Ons begrip van de effectiviteit van vroege versus late griepvaccins verbreden (BELIEVE)

Werving, screening en geschiktheidsbeoordeling

Potentiële deelnemers (University Hospitals of Leicester NHS Trust, UHL-personeel) zullen per e-mail worden gecontacteerd om reclame te maken voor en uitleg te geven over het onderzoek. De e-mail zal deel uitmaken van de routine-e-mails over seizoensgriepvaccinatie die elk jaar worden verzonden om UHL-personeel eraan te herinneren zich te laten vaccineren. Bovendien zullen de rechercheurs via posters adverteren in de gebieden met veel personeelsverkeer, b.v. het restaurant, en ons Arbo-team zal helpen bij deze reclame voor het onderzoek. De onderzoekers verwachten dat sommige gezondheidswerkers (HCW's) via mond-tot-mondreclame op de hoogte zullen worden gebracht van het onderzoek.

De studie kent twee wervingsfasen. Voor de maand september voor de 'vroege' vaccinatiegroep en van half november tot half december voor de 'late' vaccinatiegroep - de exacte tijdstippen kunnen variëren afhankelijk van wanneer de geïnactiveerde griepvaccins worden ontvangen en de seizoensgebondenheid van het virus , aangezien al rekrutering vóór het begin van het griepseizoen zal worden voltooid. Toewijzing aan de twee vaccinatiegroepen is niet gerandomiseerd; het is de beslissing van de HCW of ze de vaccinatie vroeg of laat willen hebben. Er zal een limiet van 200 HCW's aangeworven worden voor elke groep.

Personen die belangstelling tonen voor deelname aan het onderzoek, krijgen persoonlijk of via e-mail een informatieblad. Hierna geven de onderzoekers hen de tijd die ze nodig hebben om te beslissen of ze al dan niet aan het onderzoek willen deelnemen. Als het individu ermee instemt om deel te nemen, zal een lid van het onderzoeksteam de geschiktheid screenen en bevestigen. Deelnemers worden pas geworven als aan alle criteria is voldaan. Op dat moment worden afspraken gemaakt voor medewerkers voor een eerste afspraak in de Onderzoeksruimte van het LRI. Werving in het onderzoeksgebied zal voldoen aan de huidige sociale afstandsmaatregelen die van kracht zijn bij UHL.

Bij deze eerste afspraak wordt het onderzoek in groepjes aan medewerkers uitgelegd. Een lid van het onderzoeksteam zal dan elke HCW afzonderlijk om schriftelijke geïnformeerde toestemming vragen, zoals hieronder beschreven. Als een persoon meer vragen heeft over het onderzoek, mag een ander lid van het onderzoeksteam de geïnformeerde toestemming ondersteunen en faciliteren.

Werving van opgenomen patiënten Clinici op de acute medische afdelingen zullen voorafgaand aan het begin van het griepseizoen via e-mail en posters in klinische gebieden op de hoogte worden gebracht van het onderzoek met opgenomen patiënten met (influenza-achtige ziekte) ILI. De afdeling Virologie van de Universitaire Ziekenhuizen van Leicester belt routinematig het klinische team van positieve griepgevallen bij intramurale patiënten tijdens het griepseizoen. Wanneer het klinische team vervolgens deze diagnose aan de patiënt gaat uitleggen, zullen ze hen ook op de hoogte brengen van het onderzoek en hen een informatiebrochure voor deelnemers geven. Hierna geven de onderzoekers de patiënt de tijd die nodig is om te beslissen of hij al dan niet aan het onderzoek wil deelnemen. Als de persoon ermee instemt om deel te nemen, zal hij een lid van het klinische team op de hoogte brengen, die vervolgens het onderzoeksteam op de hoogte zal stellen. Een lid van het onderzoeksteam zal de afdeling bezoeken om de geschiktheid te screenen en te bevestigen. Deelnemers worden pas geworven als aan alle criteria is voldaan. Op basis van gegevens uit laboratoriumresultaten zullen ook twintig opgenomen patiënten met bevestigde influenza-negatieve uitstrijkjes op dezelfde manier worden geworven, als controlegroep.

Studiebezoeken

Bij elk bezoek worden de volgende activiteiten uitgevoerd en vastgelegd in het CRF:

Bezoek 1: Baseline bezoek

• Deelnemers worden ingeschreven op voorwaarde dat ze voldoen aan de in- en uitsluitingscriteria en volledig geïnformeerde, schriftelijke toestemming geven.
• Deelnemers krijgen dan een studienummer toegewezen
• Deelnemers vullen een korte vragenlijst in met demografische informatie: leeftijd, geslacht, etniciteit, functie, medische comorbiditeit, reguliere medicatie, rookgeschiedenis, geschiedenis van griepinfecties en griepvaccin.
• Verzamel 10 ml gerold bloed pre-immunisatie voor baseline antilichamen. Verwerk bloed en bewaar serum voor serologische assays. Het griepvaccin wordt op de normale manier toegediend.
• Deelnemers krijgen een thermometer, twee kits voor zelfafname van griep (d.w.z. een uitstrijkje en een buisje voor het transportmedium van het virus met een microbiologische monsterzak) en twee informatieformulieren die ze zullen invullen in het geval dat ze een griepachtige ziekte krijgen ( ILI). Een ILI wordt volgens de WHO-casusdefinitie gedefinieerd als koorts van >37,8oC en hoesten met aanvang binnen de laatste 10 dagen. Ze zullen worden getoond hoe ze de thermometer moeten bedienen, een uitstrijkje (d.w.z. een keeluitstrijkje) moeten nemen en hoe het uitstrijkje in het monsterbuisje moet worden vastgezet. Ze zullen ook worden getoond hoe ze een ILI-gebeurtenisformulier (ILIef) moeten invullen - waarbij ze in het kort de timing en aard van hun ILI-symptomen/-symptomen vastleggen.

Bezoek 2: 3 weken na het basisbezoek (+ of - 7 dagen)

• Verzamel 10 ml gestold bloed voor serologie. Verwerk bloed en bewaar serum.
• Deelnemers wordt gevraagd om ademmonsters te verstrekken, dit zal dienen als een controle waarmee ademmonsters die tijdens ILI zijn opgetreden, zullen worden vergeleken. Bezoek 3: Piekgriepseizoen meestal van januari tot februari (+ of - 30 dagen)
• Verzamel 10 ml gestold bloed voor serologie. Verwerk bloed en bewaar serum. Bezoek 4: Einde van het griepseizoen meestal april tot mei (+ of - 30 dagen)
• Verzamel 10 ml gestold bloed voor serologie. Verwerk bloed en bewaar serum. ILI-gebeurtenis studiebezoek Deelnemers aan de studie nemen per e-mail of telefoon contact op met het onderzoeksteam om hen te waarschuwen dat er een ILI-gebeurtenis heeft plaatsgevonden en om te regelen dat een lid van het onderzoeksteam het uitstrijkje en ILIef bij hen ophaalt, zo snel mogelijk nadat het is afgenomen. genomen, voor geschikte opslag (in een vriezer van -80oC) totdat getest. Als studiedeelnemers thuis zijn wanneer ze ILI ontwikkelen, wordt hen gevraagd de zelfuitstrijk en ILef in te vullen. Het wattenstaafje wordt dubbel verpakt en verzameld door een lid van het onderzoeksteam in overeenstemming met de transportrichtlijnen die zijn uitgegeven in de richtlijnen van de overheid inzake COVID-19: veilige hantering en verwerking van monsters in laboratoria in overeenstemming met UN3373, verpakkingsinstructies 650. Uitstrijkjes worden geleverd aan het UHL-virologielaboratorium en verwerkt volgens de standaardprocedures (zie paragraaf 8.7.1).

Er zal aan de studiedeelnemer worden herhaald dat de resultaten van deze uitstrijkjes per e-mail zullen worden gemaild en naar hen zullen worden doorgebeld, samen met het laatste advies op het gebied van gezondheid op het werk. Ze zullen worden geadviseerd om in afwachting van de uitslag van het uitstrijkje het arbobeleid voor IAZ te volgen, zich op de normale manier ziek te melden en contact op te nemen met hun huisarts als verder medisch advies met betrekking tot deze huidige ziekteperiode nodig is.

De inhoud van het ILIf wordt ingevoerd in het deelnemerscasusrapport (CRF), er worden geen persoonlijke gegevens opgenomen. Deze details zullen worden gebruikt bij de interpretatie van de virale sequencing en antilichaamtiters, uitgevoerd bij WHO Melbourne.

Als de studiedeelnemer aan het werk is wanneer hij ILI ontwikkelt, wordt hem gevraagd om een ​​ademmonster en een maskermonster te verstrekken voor de detectie van griep met behulp van nieuwe methoden voordat hij het werk verlaat. Bemonsteringsmateriaal zal worden gebracht naar de plaats waar de HCW zich bevindt, maar als dit niet meteen kan gebeuren, wordt de HCW verteld het advies op het gebied van gezondheid op te volgen en naar huis te gaan. Specimens die bij deze processen zijn verzameld, worden beschreven in paragraaf 8.7.

Intramuraal ademmonster Intramurale patiënten worden benaderd volgens het gebruikelijke UHL-infectiecontrolebeleid. Alleen patiënten die resultaten beschikbaar hebben van een recent keeluitstrijkje dat is getest op veelvoorkomende luchtwegpathogenen, worden benaderd. COVID-19-positieve afdelingen zullen niet worden betrokken bij de werving, in plaats daarvan zullen intramurale patiënten met griep en andere respiratoire virussen worden gerekruteerd uit COVID-19-negatieve afdelingen. Patiënten die grieppositief zijn, worden volgens het beleid meestal in zijkamers behandeld. In alle gevallen hoeft de patiënt niet in contact te komen met de analyseapparatuur, aangezien het vastleggen van de adem en het analytische proces gescheiden zijn. Maskerafname wordt niet uitgevoerd bij patiënten die zuurstoftherapie via een gezichtsmasker nodig hebben. Na toestemming voor het onderzoek zal een lid van het onderzoeksteam de patiënt benaderen met de maskers, spuiten en mondstukken die nodig zijn voor het afnemen van ademmonsters. Op dit moment zal ook een herhaald keeluitstrijkje worden genomen, zodat een nauwkeurige vergelijking kan plaatsvinden tussen de nieuwe diagnostische methoden en de huidige praktijk. Waar mogelijk zullen alle drie de methoden voor adembemonstering worden gebruikt. Zodra de monsters zijn verzameld, worden ze in een zak voor biologisch gevaar gedaan en naar de analysemachines gebracht. Uitstrijkjes en maskermonsters zullen voor verwerking naar het virologielaboratorium in Leicester Royal Infirmary worden vervoerd. De beademingsapparatuur (injectiespuiten en wegwerpmondstukken) wordt op de normale manier weggegooid bij het ziekenhuisafval. TD-buizen en de Bio-VOC-sampler worden dubbel verpakt en worden ontsmet. Dit is het enige studiebezoek dat intramurale patiënten nodig hebben en er is geen verdere follow-up vereist.

Zelf-uitstrijkjes De uitstrijkjes worden afgeleverd bij de afdeling Klinische Microbiologie van de Universitaire Ziekenhuizen van Leicester NHS Trust, waar ze zullen worden behandeld onder Cat 2 (BSL-2)-omstandigheden. Ze worden gevortexd en de wattenstaafjes worden weggegooid, waarbij het geïnoculeerde virustransportmedium (VTM) achterblijft. De VTM-buisjes zullen worden getest op een standaard diagnostische assay (routinematig gebruikt voor het testen van ziekenhuispatiënten) om te controleren op de aanwezigheid van griep (aangezien veel verschillende respiratoire virussen een 'griepachtige ziekte' kunnen veroorzaken). Als griep wordt gedetecteerd, wordt een deel van dit VTM samen met de serummonsters naar WHO Melbourne gestuurd voor virale sequentiebepaling van griep. VTM zal onder de UN3733/Categorie B-regelgeving naar het WHO-laboratorium worden getransporteerd.

VOC-ademanalyse Alle drie de analyseplatforms zullen dezelfde basisverzamelingsaanpak gebruiken. Deelnemers wordt gevraagd om ten minste 30 minuten voor ademafname niets te hebben gegeten of gedronken. Spoel voorafgaand aan de monstername hun mond met water dat ze vervolgens kunnen doorslikken - en geef vervolgens drie niet-geforceerde ademmonsters door gedurende 3-5 seconden uit te ademen in wegwerpmondstukken. Onderzoekers zullen PBM dragen die zijn voorgeschreven door het lokale vertrouwensbeleid bij UHL voor het verzamelen van neus- en monduitstrijkjes. Voor alle procedures worden klinische wegwerphandschoenen gebruikt. De analytische apparaten worden op de afdeling of in een onderzoeksruimte bewaard, uit de buurt van direct patiëntencontact.

Voor GC-IMS-analyse wordt het mondstuk bevestigd aan een 10 cm lange plastic buis. Terwijl de patiënt in de buis uitademt, zuigt de onderzoeker halverwege de buis een ademmonster op in een spuit van 5 ml.

Het monster wordt vervolgens door de onderzoeker vanuit de spuit in het BreathSpecTM GC-IMS-apparaat geïnjecteerd voor analyse. Al het besmettelijke materiaal in het monster wordt vernietigd door het te verhitten tot meer dan 60 °C als onderdeel van het analyseproces.

De eNose maakt gebruik van een in de handel verkrijgbare ademopvangeenheid met CE-markering, de Markes Bio-VOC. Het apparaat bevat 129 ml adem, wordt verzegeld geleverd en wordt pas geopend wanneer het klaar is voor gebruik, en is wegwerpbaar. De gebruiker plaatst een kartonnen mondstuk op het apparaat voorafgaand aan de bemonstering. Zodra de patiënt in het apparaat heeft ingeademd, wordt het mondstuk verwijderd en wordt een spuitfitting toegevoegd, die wordt aangesloten op de eNose. De spuit wordt vervolgens ingedrukt en het monster wordt geanalyseerd. De analysetijd is minder dan 5 minuten. De eNose-machine wordt aan het einde van elke gebruiksdag ontsmet volgens de richtlijnen van de fabrikant.

Voor GC-MS-analyse wordt opnieuw een ademmonster genomen met behulp van de Markes Bio-VOC-eenheid zoals hierboven beschreven. Zodra het monster is verzameld, wordt het overgebracht naar een thermische desorptiebuis (TD) (meestal 89 mm x 6,4 mm). De binnenwanden van de buis zijn gecoat met een absorberende laag waaraan ademchemicaliën hechten. De TD-buis wordt aan het uiteinde van de Bio-VOC-eenheid geplaatst en opgevangen lucht wordt door de buis geduwd. Eenmaal voltooid, worden de uiteinden van de buizen afgesloten met einddoppen. Vervolgens wordt een gevalideerd decontaminatieproces uitgevoerd voor de Bio-VOC-sampler en TD-buizen door middel van een lange/hoge verwarmingscyclus om ervoor te zorgen dat het virus wordt gedood. De gedecontamineerde TD-buisjes worden bewaard in opslagdozen in het onderzoeksgebied van Leicester Royal Infirmary voor transport naar de Universiteit van Warwick voor analyse en definitieve verwijdering, volgens een vooraf gedefinieerde Material Transfer Agreement.

De resultaten van de GC-IMS-analyse worden regelmatig geüpload van de BreathSpecTM naar een gedeelde DataSync-drive en gedownload door analisten van de University of Warwick. Aan deze gegevens worden geen identificeerbare gegevens gekoppeld, alleen een studienummer.

Maskerbemonstering Maskerbemonstering bestaat uit deelnemers die een aangepast gezichtsmasker dragen (plat chirurgisch, duckbilled of FFP1) dat maximaal 5 stroken 3D-geprinte polyvinylalcohol (PVA) bevat gedurende maximaal 60 minuten terwijl ze worden geobserveerd door een lid van het onderzoeksteam. De onderzoekers zullen training, ondersteuning en persoonlijke beschermingsmiddelen bieden aan onderzoekspersoneel dat monsters neemt en protocollen voor lokale verwerking overeenkomen. Voorafgaand aan gebruik worden maskers gesteriliseerd en bewaard in verzegelde monsterzakjes. Eenmaal gedragen worden ze teruggeplaatst in deze zakken en verzegeld. Ze zullen naar het UHL Virology Laboratory worden vervoerd in overeenstemming met de huidige risicobeoordelingen en standaardwerkwijzen voor het vervoeren van gevaarlijke stoffen. Viraal RNA zal worden geëxtraheerd en gekwantificeerd uit de PVA-strips in de maskers met behulp van real-time kwantitatieve PCR. De verwerking van de PVA-strips vereist dat ze worden opgelost in water, waaruit het RNA-virus wordt geëxtraheerd en geanalyseerd met behulp van moleculaire methoden. De maskers en tassen worden vernietigd.

Serumtesten en virale sequentiebepaling Op elk van de geplande dagen waarop serummonsters nodig zijn, wordt het gestolde bloed bij 2oC tot 8oC opgeslagen en binnen 24 uur gecentrifugeerd in de Research Space, LRI. Sera zal worden opgeslagen in cryovials, met alle cryovials gelabeld met het studienummer van de deelnemer, het bezoeknummer en de datum van verzameling in de Research Space, LRI. Monsters worden tot verzending ingevroren bij -80 oC bewaard. Een set cryovials wordt naar het WHO-referentielaboratorium in Melbourne gestuurd zodra alle monsters zijn verzameld. De andere set cryovials wordt opgeslagen als veiligheidsmaatregel in geval van transportproblemen. Met toestemming van de deelnemer worden alle ongebruikte serummonsters opgeslagen voor toekomstig ethisch goedgekeurd onderzoek en gedeeld met andere onderzoeksmedewerkers in andere academische instellingen en industriële partners binnen en buiten het VK voor toekomstig onderzoek. Serum zal worden gebruikt voor hemagglutinatieremming en microneutralisatietesten en zodra alle monsters zijn verwerkt, zullen de resultaten worden teruggestuurd naar het onderzoeksteam in Leicester.

Hemagglutination Inhibition (HAI) en Microneutralization (MN) assays, samen met influenza virale sequencing zullen worden uitgevoerd in het WHO Collaborating Centre for Reference and Research on Influenza (VIDRL), Peter Doherty Institute for Infection and Immunity, 792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC 3000, Australië.