초기 대 후기 인플루엔자 백신 효과에 대한 이해 넓히기 (BELIEVE)

모집, 심사 및 적격성 평가

잠재적 참가자(University Hospitals of Leicester NHS Trust, UHL 직원)는 연구를 광고하고 설명하기 위해 이메일로 연락을 받을 것입니다. 이메일은 UHL 직원에게 예방접종을 상기시키기 위해 매년 발송되는 일상적인 계절 인플루엔자 예방접종 이메일의 일부가 될 것입니다. 또한 조사관은 직원 이동이 많은 구역(예: 식당과 직업 건강 팀이 이 연구 광고를 지원할 것입니다. 조사관은 일부 의료 종사자(HCW)가 입소문을 통해 연구에 대해 알게 되기를 기대합니다.

이 연구에는 두 단계의 모집이 있습니다. '조기' 접종군은 9월, '후기' 접종군은 11월 중순~12월 중순 - 정확한 시기는 비활성화 인플루엔자 백신 접종 시기와 바이러스의 계절에 따라 달라질 수 있음 , 인플루엔자 시즌이 시작되기 전에 모든 모집이 완료되기 때문입니다. 두 백신 접종 그룹에 대한 할당은 무작위로 이루어지지 않습니다. 백신 접종을 일찍 또는 늦게 받고 싶은지는 HCW가 결정합니다. 각 그룹에 모집되는 HCW는 200명으로 제한됩니다.

연구 참여에 관심이 있는 개인에게는 직접 또는 이메일을 통해 정보 시트가 제공됩니다. 그 후 조사관은 연구 참여 여부를 결정하는 데 필요한 시간을 제공합니다. 개인이 참여에 동의하면 연구팀 구성원이 자격을 심사하고 확인합니다. 모든 기준을 충족하는 경우에만 참가자를 모집합니다. 이때 직원이 LRI의 연구 공간에서 초기 약속에 참석할 수 있도록 준비할 것입니다. 연구 분야의 모집은 UHL에서 시행 중인 현재 사회적 거리두기 조치를 준수합니다.

이 초기 약속에서 연구는 그룹의 직원들에게 설명됩니다. 그런 다음 연구팀의 구성원은 각 HCW로부터 개별적으로 아래에 설명된 대로 서면 동의를 구합니다. 개인이 연구에 대해 더 많은 질문이 있는 경우 다른 연구 팀원이 정보에 입각한 동의를 지원하고 촉진할 수 있습니다.

입원 환자 모집 급성 의료 병동의 임상의는 인플루엔자 시즌이 시작되기 전에 이메일과 포스터를 통해 임상 영역에서 ILI(인플루엔자 유사 질병) 입원 환자와 관련된 연구에 대해 통보를 받습니다. University Hospitals of Leicester Virology 부서는 인플루엔자 시즌 동안 입원 환자의 인플루엔자 양성 사례 임상 팀을 정기적으로 호출합니다. 그런 다음 임상 팀이 환자에게 이 진단을 설명할 때 연구에 대해 알리고 참가자 정보 전단지를 제공합니다. 그 후 조사관은 환자가 연구 참여 여부를 결정하는 데 필요한 시간을 환자에게 줄 것입니다. 개인이 참여에 동의하면 임상 팀원에게 알리고 임상 팀원은 연구팀에 알립니다. 연구팀의 구성원이 병동에 참석하여 적격성을 선별하고 확인합니다. 모든 기준을 충족하는 경우에만 참가자를 모집합니다. 실험실 결과 데이터를 사용하여 인플루엔자 음성 면봉으로 확인된 20명의 입원 환자도 동일한 방식으로 대조군으로 모집됩니다.

연구 방문

방문할 때마다 다음 활동이 수행되고 CRF에 기록됩니다.

방문 1: 기준선 방문

• 참가자는 포함 및 제외 기준을 충족하고 완전한 정보에 입각한 서면 동의를 제공하는 경우 등록됩니다.
• 그러면 참가자에게 연구 번호가 할당됩니다.
• 참가자는 연령, 성별, 민족, 직업 역할, 의학적 동반 질환, 일반 약물, 흡연 이력, 인플루엔자 감염 이력 및 인플루엔자 백신과 같은 인구 통계학적 정보를 포함하는 간단한 설문지를 작성합니다.
• 베이스라인 항체를 위해 10ml의 응고된 혈액 사전 면역화를 수집합니다. 혈청 검사를 위해 혈액을 처리하고 혈청을 저장합니다. 인플루엔자 백신은 정상적인 방법으로 투여됩니다.
• 참가자에게는 온도계, 인플루엔자 자체 샘플링 키트 2개(예: 면봉, 미생물 샘플 백이 포함된 바이러스 수송 매체 튜브), 인플루엔자 유사 질병이 발생할 경우 작성해야 하는 정보 양식 2개가 제공됩니다. 일리). ILI는 지난 10일 이내에 발병한 >37.8oC의 열과 기침으로 WHO 사례 정의에 따라 정의됩니다. 그들은 체온계 작동 방법, 자가 면봉(예: 인후 면봉) 채취 방법 및 면봉을 샘플링 튜브에 고정하는 방법을 보여줍니다. 또한 ILI 증상/징후의 시기와 특성을 간략하게 기록하는 ILI 이벤트 양식(ILIef)을 작성하는 방법도 보여줍니다.

방문 2: 기준선 방문 후 3주(+ 또는 - 7일)

• 혈청학을 위해 응고된 혈액 10ml를 수집합니다. 혈액을 처리하고 혈청을 보관하십시오.
• 참가자는 호흡 샘플을 제공하도록 요청받게 되며, 이는 ILI 동안 발생한 호흡 샘플을 비교하는 제어 역할을 합니다. 방문 3: 일반적으로 1월에서 2월까지(+ 또는 - 30일) 인플루엔자 피크 시즌
• 혈청학을 위해 응고된 혈액 10ml를 수집합니다. 혈액을 처리하고 혈청을 보관하십시오. 방문 4: 인플루엔자 시즌 종료(보통 4월~5월)(+ 또는 - 30일)
• 혈청학을 위해 응고된 혈액 10ml를 수집합니다. 혈액을 처리하고 혈청을 보관하십시오. ILI 이벤트 연구 방문 연구 참가자는 이메일이나 전화로 연구 팀에 연락하여 ILI 이벤트가 발생했음을 알리고 연구 팀원이 면봉과 ILIef를 수집한 후 최대한 빨리 준비하도록 합니다. 테스트 전까지 적절한 보관(-80oC 냉동고)을 위해 복용합니다. 연구 참가자가 ILI를 개발할 때 집에 있는 경우 자가 면봉과 ILef를 작성하라는 요청을 받게 됩니다. 면봉은 COVID-19에 대한 정부 지침: UN3373, 포장 지침 650에 따라 실험실에서 샘플의 안전한 취급 및 처리에 발행된 운송 지침에 따라 연구팀 구성원이 이중으로 포장하고 수집합니다. 면봉은 UHL 바이러스 실험실로 전달되고 표준 운영 절차에 따라 처리됩니다(섹션 8.7.1 참조).

이 면봉 결과의 결과가 최신 산업 건강 조언과 함께 이메일 및 전화로 연구 참여자에게 반복적으로 전달될 것입니다. 그들은 면봉 결과를 기다리는 동안 ILI에 대한 직업 건강 정책을 따르고 정상적인 방법으로 질병을 보고하고 현재 질병 기간에 대한 추가 의학적 조언이 필요한 경우 GP에게 연락하도록 조언받을 것입니다.

ILIef의 내용은 참가자 사례 보고서 양식(CRF)에 입력되며 개인 정보는 포함되지 않습니다. 이러한 세부 사항은 WHO 멜버른에서 수행되는 바이러스 시퀀싱 및 항체 역가의 해석에 사용될 것입니다.

연구 참가자가 ILI를 개발할 때 직장에 있는 경우 그들은 퇴근하기 전에 새로운 방법을 사용하여 인플루엔자 감지를 위한 호흡 샘플과 마스크 샘플을 제공하도록 요청받을 것입니다. 샘플링 재료는 HCW가 있는 곳으로 가져가지만 이것이 바로 이루어질 수 없는 경우 HCW는 직업 건강 조언을 따르고 집으로 가도록 지시받습니다. 이러한 과정에서 수집된 표본은 섹션 8.7에 자세히 설명되어 있습니다.

입원 환자 호흡 샘플 입원 환자는 일반적인 UHL 감염 통제 정책에 따라 접근합니다. 일반적인 호흡기 병원체에 대한 최근 인후 면봉 검사 결과가 있는 환자에게만 접근합니다. COVID-19 양성 병동은 모집에 참여하지 않고 인플루엔자 및 기타 호흡기 바이러스 입원 환자는 COVID-19 음성 병동에서 모집합니다. 인플루엔자 양성 판정을 받은 환자는 정책에 따라 보통 옆방에서 관리한다. 모든 경우에 환자는 호흡 포착과 분석 프로세스가 분리되어 있기 때문에 분석 장비와 접촉할 필요가 없습니다. 안면 마스크를 통한 산소 요법이 필요한 환자에게는 마스크 샘플링이 수행되지 않습니다. 연구에 동의하면 연구팀의 한 구성원이 호흡 샘플 수집에 필요한 마스크, 주사기 및 마우스피스를 가지고 환자에게 접근할 것입니다. 새로운 진단 방법과 현재의 진료 사이에 정확한 비교가 이루어질 수 있도록 이 때 반복 인후 면봉도 채취됩니다. 가능한 경우 세 가지 호흡 샘플링 방법을 모두 사용합니다. 샘플이 수집되면 생물학적 위험 가방에 넣어 분석 기계로 가져갑니다. 면봉과 마스크 샘플은 처리를 위해 Leicester Royal Infirmary의 바이러스 연구소로 이송됩니다. 호흡 포착 장비(주사기 및 일회용 마우스 피스)는 일반적인 임상 폐기물 처리 방법에 따라 폐기됩니다. TD 튜브와 Bio-VOC 샘플러는 이중 포장되어 오염 제거됩니다. 이것은 입원 환자에게 필요한 유일한 연구 방문이며 추가 후속 조치가 필요하지 않습니다.

자가 면봉 면봉 면봉은 Leicester NHS Trust 대학 병원의 임상 미생물학과로 전달되어 Cat 2(BSL-2) 조건에서 처리됩니다. 그것들은 와동되고 면봉은 접종된 바이러스 수송 매체(VTM)를 남기고 버려집니다. VTM 튜브는 인플루엔자(많은 다른 호흡기 바이러스가 '인플루엔자 유사 질병'을 일으킬 수 있음)의 존재를 확인하기 위해 표준 진단 분석(병원 환자 테스트에 일상적으로 사용됨)에서 테스트됩니다. 인플루엔자가 감지되면 인플루엔자의 바이러스 시퀀싱을 위해 이 VTM의 분취량을 혈청 샘플과 함께 멜버른 WHO로 보냅니다. VTM은 UN3733/카테고리 B 규정에 따라 WHO 연구소로 이송됩니다.

VOC 호흡 분석 세 가지 분석 플랫폼 모두 동일한 기본 수집 방식을 사용합니다. 참가자는 호흡 샘플링 최소 30분 전에 아무것도 먹거나 마시지 않도록 요청받습니다. 샘플링하기 전에 입으로 물을 삼킨 다음 삼킬 수 있습니다. 그런 다음 3-5초 동안 일회용 마우스피스로 숨을 내쉬어 3개의 비강제 호흡 샘플을 제공합니다. 연구원은 비강 및 구강 면봉 채취를 위해 UHL의 현지 신뢰 정책에 따라 PPE를 착용합니다. 일회용 임상 장갑은 모든 절차에 사용됩니다. 분석 기기는 환자와 직접 접촉하지 않는 병동이나 연구 구역에 보관됩니다.

GC-IMS 분석을 위해 마우스피스는 10cm 길이의 플라스틱 튜브에 부착됩니다. 환자가 튜브로 숨을 내쉴 때 연구원은 튜브 아래 부분에 5ml 주사기로 호흡 샘플을 끌어들입니다.

그런 다음 샘플은 분석을 위해 연구원이 주사기에서 BreathSpecTM GC-IMS 장치로 주입합니다. 샘플에 포함된 감염성 물질은 분석 과정의 일부로 60°C 이상으로 가열되어 파괴됩니다.

eNose는 Markes Bio-VOC라는 상업용 CE 마크 호흡 포획 장치를 사용합니다. 이 장치는 129ml의 숨을 담을 수 있고 밀봉되어 있으며 사용할 준비가 되었을 때만 개봉되며 일회용입니다. 사용자는 샘플링 전에 판지 마우스피스를 장치에 맞춥니다. 환자가 장치로 숨을 쉬면 마우스피스가 제거되고 eNose에 연결되는 주사기 피팅이 추가됩니다. 그런 다음 주사기를 누르고 샘플을 분석합니다. 분석 시간은 5분 미만입니다. eNose 기계는 제조업체의 지침에 따라 매일 사용이 끝날 때 오염을 제거합니다.

GC-MS 분석을 위해 위와 같이 Markes Bio-VOC 장치를 사용하여 추가 호흡 샘플을 다시 수집합니다. 샘플이 수집되면 열탈착(TD) 튜브(일반적으로 89mm x 6.4mm)로 옮겨집니다. 튜브의 내벽은 호흡 화학물질이 부착되는 흡수층으로 코팅되어 있습니다. TD 튜브는 Bio-VOC 장치의 끝에 배치되고 포획된 공기는 튜브를 통해 밀려납니다. 완료되면 튜브의 끝을 엔드 캡으로 밀봉합니다. 그런 다음 Bio-VOC 샘플러와 TD 튜브에 대해 장기/고열 사이클을 통해 검증된 오염 제거 프로세스를 수행하여 바이러스를 확실히 죽입니다. 오염 제거된 TD 튜브는 미리 정의된 물질 이전 계약에 따라 분석 및 최종 폐기를 위해 워릭 대학교로 운반하기 위해 레스터 왕립 병원의 연구 구역에 있는 보관 상자에 보관됩니다.

GC-IMS 분석 결과는 BreathSpecTM에서 DataSync 공유 드라이브로 정기적으로 업로드되고 University of Warwick의 분석가가 다운로드합니다. 식별 가능한 데이터는 이 데이터와 연결되지 않으며 연구 번호만 연결됩니다.

마스크 샘플링 마스크 샘플링은 연구 팀원이 관찰하는 동안 최대 60분 동안 최대 5개의 3D 인쇄된 폴리비닐 알코올(PVA) 스트립이 포함된 수정된 안면 마스크(평평한 수술, 덕빌 또는 FFP1)를 착용한 참가자로 구성됩니다. 조사관은 샘플을 채취하는 연구원에게 교육, 지원 및 개인 보호 장비를 제공하고 현지 처리 프로토콜에 동의합니다. 마스크는 사용하기 전에 멸균되어 밀봉된 샘플 백에 보관되며, 일단 착용하면 이 백에 다시 넣고 밀봉됩니다. 위험 물질 운송에 관한 현재 위험 평가 및 표준 운영 절차에 따라 UHL 바이러스 연구소로 운송됩니다. Real-Time 정량 PCR을 사용하여 마스크 내의 PVA 스트립에서 바이러스 RNA를 추출하고 정량화합니다. PVA 스트립을 처리하려면 물에 용해해야 하며, 여기에서 RNA 바이러스를 추출하고 분자 방법을 사용하여 분석합니다. 마스크와 가방이 파괴됩니다.

혈청 검사 및 바이러스 시퀀싱 혈청 샘플이 필요한 각 예정일에 응고된 혈액은 2oC ~ 8oC에서 보관되고 연구 공간, LRI에서 24시간 이내에 원심분리됩니다. 혈청은 참가자의 연구 번호, 방문 번호 및 연구 공간(LRI)에서 수집한 날짜가 표시된 모든 냉동 바이알과 함께 냉동 바이알에 저장됩니다. 샘플은 선적될 때까지 -80 oC에서 냉동 보관됩니다. 모든 샘플이 수집되면 한 세트의 cryovial이 멜버른의 WHO 참조 실험실로 보내질 것입니다. 다른 cryovial 세트는 운송 문제의 경우 안전 조치로 저장됩니다. 참가자의 동의 하에 미사용 혈청 샘플은 미래의 윤리적으로 승인된 연구를 위해 저장되고 향후 연구를 위해 영국 내외의 다른 학술 기관 및 산업 파트너의 다른 연구 협력자와 공유됩니다. 혈청은 혈구 응집 억제 및 미세 중화 분석에 사용되며 모든 샘플이 처리되면 결과가 Leicester의 연구팀으로 다시 전송됩니다.

혈구응집 억제(HAI) 및 미세중화(MN) 분석은 인플루엔자 바이러스 시퀀싱과 함께 WHO 인플루엔자 참조 및 연구 협력 센터(VIDRL), Peter Doherty Institute for Infection and Immunity, 792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC에서 수행됩니다. 3000, 호주.