016 Aug 3.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оцененный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Другие идентификационные номера исследования
- 2020-CAPA-IVM-Sibling
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
продукт, произведенный в США и экспортированный из США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .