Udvidelse af vores forståelse af effektiviteten af ​​tidlig versus sen influenzavaccine (BELIEVE)

Rekruttering, screening og berettigelsesvurdering

Potentielle deltagere (University Hospitals of Leicester NHS Trust, UHL-personale) vil blive kontaktet via e-mail for at annoncere og forklare undersøgelsen. E-mailen vil være en del af de rutinemæssige e-mails med vaccination mod sæsoninfluenza, som udsendes hvert år for at minde UHL-personalet om at blive vaccineret. Herudover vil efterforskerne annoncere ved plakater i de højbemandede trafikområder, f.eks. restauranten, og vores arbejdsmiljøteam vil hjælpe med denne annoncering af undersøgelsen. Efterforskerne forventer, at nogle sundhedsarbejdere (HCW'er) bliver opmærksomme på undersøgelsen gennem mund til mund.

Undersøgelsen vil have to faser af rekruttering. For september måned for den 'tidlige' vaccinationsgruppe og fra midten af ​​november til midten af ​​december for den 'sene' vaccinationsgruppe - kan de nøjagtige tidspunkter variere afhængigt af, hvornår de inaktiverede influenzavacciner modtages, og sæsonbetingelsen af ​​virusset. , da al rekruttering vil blive gennemført inden starten af ​​influenzasæsonen. Tildeling til de to vaccinationsgrupper vil ikke blive randomiseret; det vil være HCWs beslutning, om de ønsker at få vaccinationen enten tidligt eller sent. Der vil være en grænse på 200 HCW'er rekrutteret til hver gruppe.

Personer, der udtrykker interesse for at deltage i undersøgelsen, vil modtage et informationsark enten personligt eller via e-mail. Efter dette vil efterforskerne give dem så længe de har brug for at beslutte, om de vil deltage i undersøgelsen. Hvis personen accepterer at deltage, vil et medlem af forskerteamet screene og bekræfte berettigelsen. Deltagere vil kun blive rekrutteret, hvis alle kriterier er opfyldt. På dette tidspunkt vil der blive truffet ordninger for, at medarbejderne kan deltage i en indledende aftale på forskningsrummet på LRI. Rekruttering på forskningsområdet vil være i overensstemmelse med de nuværende foranstaltninger til social distancering på UHL.

Ved denne første aftale vil undersøgelsen blive forklaret for personalet i grupper. Et medlem af forskerholdet vil derefter søge skriftligt informeret samtykke som beskrevet nedenfor fra hver enkelt HCW individuelt. Hvis en person har flere spørgsmål om undersøgelsen, vil et andet studieteammedlem få lov til at støtte og facilitere informeret samtykke.

Rekruttering af indlagte patienter Klinikere på de akutte medicinske afdelinger vil inden starten af ​​influenzasæsonen blive underrettet via e-mail og plakater, i kliniske områder, om undersøgelsen, der involverer indlagte patienter med (influenzalignende sygdom) ILI. University Hospitals of Leicester Virology Department ringer rutinemæssigt til det kliniske team af positive influenzatilfælde hos indlagte patienter i influenzasæsonen. Når det kliniske team derefter går for at forklare denne diagnose for patienten, vil de også gøre dem opmærksomme på undersøgelsen og give dem en deltagerinformationsfolder. Efter dette vil efterforskerne give patienten så længe de har brug for at beslutte, om de vil deltage i undersøgelsen eller ej. Hvis personen accepterer at deltage, vil de informere et medlem af det kliniske team, som derefter vil underrette forskerteamet. Et medlem af forskerteamet vil deltage i afdelingen for at screene og bekræfte berettigelse. Deltagere vil kun blive rekrutteret, hvis alle kriterier er opfyldt. Ved hjælp af laboratorieresultatdata vil tyve indlagte patienter med bekræftede influenza-negative podninger også blive rekrutteret på samme måde som en kontrolgruppe.

Studiebesøg

Følgende aktiviteter vil blive udført ved hvert besøg og registreret i CRF:

Besøg 1: Baseline besøg

• Deltagere vil blive tilmeldt, forudsat at de opfylder inklusions- og eksklusionskriterier og giver fuldt informeret, skriftligt samtykke.
• Deltagerne vil derefter få tildelt et undersøgelsesnummer
• Deltagerne vil udfylde et kort spørgeskema, som vil omfatte demografiske oplysninger: Alder, køn, etnicitet, jobrolle, medicinske følgesygdomme, regelmæssig medicin, rygehistorie, historie med influenzainfektioner og influenzavaccine.
• Indsaml 10 ml størknet blod præ-immunisering for baseline-antistoffer. Behandl blod og opbevar serum til serologiske analyser. Influenzavaccinen vil blive administreret på normal vis.
• Deltagerne får udleveret et termometer, to influenza-selvprøvesæt (dvs. en podepind og et viralt transportmediumrør med en mikrobiologisk prøvepose) og to informationsskemaer, som de vil udfylde i tilfælde af, at de udvikler en influenzalignende sygdom ( ILI). En ILI vil blive defineret i henhold til WHO-tilfældedefinitionen som en feber på >37,8oC og hoste med debut inden for de sidste 10 dage. De vil blive vist, hvordan man betjener termometeret, tager en selvpodning (dvs. en halspodning), og hvordan man fastgør podepinden i prøvetagningsrøret. De vil også blive vist, hvordan man udfylder en ILI-hændelsesformular (ILIef) - kort registrering af timingen og arten af ​​deres ILI-symptomer/-tegn.

Besøg 2: 3 uger efter baseline besøg (+ eller - 7 dage)

• Saml 10 ml størknet blod til serologi. Behandl blod og opbevar serum.
• Deltagerne vil blive bedt om at levere udåndingsprøver, dette vil fungere som en kontrol, som udåndingsprøver, der fandt sted under ILI, vil blive sammenlignet med Besøg 3: Højsæson for influenza normalt januar til februar (+ eller - 30 dage)
• Saml 10 ml størknet blod til serologi. Behandl blod og opbevar serum. Besøg 4: Slut på influenzasæson normalt april til maj (+ eller - 30 dage)
• Saml 10 ml størknet blod til serologi. Behandl blod og opbevar serum. ILI-begivenhedsstudiebesøg Studiedeltagere vil kontakte undersøgelsesteamet via e-mail eller telefon for at advare dem om, at en ILI-hændelse har fundet sted, og for at sørge for, at et medlem af undersøgelsesteamet henter podepinden og ILIef fra dem, så hurtigt som muligt efter det er blevet taget, til passende opbevaring (i en -80oC fryser), indtil den er testet. Hvis undersøgelsesdeltagerne er hjemme, når de udvikler ILI, vil de blive bedt om at gennemføre selv-podningen og ILef. Podepinden vil blive pakket i dobbeltsække og indsamlet af et medlem af forskerholdet i overensstemmelse med transportvejledningen udstedt i regeringens vejledning om COVID-19: sikker håndtering og behandling af prøver i laboratorier i overensstemmelse med UN3373, pakningsvejledning 650. Podninger vil blive leveret til UHL-virologilaboratoriet og behandlet i henhold til standarddriftsprocedurer (se afsnit 8.7.1).

Det vil blive gentaget over for undersøgelsesdeltageren, at resultaterne af disse podningsresultater vil blive e-mailet og ringet til dem sammen med de seneste råd om arbejdsmiljø. De vil blive bedt om at følge arbejdsmiljøpolitikken for ILI, mens de afventer resultaterne af podningen, sygemeldes på normal vis og kontakte deres praktiserende læge, hvis der er behov for yderligere lægerådgivning vedrørende denne nuværende sygdomsperiode.

Indholdet af ILIef vil blive indtastet i deltagerens case report form (CRF), ingen personlige oplysninger vil blive inkluderet. Disse detaljer vil blive brugt i fortolkningen af ​​viral sekventering og antistoftitre, udført ved WHO Melbourne.

Hvis undersøgelsesdeltageren er på arbejde, når de udvikler ILI, vil de blive bedt om at give en åndeprøve og maskeprøve til påvisning af influenza ved hjælp af nye metoder, inden de forlader arbejdet. Prøvematerialer vil blive bragt til det sted, hvor HCW er placeret, men hvis dette ikke kunne ske med det samme, ville HCW blive bedt om at følge arbejdsmiljørådene og gå hjem. Prøver indsamlet fra disse processer er beskrevet i afsnit 8.7.

Indlagt udåndingsprøve Indlagte patienter vil blive kontaktet i henhold til den sædvanlige UHL-infektionskontrolpolitik. Kun patienter, der har tilgængelige resultater for en nylig halspodning testet for almindelige respiratoriske patogener, vil blive kontaktet. COVID-19 positive afdelinger vil ikke blive involveret i rekruttering, i stedet vil indlagte patienter med influenza og andre luftvejsvira blive rekrutteret fra COVID-19 negative afdelinger. Patienter, der er bekræftet influenzapositive, behandles normalt i sideværelser i henhold til politikken. I alle tilfælde vil patienten ikke være forpligtet til at komme i kontakt med analyseudstyret, da udåndingsindfangning og analyseprocesser er adskilte. Maskeprøvetagning vil ikke blive foretaget på patienter, der har behov for iltbehandling via en ansigtsmaske. Når først et medlem af forskerholdet har givet sit samtykke til undersøgelsen, vil et medlem af forskerholdet henvende sig til patienten med de masker, sprøjter og mundstykker, der er nødvendige for udåndingsprøvetagning. En gentagen halspodning vil også blive taget på dette tidspunkt, så nøjagtig sammenligning kan finde sted mellem de nye diagnostiske metoder og nuværende praksis. Alle tre udåndingsprøvemetoder, hvor det er muligt, vil blive brugt. Når prøverne er indsamlet, vil de blive anbragt i en biologisk farepose og ført til analysemaskinerne. Podninger og maskeprøver vil blive transporteret til virologilaboratoriet på Leicester Royal Infirmary til behandling. Åndedrætsudstyret (sprøjter og engangsmundstykker) vil blive bortskaffet på normal vis til klinisk affald. TD-rør og Bio-VOC-prøveudtageren vil blive pakket i dobbeltposer og vil blive dekontamineret. Dette er det eneste studiebesøg, der kræves af indlagte patienter, og der kræves ingen yderligere opfølgning.

Selvpodninger. Podninger vil blive leveret til afdelingen for klinisk mikrobiologi på University Hospitals of Leicester NHS Trust, hvor de vil blive håndteret under Cat 2 (BSL-2) forhold. De vil blive hvirvlet, og podninger kasseres og forlader det inokulerede virustransportmedium (VTM). VTM-rørene vil blive testet på et standard diagnostisk assay (bruges rutinemæssigt til hospitalspatienttest) for at kontrollere tilstedeværelsen af ​​influenza (da mange forskellige luftvejsvira kan forårsage en 'influenzalignende sygdom'). Hvis der påvises influenza, vil en alikvot af denne VTM blive sendt til WHO Melbourne sammen med serumprøverne til viral sekventering af influenza. VTM vil blive transporteret til WHO-laboratoriet i henhold til UN3733/Kategori B-reglerne.

VOC-åndedrætsanalyse Alle tre analyseplatforme vil bruge den samme grundlæggende indsamlingstilgang. Deltagerne vil blive bedt om ikke at have spist eller drukket noget mindst 30 minutter før udåndingsprøvetagning. Inden prøvetagning skal de sluge deres mund med vand, som de derefter kan sluge - og giv derefter tre ikke-tvungne udåndingsprøver ved at puste ud i engangsmundstykker i 3-5 sekunder. Forskere vil bære PPE dikteret af lokal tillidspolitik ved UHL til indsamling af næse- og orale podninger. Kliniske engangshandsker vil blive brugt til alle procedurer. De analytiske apparater vil blive opbevaret på afdelingen eller i et forskningsområde væk fra direkte patientkontakt.

Til GC-IMS-analyse er mundstykket fastgjort til et 10 cm langt plastikrør. Når patienten ånder ud i røret, vil forskeren trække en åndeprøve i en 5 ml sprøjte halvvejs nede i røret.

Prøven vil derefter blive injiceret fra sprøjten af ​​forskeren i BreathSpecTM GC-IMS-enheden til analyse. Ethvert infektiøst materiale indeholdt i prøven vil blive ødelagt ved at blive opvarmet til over 60°C som en del af den analytiske proces.

eNose bruger en kommerciel CE-mærket åndedrætsenhed, Markes Bio-VOC. Enheden holder 129 ml ånde, kommer forseglet og åbnes kun, når den er klar til brug, og er til engangsbrug. Brugeren monterer et papmundstykke til enheden før prøveudtagning. Når patienten har pustet ind i enheden, fjernes mundstykket, og der tilføjes en sprøjtetilpasning, som forbindes til eNose. Sprøjten trykkes derefter ned, og prøven analyseres. Analysetiden er under 5 minutter. eNose-maskinen vil blive dekontamineret ved slutningen af ​​hver dags brug i henhold til producentens retningslinjer.

Til GC-MS-analyse udtages en yderligere udåndingsprøve igen ved at bruge Markes Bio-VOC-enheden som ovenfor. Når prøven er opsamlet, vil den blive overført til et termisk desorptionsrør (TD) (typisk 89 mm x 6,4 mm). De indvendige vægge af røret er belagt med et absorberende lag, hvortil åndekemikalier klæber. TD-røret placeres for enden af ​​Bio-VOC-enheden, og opfanget luft skubbes gennem røret. Når de er færdige, forsegles enderne af rørene med endehætter. En valideret dekontamineringsproces udføres derefter for Bio-VOC-prøvetageren og TD-rørene gennem en lang/høj varmecyklus for at sikre, at virussen dræbes. De dekontaminerede TD-rør vil blive opbevaret i opbevaringskasser i forskningsområdet i Leicester Royal Infirmary til transport til University of Warwick til analyse og endelig bortskaffelse i henhold til en foruddefineret materialeoverførselsaftale.

Resultaterne af GC-IMS-analysen vil blive uploadet regelmæssigt fra BreathSpecTM til et DataSync-delt drev og downloadet af analytikere ved University of Warwick. Ingen identificerbare data vil blive knyttet til disse data, kun et undersøgelsesnummer.

Maskeprøvetagning Maskeprøvetagning består af deltagere, der bærer en modificeret ansigtsmaske (flad kirurgisk, andenæb eller FFP1), som indeholder op til 5 strimler af 3D-printet polyvinylalkohol (PVA) i op til 60 minutter, mens de bliver observeret af et medlem af forskerholdet. Efterforskerne vil give uddannelse, støtte og personligt beskyttelsesudstyr til forskningspersonale, der får prøver og aftaler protokoller for lokal behandling. Før brug steriliseres maskerne og opbevares i forseglede prøveposer, når de er båret, lægges de tilbage i disse poser og forsegles. De vil blive transporteret til UHL Virology Laboratory i overensstemmelse med gældende risikovurderinger og standarddriftsprocedurer vedrørende transport af farlige materialer. Viralt RNA vil blive ekstraheret og kvantificeret fra PVA-strimlerne i maskerne ved hjælp af real-time kvantitativ PCR. Forarbejdningen af ​​PVA-strimlerne kræver, at de opløses i vand, hvorfra RNA-viruset udvindes og analyseres ved hjælp af molekylære metoder. Maskerne og poserne vil blive ødelagt.

Serumtest og viral sekventering På hver af de planlagte dage, der kræver serumprøver, vil det størknede blod blive opbevaret ved 2oC til 8oC og centrifugeret inden for 24 timer på Research Space, LRI. Sera vil blive opbevaret i cryovials, med alle kryovialer mærket med deltagerens undersøgelsesnummer, besøgsnummer og dato for afhentning på Research Space, LRI. Prøver vil blive opbevaret frosset ved -80 oC indtil afsendelse. Et sæt kryovials vil blive sendt til WHO's referencelaboratorium i Melbourne, når alle prøver er blevet indsamlet. Det andet sæt kryovialer vil blive opbevaret som en sikkerhedsforanstaltning i tilfælde af transportproblemer. Med deltagerens samtykke vil alle ubrugte serumprøver blive opbevaret til fremtidig etisk godkendt forskning og delt med andre forskningssamarbejdspartnere i andre akademiske institutioner og industripartnere i og uden for Storbritannien til fremtidig forskning. Serum vil blive brugt til hæmagglutinationshæmning og mikroneutraliseringsassays, og når alle prøver er blevet behandlet, vil resultaterne blive sendt tilbage til forskerholdet i Leicester.

Hæmagglutinationshæmning (HAI) og mikroneutralisering (MN) assays vil sammen med influenzavirussekventering blive udført på WHO Collaborating Center for Reference and Research on Influenza (VIDRL), Peter Doherty Institute for Infection and Immunity, 792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC 3000, Australien.