Utvide vår forståelse av effektiviteten av tidlig versus sen influensavaksine (BELIEVE)

Rekruttering, screening og kvalifikasjonsvurdering

Potensielle deltakere (University Hospitals of Leicester NHS Trust, UHL-ansatte) vil bli kontaktet via e-post for å annonsere og forklare studien. E-posten vil være en del av de rutinemessige e-postene om vaksinasjon mot sesonginfluensa som sendes ut hvert år for å minne UHL-ansatte om å være vaksinert. I tillegg vil etterforskerne annonsere ved plakater i de høybesatte områdene, f.eks. restauranten, og vårt arbeidshelseteam vil bistå med denne reklamen for studien. Etterforskerne forventer at noen helsearbeidere (HCW) blir oppmerksomme på studien gjennom jungeltelegrafen.

Studiet vil ha to faser med rekruttering. For september måned for den "tidlige" vaksinasjonsgruppen, og fra midten av november til midten av desember for den "sen" vaksinasjonsgruppen - kan de nøyaktige tidspunktene variere avhengig av når de inaktiverte influensavaksine mottas og sesongvariasjonen til viruset , da all rekruttering vil bli fullført før starten av influensasesongen. Tildeling til de to vaksinasjonsgruppene vil ikke bli randomisert; det vil være HCWs avgjørelse om de ønsker å ha vaksinasjonen enten tidlig eller sent. Det vil være en grense på 200 HCWs rekruttert til hver gruppe.

Personer som viser interesse for å delta i studien vil få utdelt et informasjonsark enten personlig eller via e-post. Etter dette vil etterforskerne gi dem så lenge de trenger for å bestemme om de vil delta i studien eller ikke. Hvis den enkelte godtar å delta, vil et medlem av forskerteamet screene og bekrefte kvalifisering. Deltakere vil kun bli rekruttert dersom alle kriterier er oppfylt. På dette tidspunktet vil det bli lagt til rette for at ansatte kan delta på en første avtale ved forskningsområdet ved LRI. Rekruttering innen forskningsområdet vil følge gjeldende distanseringstiltak ved UHL.

Ved denne første avtalen vil studien bli forklart for ansatte i grupper. Et medlem av forskerteamet vil da søke skriftlig informert samtykke som beskrevet nedenfor fra hver HCW individuelt. Hvis en person har flere spørsmål om studien, vil et annet studieteammedlem få støtte og legge til rette for informert samtykke.

Rekruttering av innlagte pasienter Klinikere ved akuttmedisinske avdelinger vil bli varslet før starten av influensasesongen via e-post og plakater, i kliniske områder, om studien som involverer innlagte pasienter med (influensalignende sykdom) ILI. University Hospitals of Leicester Virology Department ringer rutinemessig til det kliniske teamet med positive influensatilfeller hos innlagte pasienter i influensasesongen. Når det kliniske teamet deretter går for å forklare denne diagnosen til pasienten, vil de også gjøre dem oppmerksomme på studien og gi dem et deltakerinformasjonshefte. Etter dette vil etterforskerne gi pasienten så lenge de trenger å avgjøre om de vil delta i studien eller ikke. Hvis personen godtar å delta, vil de informere et medlem av det kliniske teamet som deretter vil varsle forskningsteamet. Et medlem av forskerteamet vil delta på avdelingen for å screene og bekrefte kvalifisering. Deltakere vil kun bli rekruttert dersom alle kriterier er oppfylt. Ved hjelp av laboratorieresultatdata vil også tjue innlagte pasienter med bekreftet influensa-negative vattpinner rekrutteres på samme måte, som en kontrollgruppe.

Studiebesøk

Følgende aktiviteter vil bli utført ved hvert besøk og registrert i CRF:

Besøk 1: Grunnbesøk

• Deltakere vil bli registrert forutsatt at de oppfyller inkluderings- og eksklusjonskriterier og gir fullt informert, skriftlig samtykke.
• Deltakerne vil da få tildelt et studienummer
• Deltakerne vil fylle ut et kort spørreskjema som vil inkludere demografisk informasjon: Alder, kjønn, etnisitet, jobbrolle, medisinske komorbiditeter, vanlige medisiner, røykehistorie, historie med influensainfeksjoner og influensavaksine.
• Samle 10 ml levret blod pre-immunisering for baseline antistoffer. Behandle blod og lagre serum for serologiske analyser. Influensavaksinen vil bli administrert på vanlig måte.
• Deltakerne vil få utdelt et termometer, to influensa-selvprøvesett (dvs. en vattpinne og et viralt transportmediumrør med en mikrobiologiprøvepose), og to informasjonsskjemaer som de skal fylle ut i tilfelle de utvikler en influensalignende sykdom ( ILI). En ILI vil bli definert i henhold til WHOs saksdefinisjon som feber på >37,8oC og hoste med utbrudd innen de siste 10 dagene. De vil bli vist hvordan man betjener termometeret, tar en selvpinne (dvs. en strupepinne), og hvordan man fester vattpinne i prøvetakingsrøret. De vil også bli vist hvordan man fyller ut et ILI-hendelsesskjema (ILIef) - kort registrerer tidspunktet og arten av deres ILI-symptomer/-tegn.

Besøk 2: 3 uker etter baseline-besøk (+ eller - 7 dager)

• Samle 10 ml levret blod for serologi. Behandle blod og lagre serum.
• Deltakerne vil bli bedt om å gi pusteprøver, dette vil fungere som en kontroll mot hvilke pusteprøver som skjedde under ILI vil bli sammenlignet Besøk 3: Høy influensasesong vanligvis januar til februar (+ eller - 30 dager)
• Samle 10 ml levret blod for serologi. Behandle blod og lagre serum. Besøk 4: Slutten av influensasesongen vanligvis april til mai (+ eller - 30 dager)
• Samle 10 ml levret blod for serologi. Behandle blod og lagre serum. ILI-begivenhet studiebesøk Studiedeltakere vil kontakte studieteamet på e-post eller telefon for å varsle dem om at en ILI-hendelse har inntruffet, og for å sørge for at et medlem av studieteamet henter vattpinne og ILIef fra dem, så snart som mulig etter at det har vært tatt, for passende oppbevaring (i -80oC fryser) til testet. Hvis studiedeltakerne er hjemme når de utvikler ILI, vil de bli bedt om å fullføre selvsvabben og ILef. Vatten vil bli doblet i poser og samles inn av et medlem av forskerteamet i samsvar med transportveiledningen gitt i Regjeringens veiledning om COVID-19: sikker håndtering og behandling av prøver i laboratorier i henhold til UN3373, pakkeinstruks 650. Vatter vil bli levert til UHL virologilaboratoriet og behandlet i henhold til standard operasjonsprosedyrer (se avsnitt 8.7.1).

Det vil bli gjentatt til studiedeltakeren at resultatene av disse vattpinneresultatene vil bli sendt på e-post og ringt til dem sammen med de siste rådene om arbeidshelse. De vil bli bedt om å følge bedriftshelsepolitikken for ILI mens de venter på resultatene av vattpinnen, melde syke på vanlig måte og kontakte fastlegen dersom det er behov for ytterligere medisinsk rådgivning angående denne nåværende sykdomsperioden.

Innholdet i ILIef vil bli lagt inn i deltakernes saksrapportskjema (CRF), ingen personlig informasjon vil bli inkludert. Disse detaljene vil bli brukt i tolkningen av viral sekvensering og antistofftitere, utført ved WHO Melbourne.

Hvis studiedeltakeren er på jobb når de utvikler ILI, vil de bli bedt om å gi en pusteprøve og maskeprøve for påvisning av influensa ved bruk av nye metoder før de forlater arbeidet. Prøvetakingsmateriale vil bli brakt til der HCW befinner seg, men hvis dette ikke kunne skje med en gang, vil HCW bli bedt om å følge råd fra bedriftshelse og reise hjem. Prøver samlet inn fra disse prosessene er beskrevet i avsnitt 8.7.

Innlagt pusteprøve Innlagte pasienter vil bli kontaktet i henhold til de vanlige UHLs retningslinjer for infeksjonskontroll. Bare pasienter som har tilgjengelige resultater for en nylig halsprøve testet for vanlige respiratoriske patogener vil bli kontaktet. COVID-19 positive avdelinger vil ikke være involvert i rekruttering, i stedet vil innlagte pasienter med influensa og andre luftveisvirus rekrutteres fra COVID-19 negative avdelinger. Pasienter som er bekreftet influensapositive, behandles vanligvis i siderom i henhold til retningslinjer. I alle tilfeller vil pasienten ikke være pålagt å komme i kontakt med analyseutstyret, da pustefangst og analyseprosesser er separate. Maskeprøvetaking vil ikke bli utført på pasienter som trenger oksygenbehandling via ansiktsmaske. Etter samtykke til studien vil ett medlem av forskerteamet henvende seg til pasienten med maskene, sprøytene og munnstykkene som trengs for innsamling av pusteprøver. En gjentatt halsprøve vil også bli tatt på dette tidspunktet, slik at nøyaktig sammenligning kan finne sted mellom de nye diagnostiske metodene og gjeldende praksis. Alle tre metodene for pusteprøvetaking, der det er mulig, vil bli brukt. Når prøvene er samlet vil de legges i en biologisk farepose og tas med til analysemaskinene. Vatter og maskeprøver vil bli fraktet til virologilaboratoriet ved Leicester Royal Infirmary for behandling. Pusteutstyret (sprøyter og engangsmunnstykker) vil bli deponert på vanlig måte for klinisk avfall. TD-rør og Bio-VOC-prøvetakeren vil bli dobbelpose og vil bli dekontaminert. Dette er det eneste studiebesøket som kreves av innlagte pasienter og det er ikke nødvendig med ytterligere oppfølging.

Egne vattpinner Vaskepinnene vil bli levert til avdelingen for klinisk mikrobiologi ved University Hospitals of Leicester NHS Trust hvor de vil bli håndtert under Cat 2 (BSL-2) forhold. De vil bli vortexet, og vattpinner kastes og forlater det inokulerte virustransportmediet (VTM). VTM-rørene vil bli testet på en standard diagnostisk analyse (brukes rutinemessig for sykehuspasienttesting) for å sjekke forekomsten av influensa (da mange forskjellige luftveisvirus kan forårsake en "influensalignende sykdom"). Hvis influensa oppdages, vil en alikvot av denne VTM sendes til WHO Melbourne, sammen med serumprøvene, for viral sekvensering av influensa. VTM vil bli transportert til WHO-laboratoriet i henhold til UN3733/Kategori B-forskrifter.

VOC pusteanalyse Alle tre analyseplattformene vil bruke den samme grunnleggende innsamlingsmetoden. Deltakerne vil bli bedt om å ikke ha spist eller drukket noe minst 30 minutter før pusteprøven. Før prøvetaking svell munnen med vann som de deretter kan svelge - og gi deretter tre ikke-tvungen pusteprøver ved å puste ut i engangsmunnstykker i 3-5 sekunder. Forskere vil bruke PPE diktert av lokal tillitspolitikk ved UHL for innsamling av nese- og orale vattpinner. Kliniske engangshansker vil bli brukt til alle prosedyrer. Analyseapparatene vil oppbevares på avdelingen eller i et forskningsområde unna direkte pasientkontakt.

For GC-IMS-analyse er munnstykket festet til et 10 cm langt plastrør. Når pasienten puster ut i røret, vil forskeren trekke en pusteprøve inn i en 5 ml sprøyte halvveis ned i røret.

Prøven vil deretter bli injisert fra sprøyten av forskeren i BreathSpecTM GC-IMS-enheten for analyse. Eventuelt smittefarlig materiale i prøven vil bli ødelagt ved å varmes opp til over 60°C som en del av analyseprosessen.

eNose bruker en kommersiell CE-merket pustefangerenhet, Markes Bio-VOC. Enheten holder 129 ml pust, kommer forseglet og åpnes kun når den er klar til bruk, og er til engangsbruk. Brukeren monterer et munnstykke av papp til enheten før prøvetaking. Når pasienten har pustet inn i enheten, fjernes munnstykket og en sprøytetilpasning legges til, som kobles til eNose. Sprøyten trykkes deretter ned og prøven analyseres. Analysetiden er under 5 minutter. eNose-maskinen vil bli dekontaminert ved slutten av hver dag med bruk i henhold til produsentens retningslinjer.

For GC-MS-analyse tas en ny pusteprøve igjen ved å bruke Markes Bio-VOC-enheten som ovenfor. Når prøven er samlet vil den bli overført til et termisk desorpsjonsrør (TD) (vanligvis 89 mm x 6,4 mm). De indre veggene i røret er belagt med et absorberende lag som pustekjemikalier fester seg til. TD-røret plasseres i enden av Bio-VOC-enheten og innfanget luft skyves gjennom røret. Når de er ferdige, forsegles endene av rørene med endestykker. En validert dekontamineringsprosess blir deretter utført for Bio-VOC-prøvetakeren og TD-rørene gjennom en lang/høy varmesyklus for å sikre at viruset blir drept. De dekontaminerte TD-rørene vil bli oppbevart i oppbevaringsbokser i forskningsområdet til Leicester Royal Infirmary for transport til University of Warwick for analyse og endelig deponering, i henhold til en forhåndsdefinert materialoverføringsavtale.

Resultatene av GC-IMS-analysen vil bli lastet opp regelmessig fra BreathSpecTM til en DataSync delt disk og lastet ned av analytikere ved University of Warwick. Ingen identifiserbare data vil bli knyttet til disse dataene, kun et studienummer.

Maskeprøvetaking Maskeprøvetaking består av deltakere som bærer en modifisert ansiktsmaske (flat kirurgisk, andnebb eller FFP1) som inneholder opptil 5 strimler med 3D-trykt polyvinylalkohol (PVA) i opptil 60 minutter mens de blir observert av et medlem av forskerteamet. Etterforskerne vil gi opplæring, støtte og personlig verneutstyr til forskningspersonell som innhenter prøver og blir enige om protokoller for lokal behandling. Før bruk steriliseres maskene og oppbevares i forseglede prøveposer, når de er brukt, legges de tilbake i disse posene og forsegles. De vil bli transportert til UHL Virology Laboratory i tråd med gjeldende risikovurderinger og standard driftsprosedyrer for transport av farlige materialer. Viralt RNA vil bli ekstrahert og kvantifisert fra PVA-strimlene i maskene ved bruk av sanntids kvantitativ PCR. Behandlingen av PVA-strimlene krever at de løses opp i vann, hvorfra RNA-viruset ekstraheres og analyseres ved hjelp av molekylære metoder. Maskene og posene vil bli ødelagt.

Serumtesting og viral sekvensering På hver av de planlagte dagene som krever serumprøver, vil det koagulerte blodet lagres ved 2oC til 8oC og sentrifugeres innen 24 timer ved Research Space, LRI. Sera vil bli lagret i kryovialer, med alle kryovialer merket med deltakerens studienummer, besøksnummer og innsamlingsdato ved Research Space, LRI. Prøver vil bli lagret frosne ved -80 oC frem til forsendelse. Ett sett med kryovialer vil bli sendt til WHOs referanselaboratorium i Melbourne når alle prøver er samlet inn. Det andre settet med kryovialer vil bli lagret som et sikkerhetstiltak i tilfelle transportproblemer. Med deltakersamtykke vil alle ubrukte serumprøver bli lagret for fremtidig etisk godkjent forskning og delt med andre forskningssamarbeidspartnere i andre akademiske institusjoner og industripartnere i og utenfor Storbritannia for fremtidig forskning. Serum vil bli brukt til hemagglutinasjonshemming og mikronøytraliseringsanalyser, og når alle prøver er behandlet vil resultatene bli sendt tilbake til forskerteamet i Leicester.

Haemagglutinasjonshemming (HAI) og mikronøytralisering (MN) analyser, sammen med influensavirussekvensering vil bli utført ved WHO Collaborating Center for Reference and Research on Influenza (VIDRL), Peter Doherty Institute for Infection and Immunity, 792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC 3000, Australia.