初期インフルエンザワクチンと後期インフルエンザワクチンの有効性についての理解を広げる (BELIEVE)

採用、選考および適格性評価

参加希望者（レスターNHSトラスト大学病院、UHLスタッフ）には、研究の宣伝と説明のために電子メールで連絡されます。 この電子メールは、UHL スタッフに予防接種を受けるよう促すために毎年送信される定期的な季節性インフルエンザ予防接種電子メールの一部となります。 さらに、捜査官は、職員の往来が多いエリア（例: 警察署）にポスターで宣伝します。レストランと私たちの労働衛生チームがこの研究の宣伝を支援します。 研究者らは、一部の医療従事者（HCW）が口コミを通じてこの研究を知るようになるだろうと予想している。

この調査には 2 つの段階で採用が行われます。 「早期」ワクチン接種グループの場合は 9 月、「後期」ワクチン接種グループの場合は 11 月中旬から 12 月中旬 - 正確な時期は、不活化インフルエンザ ワクチンの接種時期とウイルスの季節性によって異なる場合があります。 , インフルエンザの流行が始まる前にすべての募集が終了するためです。 2 つのワクチン接種グループへの割り当てはランダム化されません。ワクチン接種を早期に行うか遅らせるかは医療従事者の判断となります。 各グループに採用される医療従事者は 200 名に制限されます。

研究への参加に興味を示した個人には、直接または電子メールで情報シートが提供されます。 これに続いて、研究者は研究に参加するかどうかを決定するために必要な時間を彼らに与えます。 個人が参加に同意した場合、研究チームのメンバーが審査し、資格を確認します。 すべての基準が満たされた場合にのみ参加者が募集されます。 現時点では、LRI のリサーチ スペースでの最初の予約にスタッフが出席するよう手配されます。 研究分野での採用は、UHL で現在実施されている社会的距離措置に準拠します。

この最初の予約では、研究についてグループのスタッフメンバーに説明されます。 その後、研究チームのメンバーは、以下に詳述する書面によるインフォームドコンセントを各医療従事者から個別に求めます。 個人が研究に関してさらに質問がある場合、別の研究チームメンバーがインフォームドコンセントをサポートし促進することが許可されます。

入院患者の募集 急性期病棟の臨床医には、インフルエンザの季節が始まる前に、（インフルエンザ様疾患の）ILI の入院患者を対象とした研究について、電子メールと臨床領域のポスターを通じて通知されます。 レスター大学病院のウイルス科では、インフルエンザの季節には、入院患者のインフルエンザ陽性症例が見つかった場合、定期的に臨床チームに電話をかけます。 その後、臨床チームがこの診断を患者に説明しに行く際には、患者にこの研究について知らせ、参加者向けの情報リーフレットも提供します。 これに続いて、研究者は患者が研究に参加するかどうかを決定するために必要な時間を患者に与えます。 個人が参加に同意した場合、その旨を臨床チームのメンバーに通知し、臨床チームのメンバーが研究チームに通知します。 研究チームのメンバーが病棟に立ち会い、適格性を検査して確認します。 すべての基準が満たされた場合にのみ参加者が募集されます。 検査結果のデータを使用して、インフルエンザ陰性の綿棒検査が確認された入院患者 20 人も同様に対照群として募集されます。

研究訪問

訪問のたびに次のアクティビティが実行され、CRF に記録されます。

訪問 1: ベースライン訪問

• 参加者は、包含基準および除外基準を満たし、十分な情報を提供し、書面による同意を与えた場合に登録されます。
• その後、参加者には研究番号が割り当てられます。
• 参加者は、年齢、性別、民族、職業、合併症、常用薬、喫煙歴、インフルエンザ感染歴、インフルエンザワクチンなどの人口統計情報を含む短いアンケートに回答します。
• ベースライン抗体の免疫前に凝固した血液 10 ml を収集します。 血液を処理し、血清学検査用に血清を保管します。 インフルエンザワクチン接種は通常通り行っております。
• 参加者には、体温計、2 つのインフルエンザ自己サンプリング キット (つまり、綿棒と微生物サンプル バッグを備えたウイルス輸送媒体チューブ)、およびインフルエンザのような病気が発症した場合に記入する 2 つの情報用紙が与えられます ( ILI）。 ILIは、WHOの症例定義に従って、過去10日以内に発症した37.8℃を超える発熱と咳として定義されます。 生徒は、体温計の操作方法、自己綿棒 (つまり喉の綿棒) の採取方法、綿棒をサンプリング チューブに固定する方法を説明します。 また、ILI イベントフォーム (ILIef) に記入する方法も説明します。これは、ILI の症状/兆候のタイミングと性質を簡単に記録するものです。

訪問 2: ベースライン訪問から 3 週間後 (+ または - 7 日)

• 血清学のために凝固した血液を 10ml 採取します。 血液を処理して血清を保管します。
• 参加者は呼気サンプルの提供を求められます。これは、ILI 中に発生したどの呼気サンプルと比較する対照として機能します。 訪問 3: インフルエンザのピークシーズンは通常 1 月から 2 月 (+ または - 30 日)
• 血清学のために凝固した血液を 10ml 採取します。 血液を処理して血清を保管します。 訪問 4: インフルエンザシーズンの終わり 通常 4 月から 5 月 (+ または - 30 日)
• 血清学のために凝固した血液を 10ml 採取します。 血液を処理して血清を保管します。 ILI イベント研究訪問 研究参加者は電子メールまたは電話で研究チームに連絡し、ILI イベントが発生したことを警告し、発生後できるだけ早く研究チームのメンバーが綿棒と ILIef を回収できるように手配します。テストするまで適切な保管（-80℃の冷凍庫）に保管してください。 研究参加者がILIを発症したときに自宅にいる場合は、自己綿棒とILefを完了するように求められます。 綿棒は二重の袋に詰められ、新型コロナウイルス感染症に関する政府のガイダンス「UN3373、梱包指示650に準拠した研究室でのサンプルの安全な取り扱いと処理」で発行された輸送ガイダンスに従って、研究チームのメンバーによって収集されます。 綿棒は UHL ウイルス研究所に届けられ、標準的な操作手順に従って処理されます (セクション 8.7.1 を参照)。

これらの綿棒の結果は、最新の労働衛生アドバイスとともに電子メールで送信され、電話で連絡されることを研究参加者に繰り返し伝えます。 彼らは、綿棒検査の結果を待っている間、ILI の労働衛生方針に従い、通常の方法で病気を報告し、現在の病気の期間についてさらなる医学的アドバイスが必要な場合はかかりつけ医に連絡するようアドバイスされます。

ILIef の内容は参加者の症例報告フォーム (CRF) に入力されますが、個人情報は含まれません。 これらの詳細は、WHO メルボルンで実施されるウイルス配列決定と抗体力価の解釈に使用されます。

研究参加者がILIを発症したときに仕事中にいる場合、仕事を離れる前に新しい方法を使用してインフルエンザを検出するための呼気サンプルとマスクサンプルを提供するよう求められます。 サンプリング物質は医療従事者がいる場所に持ち込まれますが、これがすぐに実行できない場合は、医療従事者は労働衛生上のアドバイスに従って帰宅するよう指示されます。 これらのプロセスで収集された検体については、セクション 8.7 で詳しく説明します。

入院患者の呼気サンプル 入院患者には、通常の UHL 感染制御ポリシーに従ってアプローチされます。 最近の喉ぬぐい液で一般的な呼吸器病原体を検査した結果が入手可能な患者のみが受診されます。 新型コロナウイルス感染症陽性病棟は募集に関与せず、代わりにインフルエンザやその他の呼吸器ウイルスに感染した入院患者は新型コロナウイルス感染症陰性病棟から募集される。 インフルエンザ陽性と確認された患者は通常、方針に従って別室で管理されます。 いずれの場合も、呼気捕捉プロセスと分析プロセスは分離されているため、患者が分析装置に接触する必要はありません。 フェイスマスクによる酸素療法が必要な患者にはマスクサンプリングは行われません。 研究に同意すると、研究チームのメンバーの1人が呼気サンプル採取に必要なマスク、注射器、マウスピースを持って患者に近づく。 新しい診断方法と現在の診療とを正確に比較できるように、この時点で再度喉のスワブも採取されます。 可能であれば、3 つの呼気サンプリング方法すべてが使用されます。 サンプルが収集されると、生物学的危険性バッグに入れられ、分析機械に運ばれます。 綿棒とマスクのサンプルは、処理のためにレスター王立診療所のウイルス学研究室に輸送されます。 呼気捕捉装置 (注射器および使い捨てマウスピース) は、臨床廃棄物として通常の方法で廃棄されます。 TD チューブと Bio-VOC サンプラーは二重袋に入れられ、除染されます。 これは入院患者に必要な唯一の研究訪問であり、それ以上のフォローアップは必要ありません。

自己綿棒 綿棒はレスター NHS トラスト大学病院の臨床微生物部門に届けられ、そこでカテゴリー 2 (BSL-2) 条件下で取り扱われます。 それらをボルテックスし、接種されたウイルス輸送培地（VTM）を残してスワブを廃棄します。 VTM チューブは、標準的な診断検査 (入院患者の検査に日常的に使用されている) で検査され、インフルエンザの有無が検査されます (さまざまな呼吸器ウイルスが「インフルエンザ様疾患」を引き起こす可能性があるため)。 インフルエンザが検出された場合、インフルエンザのウイルス配列決定のために、この VTM のアリコートが血清サンプルとともに WHO メルボルンに送られます。 VTM は UN3733/カテゴリー B 規制に基づいて WHO 研究所に輸送されます。

VOC 呼気分析 3 つの分析プラットフォームはすべて、同じ基本的な収集アプローチを使用します。 参加者には、呼気サンプリングの少なくとも 30 分前には何も食べたり飲んだりしないよう求められます。 サンプリングの前に、口を水でふくらませてから飲み込みます。その後、使い捨てマウスピースに 3 ～ 5 秒間吐き出すことにより、強制的でない呼気サンプルを 3 つ採取します。 研究者は、鼻腔および口腔綿棒を採取する際に、UHL の地域の信頼ポリシーによって規定された PPE を着用します。 すべての処置には使い捨ての臨床用手袋が使用されます。 分析装置は病棟または患者との直接接触から離れた研究エリアに保管されます。

GC-IMS 分析の場合、マウスピースは長さ 10 cm のプラスチック チューブに取り付けられます。 患者がチューブ内に息を吐き出すと、研究者はチューブの途中で呼気サンプルを 5ml シリンジに吸い込みます。

その後、研究者によってサンプルがシリンジから分析のために BreathSpecTM GC-IMS デバイスに注入されます。 サンプル内に含まれる感染性物質は、分析プロセスの一環として 60°C 以上に加熱することで破壊されます。

eNose は、市販の CE マーク付き呼気捕捉ユニットである Markes Bio-VOC を使用しています。 このユニットは 129 ml の呼気を保持でき、密封された状態で提供され、使用する準備ができたときにのみ開封され、使い捨てです。 ユーザーはサンプリングの前に、ボール紙のマウスピースをユニットに取り付けます。 患者がユニットに息を吹き込むと、マウスピースが取り外され、eNose に接続されるシリンジフィッティングが追加されます。 次に、シリンジが押し下げられ、サンプルが分析されます。 分析時間は 5 分未満です。 eNose マシンは、メーカーのガイドラインに従って毎日の使用終了時に除染されます。

GC-MS 分析では、上記と同様に Markes Bio-VOC ユニットを使用してさらに呼気サンプルが収集されます。 サンプルが収集されると、熱脱着 (TD) チューブ (通常 89 mm x 6.4 mm) に移されます。 チューブの内壁は吸収層でコーティングされており、呼気の化学物質が付着します。 TD チューブは Bio-VOC ユニットの端に配置され、捕捉された空気がチューブを通して押し出されます。 完成したら、チューブの端はエンドキャップで密閉されます。 その後、バイオ VOC サンプラーと TD チューブに対して、ウイルスを確実に死滅させるための長時間/高熱サイクルによる検証済みの除染プロセスが実行されます。 除染された TD チューブは、事前に定められた物質移転契約に従って、分析と最終処分のためにウォリック大学に輸送されるために、レスター王立診療所の研究エリアの保管ボックスに保管されます。

GC-IMS 分析の結果は、BreathSpecTM から DataSync 共有ドライブに定期的にアップロードされ、ウォリック大学の分析者によってダウンロードされます。 このデータには識別可能なデータは関連付けられず、研究番号のみが関連付けられます。

マスクサンプリング マスクサンプリングは、参加者が研究チームのメンバーによって観察されながら、最大 5 つの 3D プリントされたポリビニルアルコール (PVA) ストリップを含む改良型フェイスマスク (フラットサージカルマスク、カモノハシマスク、または FFP1) を最長 60 分間着用することで構成されます。 研究者は、サンプルを入手する研究スタッフにトレーニング、サポート、個人用保護具を提供し、現地での処理に関するプロトコルに同意します。 使用前にマスクは滅菌され、密封されたサンプルバッグに保管され、着用後はこれらのバッグに戻されて密封されます。 これらは、危険物の輸送に関する現在のリスク評価および標準作業手順に従って、UHL ウイルス研究所に輸送されます。 リアルタイム定量的 PCR を使用して、マスク内の PVA ストリップからウイルス RNA が抽出および定量化されます。 PVA ストリップの処理には、PVA ストリップを水に溶解する必要があり、そこから RNA ウイルスが抽出され、分子法を使用して分析されます。 マスクやバッグは破棄されます。

血清検査とウイルス配列決定 血清サンプルが必要な予定日ごとに、凝固した血液は 2℃～8℃で保管され、LRI のリサーチ スペースで 24 時間以内に遠心分離されます。 血清は凍結バイアルに保管され、すべての凍結バイアルには参加者の研究番号、訪問番号、LRI のリサーチ スペースでの収集日がラベル付けされます。 サンプルは出荷まで-80℃で冷凍保存されます。 すべてのサンプルが収集されたら、1 セットの凍結バイアルがメルボルンの WHO 基準研究所に送られます。 もう 1 セットのクライオバイアルは、輸送上の問題に備えて安全対策として保管されます。 参加者の同意があれば、未使用の血清サンプルは将来の倫理的に承認された研究のために保管され、将来の研究のために英国内外の他の学術機関の他の研究協力者や業界パートナーと共有されます。 血清は赤血球凝集阻害および微量中和アッセイに使用され、すべてのサンプルが処理されると結果がレスターの研究チームに返送されます。

血球凝集抑制（HAI）および微量中和（MN）アッセイは、インフルエンザウイルスの配列決定とともに、WHO インフルエンザ参考研究協力センター（VIDRL）、ピーター・ドハティ感染免疫研究所、792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC で実施されます。 3000年、オーストラリア。