Vi breddar vår förståelse av tidig kontra sen influensavaccins effektivitet (BELIEVE)

Rekrytering, screening och behörighetsbedömning

Potentiella deltagare (University Hospitals of Leicester NHS Trust, UHL-personal) kommer att kontaktas via e-post för att annonsera och förklara studien. E-postmeddelandet kommer att vara en del av de rutinmässiga e-postmeddelanden om vaccination mot säsongsinfluensa som skickas ut varje år för att påminna UHL-personal om att vara vaccinerad. Dessutom kommer utredarna att annonsera med affischer i de högt bemannade trafikområdena, t.ex. restaurangen, och vårt arbetshälsoteam kommer att hjälpa till med denna reklam av studien. Utredarna förväntar sig att vissa hälsovårdsarbetare (HCW) ska bli medvetna om studien genom mun till mun.

Studien kommer att ha två rekryteringsfas. För september månad för den "tidiga" vaccinationsgruppen och från mitten av november till mitten av december för den "sena" vaccinationsgruppen - de exakta tidpunkterna kan variera beroende på när de inaktiverade influensavaccinerna tas emot och virusets säsongsvariation , eftersom all rekrytering kommer att slutföras innan influensasäsongen börjar. Tilldelning till de två vaccinationsgrupperna kommer inte att randomiseras; det kommer att vara HCWs beslut om de skulle vilja ha vaccinationen antingen tidigt eller sent. Det kommer att finnas en gräns på 200 HCWs som rekryteras till varje grupp.

Personer som uttrycker intresse för att delta i studien kommer att få ett informationsblad antingen personligen eller via e-post. Efter detta kommer utredarna att ge dem så länge de behöver bestämma sig för om de ska delta i studien eller inte. Om individen samtycker till att delta kommer en medlem av forskargruppen att granska och bekräfta valbarhet. Deltagare kommer endast att rekryteras om alla kriterier är uppfyllda. Vid denna tidpunkt kommer arrangemang att göras för att personalen ska närvara vid ett första möte på forskningsutrymmet vid LRI. Rekryteringen inom forskningsområdet kommer att följa de nuvarande sociala distansåtgärderna vid UHL.

Vid detta första möte kommer studien att förklaras för personalen i grupper. En medlem av forskargruppen kommer sedan att söka skriftligt informerat samtycke enligt nedan från varje HCW individuellt. Om en individ har fler frågor om studien kommer en annan studiegruppsmedlem att få stödja och underlätta informerat samtycke.

Rekrytering av slutenvårdspatienter Kliniker på akutvårdsavdelningarna kommer att meddelas innan influensasäsongen startar via e-post och affischer, inom kliniska områden, om studien som involverar slutenvårdspatienter med (influensaliknande sjukdom) ILI. University Hospitals of Leicester Virology Department ringer rutinmässigt det kliniska teamet av positiva influensafall hos slutenvårdspatienter under influensasäsongen. När det kliniska teamet sedan går för att förklara denna diagnos för patienten skulle de också göra dem medvetna om studien och förse dem med en informationsbroschyr för deltagarna. Efter detta kommer utredarna att ge patienten så länge de behöver besluta om de ska delta i studien eller inte. Om individen går med på att delta kommer de att informera en medlem av det kliniska teamet som sedan kommer att meddela forskarteamet. En medlem av forskargruppen kommer att gå på avdelningen för att undersöka och bekräfta behörighet. Deltagare kommer endast att rekryteras om alla kriterier är uppfyllda. Med hjälp av laboratorieresultatdata kommer även tjugo slutenvårdspatienter med bekräftade influensanegativa svabbprover att rekryteras på samma sätt, som en kontrollgrupp.

Studiebesök

Följande aktiviteter kommer att utföras vid varje besök och registreras i CRF:

Besök 1: Baslinjebesök

• Deltagare kommer att registreras förutsatt att de uppfyller kriterierna för inkludering och uteslutning och ger fullt informerat, skriftligt samtycke.
• Deltagarna kommer sedan att tilldelas ett studienummer
• Deltagarna kommer att fylla i ett kort frågeformulär som kommer att innehålla demografisk information: ålder, kön, etnicitet, jobbroll, medicinska komorbiditeter, vanliga mediciner, rökhistoria, historia av influensainfektioner och influensavaccin.
• Samla in 10 ml koagulerat blod pre-immunisering för baslinjeantikroppar. Bearbeta blod och lagra serum för serologiska analyser. Influensavaccinet kommer att administreras på normalt sätt.
• Deltagarna kommer att få en termometer, två influensa-självprovssatser (dvs. en pinne och ett viralt transportmediumrör med en mikrobiologisk provpåse) och två informationsformulär som de kommer att fylla i i händelse av att de utvecklar någon influensaliknande sjukdom ( ILI). En ILI kommer att definieras enligt WHO:s falldefinition som en feber på >37,8oC och hosta med debut inom de senaste 10 dagarna. De kommer att visas hur man använder termometern, tar en självpinne (d.v.s. en svalgpinne) och hur man fäster pinnen i provtagningsröret. De kommer också att visa hur man fyller i ett ILI-händelseformulär (ILIef) - kortfattat registrerar tidpunkten och arten av deras ILI-symtom/tecken.

Besök 2: 3 veckor efter baslinjebesöket (+ eller - 7 dagar)

• Samla 10 ml koagulerat blod för serologi. Bearbeta blod och lagra serum.
• Deltagarna kommer att uppmanas att tillhandahålla utandningsprover, detta kommer att fungera som en kontroll mot vilka utandningsprover som inträffade under ILI kommer att jämföras Besök 3: Högsäsong för influensa vanligtvis januari till februari (+ eller - 30 dagar)
• Samla 10 ml koagulerat blod för serologi. Bearbeta blod och lagra serum. Besök 4: Slutet av influensasäsongen vanligtvis april till maj (+ eller - 30 dagar)
• Samla 10 ml koagulerat blod för serologi. Bearbeta blod och lagra serum. ILI-händelse studiebesök Studiedeltagare kommer att kontakta studieteamet via e-post eller telefon för att varna dem om att en ILI-händelse har inträffat och för att ordna så att en studiegruppsmedlem hämtar provtagningspinnen och ILIef från dem, så snart som möjligt efter att det har inträffat. tas, för lämplig förvaring (i -80oC frys) tills den testats. Om studiedeltagare är hemma när de utvecklar ILI kommer de att bli ombedda att slutföra självprovningen och ILef. Pinnen kommer att förpackas i dubbla säckar och samlas in av en medlem av forskargruppen i enlighet med transportriktlinjerna i regeringens vägledning om covid-19: säker hantering och bearbetning av prover i laboratorier i enlighet med UN3373, förpackningsinstruktion 650. Svabbar kommer att levereras till UHL:s virologiska laboratorium och bearbetas enligt standardförfaranden (se avsnitt 8.7.1).

Det kommer att upprepas för studiedeltagaren att resultaten av dessa provtagningsresultat kommer att e-postas och ringas till dem tillsammans med de senaste råden om företagshälsovård. De kommer att uppmanas att följa företagshälsovårdspolicyn för ILI i väntan på resultaten av provtagningen, sjukrapportera på normalt sätt och kontakta sin läkare om ytterligare medicinsk rådgivning angående den aktuella sjukdomsperioden behövs.

Innehållet i ILIef kommer att föras in i deltagarnas fallrapportformulär (CRF), ingen personlig information kommer att inkluderas. Dessa detaljer kommer att användas i tolkningen av viral sekvensering och antikroppstitrar, utförd vid WHO Melbourne.

Om studiedeltagaren är på jobbet när de utvecklar ILI kommer de att bli ombedda att tillhandahålla ett utandningsprov och maskprov för upptäckt av influensa med hjälp av nya metoder innan de lämnar arbetet. Provtagningsmaterial kommer att föras till där HCW är beläget, men om detta inte kunde ske direkt skulle HCW uppmanas att följa företagshälsovårdens råd och gå hem. Prover som tagits från dessa processer beskrivs i avsnitt 8.7.

Utandningsprov för slutenvård Slutenvårdspatienter kommer att kontaktas enligt UHL:s vanliga infektionskontrollpolicy. Endast patienter som har tillgängliga resultat för en nyligen genomförd halspinne som testats för vanliga luftvägspatogener kommer att kontaktas. Covid-19-positiva avdelningar kommer inte att involveras i rekryteringen, istället kommer slutenvårdspatienter med influensa och andra luftvägsvirus att rekryteras från covid-19-negativa avdelningar. Patienter som är bekräftade influensapositiva hanteras vanligtvis i sidorum enligt policy. I alla fall kommer patienten inte att behöva komma i kontakt med analysutrustningen, eftersom andningsfångning och analysprocesser är separata. Maskprover kommer inte att utföras på patienter som behöver syrgasbehandling via en ansiktsmask. När en medlem av forskargruppen har gett sitt samtycke till studien kommer en medlem av forskargruppen att närma sig patienten med de masker, sprutor och munstycken som behövs för insamling av utandningsprov. En upprepad svalgpinne kommer också att tas vid denna tidpunkt så noggrann jämförelse kan äga rum mellan de nya diagnostiska metoderna och nuvarande praxis. Alla tre utandningsprovtagningsmetoderna kommer att användas där så är möjligt. När proverna har samlats in kommer de att placeras i en biologisk riskpåse och föras till analysmaskinerna. Svabbar och maskprover kommer att transporteras till virologilaboratoriet vid Leicester Royal Infirmary för bearbetning. Andningsfångningsutrustningen (sprutor och engångsmunstycken) kommer att kasseras på vanligt sätt för kliniskt avfall. TD-rör och Bio-VOC-provtagaren kommer att förpackas i dubbelpåsar och dekontamineras. Detta är det enda studiebesök som krävs av slutenvårdspatienter och ingen ytterligare uppföljning krävs.

Självprovningar Pinnarna kommer att levereras till avdelningen för klinisk mikrobiologi vid University Hospitals of Leicester NHS Trust där de kommer att hanteras under Cat 2 (BSL-2) förhållanden. De kommer att vortexas och svabbar kasseras och lämnar det inokulerade virustransportmediet (VTM). VTM-rören kommer att testas på en standarddiagnostisk analys (används rutinmässigt för patienttester på sjukhus) för att kontrollera förekomsten av influensa (eftersom många olika luftvägsvirus kan orsaka en "influensaliknande sjukdom"). Om influensa upptäcks kommer en alikvot av denna VTM att skickas till WHO Melbourne, tillsammans med serumproverna, för viral sekvensering av influensa. VTM kommer att transporteras till WHO:s laboratorium enligt UN3733/Kategori B-föreskrifter.

VOC-andningsanalys Alla tre analysplattformarna kommer att använda samma grundläggande insamlingsmetod. Deltagarna kommer att uppmanas att inte ha ätit eller druckit något minst 30 minuter före utandningsprovtagning. Före provtagning ska de svälja munnen med vatten som de sedan kan svälja - och ge sedan tre icke-tvingade utandningsprov genom att andas ut i engångsmunstycken i 3-5 sekunder. Forskare kommer att bära PPE som dikteras av lokal förtroendepolicy vid UHL för insamling av nasala och orala pinnar. Kliniska engångshandskar kommer att användas för alla procedurer. Analysutrustningen kommer att förvaras på avdelningen eller i ett forskningsområde borta från direkt patientkontakt.

För GC-IMS-analys fästs munstycket på ett 10 cm långt plaströr. När patienten andas ut i röret kommer forskaren att dra ett utandningsprov i en 5 ml spruta halvvägs ner i röret.

Provet kommer sedan att injiceras från sprutan av forskaren i BreathSpecTM GC-IMS-enheten för analys. Allt smittsamt material som finns i provet kommer att förstöras genom att värmas till över 60°C som en del av analysprocessen.

eNose använder en kommersiell CE-märkt andningsfångare, Markes Bio-VOC. Enheten rymmer 129 ml andedräkt, kommer förseglad och öppnas endast när den är klar att användas, och är engångsbruk. Användaren monterar ett munstycke av kartong på enheten före provtagning. När patienten har andats in i enheten tas munstycket bort och en sprutkoppling läggs till som ansluts till eNose. Sprutan trycks sedan ned och provet analyseras. Analystiden är under 5 minuter. eNose-maskinen kommer att dekontamineras i slutet av varje användningsdag enligt tillverkarens riktlinjer.

För GC-MS-analys tas ytterligare ett utandningsprov igen med Markes Bio-VOC-enheten enligt ovan. När provet har samlats in kommer det att överföras till ett termisk desorptionsrör (TD) (vanligtvis 89 mm x 6,4 mm). Rörets innerväggar är belagda med ett absorberande skikt på vilket andningskemikalier fäster. TD-röret placeras i änden av Bio-VOC-enheten och infångad luft trycks genom röret. När de är färdiga förseglas ändarna på rören med ändlock. En validerad dekontamineringsprocess genomförs sedan för Bio-VOC-provtagaren och TD-rören genom en lång/hög värmecykel för att säkerställa att viruset dödas. De dekontaminerade TD-rören kommer att förvaras i förvaringslådor i forskningsområdet Leicester Royal Infirmary för transport till University of Warwick för analys och slutligt bortskaffande, enligt ett fördefinierat materialöverföringsavtal.

Resultaten av GC-IMS-analysen kommer att laddas upp regelbundet från BreathSpecTM till en delad DataSync-enhet och laddas ner av analytiker vid University of Warwick. Inga identifierbara data kommer att kopplas till dessa data, endast ett studienummer.

Maskprovtagning Maskprovtagning består av deltagare som bär en modifierad ansiktsmask (platt kirurgisk, anknäbb eller FFP1) som innehåller upp till 5 remsor av 3D-printad polyvinylalkohol (PVA) i upp till 60 minuter medan de observeras av en medlem av forskargruppen. Utredarna kommer att tillhandahålla utbildning, stöd och personlig skyddsutrustning till forskarpersonal som tar prover och kommer överens om protokoll för lokal bearbetning. Före användning steriliseras maskerna och förvaras i förseglade provpåsar, när de väl bärs placeras de tillbaka i dessa påsar och förseglas. De kommer att transporteras till UHL:s virologilaboratorium i enlighet med gällande riskbedömningar och standardrutiner för transport av farligt material. Viralt RNA kommer att extraheras och kvantifieras från PVA-remsorna i maskerna med hjälp av kvantitativ realtids-PCR. Bearbetningen av PVA-remsorna kräver att de löses upp i vatten, från vilket RNA-viruset extraheras och analyseras med molekylära metoder. Maskerna och påsarna kommer att förstöras.

Serumtestning och viral sekvensering På var och en av de schemalagda dagarna som kräver serumprov kommer det koagulerade blodet att lagras vid 2oC till 8oC och centrifugeras inom 24 timmar på Research Space, LRI. Sera kommer att förvaras i kryovialer, med alla kryovialer märkta med deltagarens studienummer, besöksnummer och datum för insamling på Research Space, LRI. Prover kommer att förvaras frysta vid -80 oC fram till leverans. En uppsättning kryovialer kommer att skickas till WHO:s referenslaboratorium i Melbourne när alla prover har samlats in. Den andra uppsättningen kryovialer kommer att lagras som en säkerhetsåtgärd vid transportproblem. Med deltagarnas samtycke kommer alla oanvända serumprover att lagras för framtida etiskt godkänd forskning och delas med andra forskningssamarbetspartners i andra akademiska institutioner och industripartners inom och utanför Storbritannien för framtida forskning. Serum kommer att användas för hemagglutinationshämning och mikroneutraliseringsanalyser och när alla prover har bearbetats kommer resultaten att skickas tillbaka till forskargruppen i Leicester.

Haemagglutination Inhibition (HAI) och Microneutralization (MN) analyser, tillsammans med influensavirussekvensering kommer att utföras vid WHO Collaborating Center for Reference and Research on Influenza (VIDRL), Peter Doherty Institute for Infection and Immunity, 792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC 3000, Australien.