新型两步 IVM 系统中的胚胎发育潜能 (CAPA-IVM-Sib)
试验研究与标准 IVM 相比,包括预成熟培养步骤(“获能步骤”)在内的卵母细胞双相体外卵母细胞成熟 (IVM) 后获得的胚胎的发育潜力。
体外成熟是日常 ART 诊所中 PCO(S) 患者的有效选择,但成熟和胚胎发育尚未达到标准 COS 治疗获得的效率水平。 为了进一步提高 IVM 后的胚胎质量,假设在 IVM 开始之前保持卵母细胞和卵丘细胞之间的连接和通讯完整,以进行长时间的预成熟培养。 这已经使用减数分裂阻断剂 C 型钠尿肽 (CNP) 进行了调查和确定。
CNP 肽在生长的卵泡中以高浓度存在,由壁颗粒细胞室产生,并与卵丘细胞中存在的利钠肽受体 2 (NRP2) 结合。 CNP 与 NRP2 的结合导致卵丘细胞中的细胞内 cGMP 增加,其通过跨带投射到达卵母细胞。 在卵母细胞中,cGMP 会阻止减数分裂的恢复。
使用 CNP 作为减数分裂的天然抑制剂,设计了一种新培养基,允许卵母细胞和周围的卵丘细胞进行交流,从而获得额外培养期的能力:成熟前阶段或获能阶段 (CAPA)。 该系统在小鼠中开发,在 UZ Brussel 的人体中根据研究材料进行测试(toelating federaal EC:CFE-FCE ADV_073_ZUBrussel,toelating lokaal EC:2016/411 BUN 143201630723)并在越南用于临床环境。
研究概览
详细说明
目前在临床上使用的 IVM 系统采用单步方法,与使用双相 CAPA-IVM 系统的研究和文献发现相比,在成熟方面似乎效率较低。
为了确定双相 CAPA-IVM 系统的效率,标准 IVM 和 CAPA-IVM 都将在同胞卵母细胞上进行:研究者中心标准 IVM 的成熟度平均为 47.5%,而文献中 CAPA-IVM 的成熟度达到 62% .
研究人员旨在证明 CAPA-IVM 系统在成熟度方面的优越性。 还将比较受精和胚胎发育。
参与研究的参与者将接受针对参与者部分卵母细胞的标准 IVM 治疗和针对参与者第二部分卵母细胞的双相 CAPA IVM 系统。
在一个卵巢中,将对分配给标准 IVM 处理的卵母细胞进行常规取卵 (OPU),在另一个卵巢中,将应用 CAPA IVM 系统。 这意味着从卵泡环境中释放出来的卵母细胞需要立即暴露于抑制性 CNP 肽,因此从穿刺的卵泡中收集卵泡液的管子预先填充了 CNP 补充培养基。 OPU 程序对于两个卵巢都是相同的,并且根据我们的标准 OPU IVM 程序,唯一的区别是使用空管或预装管来收集卵泡液。
来自 2 个卵巢的卵母细胞根据指定协议在实验室中单独处理。
卵母细胞 IVM 后,成熟卵母细胞与伴侣的精子或供体精子一起接受 ICSI。 合作伙伴的精子样本最迟将在取卵当天冷冻,并在胞浆内单精子注射 (ICSI) 当天解冻:由于使用了 2 种不同的 IVM 方案和 2 种不同的时间线(30 小时成熟与 24 小时以上) 30 小时成熟),ICSI 将连续两天进行,每天使用新鲜解冻的精子细管。
胚胎发育一直持续到 ICSI 后第 3 天(卵裂期)。 所有质量足够的胚胎都将被玻璃化,以便在激素替代疗法 (HRT) 周期中进行延迟胚胎移植。 将根据形态学质量评估参数选择一个胚胎进行胚胎移植,质量较好的胚胎作为移植的首选,与前面的IVM方法无关。 重复冷冻单胚胎移植周期直至怀孕。
研究类型
注册 (实际的)
阶段
- 不适用
联系人和位置
学习地点
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Brussels、比利时、1090
- UZ Brussel
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参与标准
资格标准
适合学习的年龄
接受健康志愿者
描述
纳入标准:
- PCO(S) 患者
- 抗苗勒管激素 ≥ 3.6 ng/mL
- 基底窦卵泡数 ≥ 20
- 所有级别的试炼
排除标准:
- 手术获得的精液样本
- 3 级或 4 级子宫内膜异位症、轻微或主要子宫异常
- 植入前基因检测
- 用来曲唑预充
学习计划
研究是如何设计的?
设计细节
- 主要用途:治疗
- 分配:随机化
- 介入模型:并行分配
- 屏蔽:单身的
武器和干预
参与者组/臂 |
干预/治疗 |
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实验性的:CAPA IVM
CAPA IVM 是一个 2 步体外成熟系统,其中一个额外的培养步骤,在 C 型钠尿肽 (CNP) 存在下卵母细胞减数分裂停滞 22-24 小时,在体外成熟步骤,其中成熟培养基补充有双调蛋白 (AREG)。
Medicult-Origio 的“IVM 系统”用作基础培养基。
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CAPA 培养基使卵母细胞减数分裂停滞 22-24 小时。 IVM 培养基允许卵母细胞恢复减数分裂。 CAPA 培养基:10% 人血清白蛋白 (HSA) + 10nM 雌二醇 (E2) + 25nM CNP + 5ng/ml 胰岛素 + 1mIU/ml 促卵泡激素 (FSH) IVM 培养基:10% HSA + 10nM E2 + 5ng/ml 胰岛素 + 101mIU/ml FSH + 100ng/ml AREG CNP:天然存在于卵泡中以维持减数分裂停滞的肽,E2:雌激素,增强 CNP 的作用,胰岛素:用于细胞培养的基本生长因子和标准 IVM 的市售 LAG 培养基成分系统,AREG:LHCG 受体的下游效应子,有助于减数分裂恢复。 HSA、FSH 和 hCG 均带有 CE 标签。 CAPA IVM 培养基目前尚未作为 CE 标记的商用培养基提供,需要在内部制备。 |
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无干预:标准IVM
IVM 作为单步协议执行,其中卵母细胞立即暴露于体外成熟培养基 30 小时。
这是临床实践中使用 Medicult-Origio 市售“IVM 系统”的当前标准程序。
标准 IVM 培养基:10% HSA + 75mIU/ml FSH + 100mIU/ml hCG
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研究衡量的是什么?
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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卵母细胞成熟
大体时间:在标准 IVM 方案中 30 小时后和 CAPA IVM 后 54 小时后评估卵母细胞成熟
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卵母细胞排出第一极体的能力
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在标准 IVM 方案中 30 小时后和 CAPA IVM 后 54 小时后评估卵母细胞成熟
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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利用率
大体时间:利用率将在 ICSI 后 3 天确定
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足够质量的胚胎可以玻璃化以进行延迟胚胎移植
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利用率将在 ICSI 后 3 天确定
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受精率
大体时间:ICSI 后 18-20 小时评估是否存在 2 个原核
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卵母细胞被激活并形成原核的能力
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ICSI 后 18-20 小时评估是否存在 2 个原核
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描述每个受精卵母细胞胚胎质量的形态学参数
大体时间:胚胎发育评估在 ICSI 后 3 天进行
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通过形态学特征估计的胚胎发育潜力:具有 6 个或更多细胞、少于 20% 的碎片、根据分裂模式确定的细胞大小和不存在多核卵裂球的胚胎被认为是优质胚胎。
作为次要参数,无论前面提到的参数如何,大多数卵裂球中液泡或肉芽的存在都会将胚胎排除在“优质”组之外。
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胚胎发育评估在 ICSI 后 3 天进行
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胚胎低温耐受性
大体时间:在新的 HRT 周期中的 OPU 后一个月内进行第一次加温,并重复直到怀孕直至取卵后 1 年。
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玻璃化和加热过程对胚胎内细胞存活的损害以及玻璃化/加热胚胎恢复卵裂分裂的能力
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在新的 HRT 周期中的 OPU 后一个月内进行第一次加温,并重复直到怀孕直至取卵后 1 年。
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合作者和调查者
调查人员
- 首席研究员:Michel De Vos, MD, PhD、VUB- UZ Brussel
出版物和有用的链接
一般刊物
- Sanchez F, Le AH, Ho VNA, Romero S, Van Ranst H, De Vos M, Gilchrist RB, Ho TM, Vuong LN, Smitz J. Biphasic in vitro maturation (CAPA-IVM) specifically improves the developmental capacity of oocytes from small antral follicles. J Assist Reprod Genet. 2019 Oct;36(10):2135-2144. doi: 10.1007/s10815-019-01551-5. Epub 2019 Aug 9.
- Vuong LN, Le AH, Ho VNA, Pham TD, Sanchez F, Romero S, De Vos M, Ho TM, Gilchrist RB, Smitz J. Live births after oocyte in vitro maturation with a prematuration step in women with polycystic ovary syndrome. J Assist Reprod Genet. 2020 Feb;37(2):347-357. doi: 10.1007/s10815-019-01677-6. Epub 2020 Jan 4.
- Saenz-de-Juano MD, Ivanova E, Romero S, Lolicato F, Sanchez F, Van Ranst H, Krueger F, Segonds-Pichon A, De Vos M, Andrews S, Smitz J, Kelsey G, Anckaert E. DNA methylation and mRNA expression of imprinted genes in blastocysts derived from an improved in vitro maturation method for oocytes from small antral follicles in polycystic ovary syndrome patients. Hum Reprod. 2019 Sep 29;34(9):1640-1649. doi: 10.1093/humrep/dez121.
- Romero S, Sanchez F, Lolicato F, Van Ranst H, Smitz J. Immature Oocytes from Unprimed Juvenile Mice Become a Valuable Source for Embryo Production When Using C-Type Natriuretic Peptide as Essential Component of Culture Medium. Biol Reprod. 2016 Sep;95(3):64. doi: 10.1095/biolreprod.116.139808. Epub 2016 Aug 3.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
研究记录日期
研究主要日期
学习开始 (实际的)
初级完成 (实际的)
研究完成 (实际的)
研究注册日期
首次提交
首先提交符合 QC 标准的
首次发布 (实际的)
研究记录更新
最后更新发布 (估计的)
上次提交的符合 QC 标准的更新
最后验证
更多信息
与本研究相关的术语
其他研究编号
- 2020-CAPA-IVM-Sibling
计划个人参与者数据 (IPD)
计划共享个人参与者数据 (IPD)?
药物和器械信息、研究文件
研究美国 FDA 监管的药品
研究美国 FDA 监管的设备产品
在美国制造并从美国出口的产品
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