Embryo-ontwikkelingspotentieel in een nieuw 2-staps IVM-systeem (CAPA-IVM-Sib)
Proef waarin het ontwikkelingspotentieel wordt onderzocht van embryo's die zijn verkregen na bifasische in-vitro eicelrijping (IVM) van eicellen, inclusief een prerijpingscultuurstap ('capacitatiestap') in vergelijking met standaard IVM.
In vitro rijping is een geldige optie voor PCO(S)-patiënten in de dagelijkse ART-kliniek, maar rijping en embryologische ontwikkeling komen nog niet overeen met de efficiëntieniveaus die worden verkregen door standaard COS-behandeling. Om de embryokwaliteit na IVM verder te verbeteren, werd verondersteld dat de verbinding en communicatie tussen oöcyt- en cumuluscellen intact zou blijven voor een langdurige pre-maturatiekweek voordat IVM werd gestart. Dit is onderzocht en vastgesteld met behulp van een meiotische blocker C-type Natriuretic peptide (CNP).
Het CNP-peptide is in hoge concentraties aanwezig in de groeiende follikel, wordt geproduceerd door het murale granulosacelcompartiment en bindt aan de Natriuretic peptide receptor 2 (NRP2) aanwezig in de cumuluscellen. Binding van CNP aan NRP2 leidt tot intracellulaire cGMP-toename in cumuluscellen, die door de transzonale projecties naar de eicel gaan. In de eicel blokkeert cGMP de hervatting van de meiose.
Met behulp van CNP als natuurlijke remmer van meiose, werd een nieuw medium ontworpen om eicel en omliggende cumuluscellen te laten communiceren en zo competent te worden voor een extra kweekperiode: de pre-maturatiefase of capacitatiefase (CAPA). Dit systeem werd ontwikkeld in muizen, getest in mensen in UZ Brussel op onderzoeksmateriaal (toelating federaal EC: CFE-FCE ADV_073_ZUBrussel, toelating lokaal EC: 2016/411 BUN 143201630723) en gebruikt in een klinische setting in Vietnam.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Het huidige IVM-systeem dat in de kliniek wordt gebruikt, heeft een eenstapsbenadering en lijkt minder efficiënt te zijn in vergelijking met onderzoeks- en literatuurbevindingen die een bifasisch CAPA-IVM-systeem gebruiken in termen van rijping.
Om de efficiëntie van het bifasische CAPA-IVM-systeem vast te stellen, zullen zowel standaard IVM als CAPA-IVM worden uitgevoerd op eicellen van broers en zussen: rijping in standaard IVM in het onderzoekscentrum is gemiddeld 47,5%, waar CAPA-IVM 62% rijping bereikt in de literatuur .
De onderzoekers streven ernaar de superioriteit van het CAPA-IVM-systeem te bewijzen in termen van rijping. Ook bevruchting en embryo-ontwikkeling worden vergeleken.
De deelnemers die tot het onderzoek worden toegelaten, krijgen zowel de standaard IVM-behandeling voor een deel van de eicellen van de deelnemer als het bifasische CAPA IVM-systeem voor het tweede deel van de eicellen van de deelnemer.
In de ene eierstok vindt een reguliere eicelpickup (OPU) plaats waarbij de eicellen worden toegewezen aan de standaard IVM-behandeling, in de andere eierstok wordt het CAPA IVM-systeem toegepast. Dit betekent dat oöcyten die zijn vrijgemaakt uit de folliculaire omgeving onmiddellijk moeten worden blootgesteld aan het remmende CNP-peptide en daarom zijn de buisjes om het follikelvocht uit de doorboorde follikels te verzamelen voorgevuld met CNP-aangevuld medium. De OPU-procedure is identiek voor beide eierstokken en volgens onze standaard OPU IVM-procedure met als enige verschil lege of voorgevulde buisjes om follikelvocht op te vangen.
Eicellen van de 2 eierstokken worden apart verwerkt in het labo volgens het toegekende protocol.
Na IVM van eicellen worden volwassen eicellen onderworpen aan ICSI met sperma van de partner of donorsperma. Het spermamonster van de partner wordt uiterlijk op de dag van de eicelpunctie ingevroren en ontdooid op de dag van de intracytoplasmatische sperma-injectie (ICSI): door het gebruik van 2 verschillende IVM-protocollen met 2 verschillende tijdlijnen (30 uur rijping versus 24 uur+ 30 uur rijping), vindt ICSI op twee achtereenvolgende dagen plaats met voor elke dag een vers ontdooid rietje zaadcellen.
De embryo-ontwikkeling wordt gevolgd tot dag 3 (splitsingsfase) na ICSI. Alle embryo's van voldoende kwaliteit zullen worden gevitrificeerd voor een uitgestelde embryotransfer in een cyclus van hormoonvervangingstherapie (HST). Eén embryo wordt geselecteerd voor embryotransfer op basis van de morfologische kwaliteitsbeoordelingsparameters, met de betere kwaliteit als eerste keuze voor transfer, ongeacht de voorafgaande IVM-methode. Ingevroren enkele embryotransfercycli worden herhaald tot de zwangerschap.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Fase
- Niet toepasbaar
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Brussels, België, 1090
- UZ Brussel
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- PCO(S)-patiënten
- Anti-Mulleriaans hormoon ≥ 3,6 ng/ml
- Aantal basale antrale follikels ≥ 20
- Alle rangen van beproeving
Uitsluitingscriteria:
- Chirurgisch verkregen spermamonster
- Graad 3 of 4 endometriose, kleine of grote baarmoederafwijkingen
- Pre-implantatie genetische testen
- Priming met letrozol
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Primair doel: Behandeling
- Toewijzing: Gerandomiseerd
- Interventioneel model: Parallelle opdracht
- Masker: Enkel
Wapens en interventies
Deelnemersgroep / Arm |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Experimenteel: CAPA IVM
CAPA IVM is een 2-staps in vitro rijpingssysteem waarin een extra kweekstap, waarin de oöcyten gedurende 22-24 uur in meiotische stilstand worden gehouden door de aanwezigheid van het C-type natriuretisch peptide (CNP), voorafgaat aan de vitro rijpingsstap waarin het rijpingsmedium wordt aangevuld met amphiregulin (AREG).
Als basismedium wordt het 'IVM Systeem' van Medicult-Origio gebruikt.
|
CAPA-medium houdt eicellen 22-24 uur in meiotische arrestatie. Met IVM-medium kunnen eicellen de meiose hervatten. CAPA-medium: 10% humaan serumalbumine (HSA) + 10nM estradiol (E2) + 25nM CNP + 5ng/ml insuline + 1mIU/ml follikelstimulerend hormoon (FSH) IVM-medium: 10% HSA + 10nM E2 + 5ng/ml insuline + 101mIU/ml FSH + 100ng/ml AREG CNP: peptide dat van nature voorkomt in follikels om meiotische arrestatie te behouden, E2: oestrogeen, versterkt de effecten van CNP, Insuline: basisgroeifactor die wordt gebruikt in celculturen en onderdeel van commercieel verkrijgbaar LAG-medium van de standaard IVM systeem, AREG: stroomafwaartse effector van de LHCG-receptor die meiotische hervatting helpt. HSA, FSH en hCG zijn CE-gelabeld. CAPA IVM-medium is momenteel nog niet beschikbaar als CE-gemarkeerd commercieel beschikbaar medium en moet in eigen huis worden voorbereid. |
|
Geen tussenkomst: Standaard IVM
De IVM wordt uitgevoerd als een eenstapsprotocol waarbij oöcyten onmiddellijk gedurende 30 uur worden blootgesteld aan in vitro rijpingsmedium.
Dit is de huidige standaardprocedure in de klinische praktijk waarbij gebruik wordt gemaakt van het in de handel verkrijgbare 'IVM-systeem' van Medicult-Origio.
Standaard IVM-medium: 10% HSA + 75mIU/ml FSH + 100mIU/ml hCG
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
eicel rijping
Tijdsspanne: eicelrijping wordt beoordeeld na 30 uur in het standaard IVM-protocol en na 54 uur na CAPA IVM
|
het vermogen van de eicel om het eerste poollichaampje te extruderen
|
eicelrijping wordt beoordeeld na 30 uur in het standaard IVM-protocol en na 54 uur na CAPA IVM
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
bezettingsgraad
Tijdsspanne: bezettingsgraad wordt 3 dagen na ICSI vastgesteld
|
de embryo's van voldoende kwaliteit om te worden verglaasd voor een uitgestelde embryotransfer
|
bezettingsgraad wordt 3 dagen na ICSI vastgesteld
|
|
Bevruchting tarief
Tijdsspanne: De aanwezigheid van 2 pronuclei wordt tussen 18-20 uur na ICSI beoordeeld
|
het vermogen van de eicel om geactiveerd te worden en pronuclei te vormen
|
De aanwezigheid van 2 pronuclei wordt tussen 18-20 uur na ICSI beoordeeld
|
|
morfologische parameters die de kwaliteit van het embryo per bevruchte eicel beschrijven
Tijdsspanne: De beoordeling van de embryo-ontwikkeling wordt 3 dagen na ICSI uitgevoerd
|
embryo-ontwikkelingspotentieel zoals geschat door morfologische kenmerken: embryo's met 6 cellen of meer, minder dan 20% fragmentatie, celgrootte volgens het delingspatroon en de afwezigheid van meerkernige blastomeren worden beschouwd als embryo's van goede kwaliteit.
Als secundaire parameters zal de aanwezigheid van vacuolen of granulatie in de meeste blastomeren het embryo uitsluiten van de groep 'goede kwaliteit', ongeacht de eerder genoemde parameters.
|
De beoordeling van de embryo-ontwikkeling wordt 3 dagen na ICSI uitgevoerd
|
|
embryo cryotolerantie
Tijdsspanne: De eerste opwarming vindt plaats binnen een maand na OPU in een nieuwe HRT-cyclus en wordt herhaald tot de zwangerschap tot 1 jaar na het ophalen van de eicellen.
|
de schade veroorzaakt door het vitrificatie- en opwarmingsproces aan de celoverleving in het embryo en het vermogen van het verglaasde/verwarmde embryo om de splitsingsdelingen te hervatten
|
De eerste opwarming vindt plaats binnen een maand na OPU in een nieuwe HRT-cyclus en wordt herhaald tot de zwangerschap tot 1 jaar na het ophalen van de eicellen.
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Hoofdonderzoeker: Michel De Vos, MD, PhD, VUB- UZ Brussel
Publicaties en nuttige links
Algemene publicaties
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Romero S, Lolicato F, Sanchez F, Van Ranst H, Krueger F, Segonds-Pichon A, De Vos M, Andrews S, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. DNA methylation and mRNA expression of imprinted genes in blastocysts derived from an improved in vitro maturation method for oocytes from small antral follicles in polycystic ovary syndrome patients. Hum Reprod. 2019 Sep 29;34(9):1640-1649. doi: 10.1093/humrep/dez121.
- Romero S, Sanchez F, Lolicato F, Van Ranst H, Smitz J. Immature Oocytes from Unprimed Juvenile Mice Become a Valuable Source for Embryo Production When Using C-Type Natriuretic Peptide as Essential Component of Culture Medium. Biol Reprod. 2016 Sep;95(3):64. doi: 10.1095/biolreprod.116.139808. Epub 2016 Aug 3.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Geschat)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Andere studie-ID-nummers
- 2020-CAPA-IVM-Sibling
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
product vervaardigd in en geëxporteerd uit de V.S.
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .