Rozšíření našeho chápání účinnosti včasné a pozdní vakcíny proti chřipce (BELIEVE)

Nábor, prověřování a posuzování způsobilosti

Potenciální účastníci (University Hospitals of Leicester NHS Trust, zaměstnanci UHL) budou kontaktováni e-mailem, aby studii inzerovali a vysvětlili. E-mail bude součástí rutinních e-mailů o očkování proti sezónní chřipce, které jsou rozesílány každý rok, aby připomněly zaměstnancům UHL, že mají být imunizováni. Kromě toho budou vyšetřovatelé inzerovat prostřednictvím plakátů v místech s vysokým provozem personálu, např. restauraci a náš tým pro ochranu zdraví při práci bude pomáhat s touto reklamou studie. Vyšetřovatelé očekávají, že někteří zdravotničtí pracovníci (HCW) se o studii dozvědí ústním podáním.

Studie bude mít dvě fáze náboru. Na měsíc září pro skupinu „včasného“ očkování a od poloviny listopadu do poloviny prosince pro skupinu „pozdního“ očkování – přesné načasování se může lišit v závislosti na tom, kdy byly obdrženy inaktivované vakcíny proti chřipce a na sezónnosti viru. , protože veškerý nábor bude dokončen před začátkem chřipkové sezóny. Přidělení do dvou vakcinačních skupin nebude náhodné; bude na rozhodnutí HCWs, zda chtějí očkování buď brzy, nebo pozdě. Do každé skupiny bude rekrutováno maximálně 200 HCWs.

Jednotlivci, kteří projeví zájem o účast ve studii, obdrží informační list buď osobně, nebo e-mailem. Poté jim výzkumníci poskytnou tolik času, kolik potřebují, aby se rozhodli, zda se studie zúčastní či nikoli. Pokud jednotlivec souhlasí s účastí, člen výzkumného týmu prověří a potvrdí způsobilost. Účastníci budou přijati pouze v případě, že budou splněna všechna kritéria. V této době budou přijata opatření, aby se zaměstnanci zúčastnili úvodní schůzky ve výzkumném prostoru na LRI. Nábor do výzkumné oblasti bude v souladu se současnými opatřeními pro sociální distancování platnými v UHL.

Při této úvodní schůzce bude zaměstnancům ve skupinách vysvětlena studie. Člen výzkumného týmu si poté vyžádá písemný informovaný souhlas, jak je podrobně popsáno níže, od každého HCW jednotlivě. Pokud má jednotlivec další otázky týkající se studie, jiný člen studijního týmu bude moci podpořit a usnadnit informovaný souhlas.

Nábor hospitalizovaných pacientů Lékaři na akutních lékařských odděleních budou informováni před začátkem chřipkové sezóny prostřednictvím e-mailu a plakátů v klinických oblastech o studii zahrnující hospitalizované pacienty s (chřipce podobným onemocněním) ILI. Virologické oddělení University Hospitals of Leicester běžně volá klinický tým pozitivních případů chřipky u hospitalizovaných pacientů během chřipkové sezóny. Když pak klinický tým půjde pacientovi vysvětlit tuto diagnózu, také ho upozorní na studii a poskytne mu informační leták pro účastníky. Poté vyšetřovatelé poskytnou pacientovi tak dlouho, jak bude potřebovat, aby se rozhodl, zda se studie zúčastní či nikoli. Pokud jednotlivec souhlasí s účastí, bude o tom informovat člena klinického týmu, který poté uvědomí výzkumný tým. Člen výzkumného týmu se dostaví na oddělení, aby prověřil a potvrdil způsobilost. Účastníci budou přijati pouze v případě, že budou splněna všechna kritéria. Na základě laboratorních výsledků bude stejným způsobem jako kontrolní skupina vybráno také dvacet hospitalizovaných pacientů s potvrzenými výtěry negativními na chřipku.

Studijní návštěvy

Následující činnosti budou provedeny při každé návštěvě a zaznamenány do CRF:

Návštěva 1: Základní návštěva

• Účastníci budou zapsáni, pokud splní kritéria pro zařazení a vyloučení a dají plně informovaný písemný souhlas.
• Účastníkům pak bude přiděleno studijní číslo
• Účastníci vyplní krátký dotazník, který bude obsahovat demografické informace: věk, pohlaví, etnickou příslušnost, pracovní roli, zdravotní komorbidity, pravidelné užívání léků, historii kouření, chřipkové infekce a vakcínu proti chřipce.
• Odeberte 10 ml sražené krve před imunizací pro základní protilátky. Zpracujte krev a skladujte sérum pro sérologické testy. Vakcína proti chřipce bude aplikována běžným způsobem.
• Účastníci dostanou teploměr, dvě chřipkové samoodběrové sady (tj. ILI). ILI bude definována podle definice případu WHO jako horečka >37,8oC a kašel s nástupem během posledních 10 dnů. Bude jim ukázáno, jak ovládat teploměr, vzít si vlastní výtěr (tj. výtěr z krku) a jak tampon zajistit ve zkumavce na odběr vzorků. Bude jim také ukázáno, jak vyplnit formulář události ILI (ILIef) – stručně zaznamenat načasování a povahu jejich symptomů/příznaků ILI.

Návštěva 2: 3 týdny po základní návštěvě (+ nebo - 7 dní)

• Odeberte 10 ml sražené krve pro sérologii. Zpracujte krev a skladujte sérum.
• Účastníci budou požádáni, aby poskytli vzorky dechu, což bude sloužit jako kontrola, se kterou budou porovnány vzorky dechu, které se vyskytly během ILI. Návštěva 3: Vrchol chřipkové sezóny obvykle leden až únor (+ nebo - 30 dní)
• Odeberte 10 ml sražené krve pro sérologii. Zpracujte krev a skladujte sérum. Návštěva 4: Konec chřipkové sezóny obvykle duben až květen (+ nebo - 30 dní)
• Odeberte 10 ml sražené krve pro sérologii. Zpracujte krev a skladujte sérum. Studijní návštěva události ILI Účastníci studie budou kontaktovat studijní tým e-mailem nebo telefonicky, aby je upozornili, že došlo k události ILI, a aby zařídili, aby si člen studijního týmu od nich vyzvedl výtěr a ILIef, jakmile to bude možné. odebrané, pro vhodné skladování (v mrazáku -80oC) až do testování. Pokud jsou účastníci studie doma, když se u nich rozvine ILI, budou požádáni, aby provedli vlastní výtěr a ILef. Výtěr bude zabalen do dvojitého sáčku a odebrán členem výzkumného týmu v souladu s pokyny pro přepravu vydanými v pokynech vlády k COVID-19: bezpečná manipulace a zpracování vzorků v laboratořích v souladu s UN3373, pokyny pro balení 650. Výtěry budou doručeny do virologické laboratoře UHL a zpracovány podle standardních operačních postupů (viz kapitola 8.7.1).

Účastníkovi studie bude zopakováno, že výsledky těchto výtěrů mu budou zaslány e-mailem a telefonicky spolu s nejnovějšími radami ohledně ochrany zdraví při práci. Bude jim doporučeno, aby dodržovali zásady ochrany zdraví při práci pro ILI během čekání na výsledky výtěru, hlásili nemoc normálním způsobem a kontaktovali svého praktického lékaře, pokud je potřeba další lékařská pomoc ohledně tohoto aktuálního období nemoci.

Obsah ILIef bude zapsán do formuláře pro hlášení případů účastníků (CRF), nebudou zahrnuty žádné osobní údaje. Tyto podrobnosti budou použity při interpretaci virového sekvenování a titrů protilátek provedených ve WHO v Melbourne.

Pokud je účastník studie v době, kdy se u něj objeví ILI, bude požádán, aby před odchodem z práce poskytl vzorek dechu a vzorek masky pro detekci chřipky pomocí nových metod. Materiály k odběru vzorků budou přivezeny tam, kde sídlí HCW, ale pokud by se tak nemohlo stát ihned, bylo by HCW řečeno, aby se řídil radami ochrany zdraví při práci a šel domů. Vzorky odebrané z těchto procesů jsou podrobně popsány v části 8.7.

Vzorek dechu hospitalizovaného pacienta K hospitalizovaným pacientům se bude přistupovat v souladu s běžnou politikou kontroly infekce UHL. Budou osloveni pouze pacienti, kteří mají k dispozici výsledky nedávného výtěru z krku testovaného na běžné respirační patogeny. COVID-19 pozitivní oddělení nebudou zapojena do náboru, místo toho budou hospitalizovaní pacienti s chřipkou a jinými respiračními viry přijímáni z COVID-19 negativních oddělení. Pacienti, kteří jsou potvrzeni jako pozitivní na chřipku, jsou obvykle ošetřováni ve vedlejších pokojích podle zásad. Ve všech případech nebude nutné, aby pacient přišel do kontaktu s analytickým zařízením, protože proces zachycení dechu a analytické procesy jsou oddělené. Vzorky masky nebudou prováděny u pacientů, kteří vyžadují kyslíkovou terapii přes obličejovou masku. Po souhlasu se studií jeden člen výzkumného týmu přistoupí k pacientovi s maskami, stříkačkami a náustky potřebnými pro odběr vzorku dechu. V této době bude také proveden opakovaný výtěr z krku, aby bylo možné provést přesné srovnání mezi novými diagnostickými metodami a současnou praxí. Kde je to možné, budou použity všechny tři metody odběru vzorků dechu. Jakmile budou vzorky odebrány, budou umístěny do vaku pro biologické nebezpečí a přeneseny do analytických strojů. Tampony a vzorky masek budou přepraveny ke zpracování do virologické laboratoře v Leicester Royal Infirmary. Zařízení pro zachycení dechu (stříkačky a jednorázové náustky) bude zlikvidováno běžným způsobem jako klinický odpad. Zkumavky TD a vzorkovač Bio-VOC budou zabaleny do dvojitých pytlů a budou dekontaminovány. Toto je jediná studijní návštěva vyžadovaná hospitalizovanými pacienty a není vyžadováno žádné další sledování.

Vlastní výtěry Výtěry budou doručeny na Oddělení klinické mikrobiologie Univerzitní nemocnice Leicester NHS Trust, kde se s nimi bude zacházet za podmínek kategorie 2 (BSL-2). Budou promíchány na vortexu a tampony zlikvidovány a ponechány na inokulovaném virovém transportním médiu (VTM). Zkumavky VTM budou testovány standardním diagnostickým testem (běžně používaným pro testování pacientů v nemocnici), aby se zjistila přítomnost chřipky (protože mnoho různých respiračních virů může způsobit „chřipce podobné onemocnění“). Pokud je detekována chřipka, pak bude alikvot tohoto VTM odeslán do WHO Melbourne spolu se vzorky séra pro virové sekvenování chřipky. VTM bude přepravena do laboratoře WHO podle předpisů UN3733/kategorie B.

Analýza dechu VOC Všechny tři analytické platformy budou používat stejný základní přístup k odběru. Účastníci budou požádáni, aby alespoň 30 minut před odběrem dechu nic nejedli ani nepili. Před odběrem vzorku vypláchnou ústa vodou, kterou pak mohou spolknout - a poté poskytnou tři vzorky nenuceného dechu vydechováním do jednorázových náustků po dobu 3-5 sekund. Výzkumníci budou nosit OOP diktované místní politikou důvěry v UHL pro odběr nosních a ústních výtěrů. Pro všechny procedury budou použity jednorázové klinické rukavice. Analytické přístroje budou umístěny na oddělení nebo ve výzkumné oblasti mimo přímý kontakt s pacientem.

Pro analýzu GC-IMS je náustek připojen k 10 cm dlouhé plastové trubici. Když pacient vydechuje do zkumavky, výzkumník nasaje vzorek dechu do 5ml injekční stříkačky v části zkumavky.

Vzorek pak výzkumník vstříkne ze stříkačky do zařízení BreathSpecTM GC-IMS za účelem analýzy. Jakýkoli infekční materiál obsažený ve vzorku bude zničen zahřátím na více než 60 °C jako součást analytického procesu.

eNose používá komerční jednotku pro zachycení dechu označenou CE, Markes Bio-VOC. Jednotka pojme 129 ml dechu, je dodávána zapečetěná a otevřená pouze tehdy, když je připravena k použití, a je jednorázová. Před odběrem vzorků uživatel nasadí do jednotky kartonový náustek. Jakmile se pacient nadechne do jednotky, náustek se odstraní a přidá se stříkačka, která se připojí k eNose. Stříkačka se potom stlačí a vzorek se analyzuje. Doba analýzy je pod 5 minut. Stroj eNose bude na konci každého dne používání dekontaminován podle pokynů výrobce.

Pro analýzu GC-MS se opět odebere další vzorek dechu pomocí jednotky Markes Bio-VOC, jak je uvedeno výše. Jakmile je vzorek odebrán, bude přenesen do zkumavky pro tepelnou desorpci (TD) (typicky 89 mm x 6,4 mm). Vnitřní stěny trubice jsou potaženy absorpční vrstvou, na kterou ulpívají dýchací chemikálie. Trubice TD je umístěna na konci jednotky Bio-VOC a zachycený vzduch je protlačován trubicí. Po dokončení se konce trubek utěsní koncovými uzávěry. Poté se provede validovaný proces dekontaminace pro vzorkovač Bio-VOC a zkumavky TD dlouhým/vysokým tepelným cyklem, aby se zajistilo usmrcení viru. Dekontaminované TD zkumavky budou uchovávány ve skladovacích boxech ve výzkumné oblasti Leicester Royal Infirmary pro přepravu na University of Warwick k analýze a konečné likvidaci v souladu s předem definovanou dohodou o transferu materiálu.

Výsledky analýzy GC-IMS budou pravidelně odesílány z BreathSpecTM na sdílený disk DataSync a stahovány analytiky z University of Warwick. S těmito údaji nebudou spojena žádná identifikovatelná data, pouze číslo studie.

Vzorkování masky Vzorkování masky spočívá v tom, že účastníci nosí upravenou obličejovou masku (plochou chirurgickou, duckbilled nebo FFP1), která obsahuje až 5 proužků 3D tištěného polyvinylalkoholu (PVA) po dobu až 60 minut, přičemž je pozoruje člen výzkumného týmu. Vyšetřovatelé poskytnou školení, podporu a osobní ochranné prostředky výzkumnému personálu, který získá vzorky, a dohodnou protokoly pro místní zpracování. Před použitím jsou masky sterilizovány a uchovávány v uzavřených vzorkových sáčcích, jakmile jsou nasazeny, jsou umístěny zpět do těchto sáčků a uzavřeny. Budou převezeny do virologické laboratoře UHL v souladu s aktuálním hodnocením rizik a standardními provozními postupy týkajícími se přepravy nebezpečných materiálů. Virová RNA bude extrahována a kvantifikována z proužků PVA v maskách pomocí kvantitativní PCR v reálném čase. Zpracování proužků PVA vyžaduje jejich rozpuštění ve vodě, ze které je extrahován RNA virus a analyzován pomocí molekulárních metod. Masky a tašky budou zničeny.

Testování séra a virové sekvenování V každý z plánovaných dnů vyžadujících vzorky séra bude sražená krev skladována při 2oC až 8oC a centrifugována do 24 hodin ve Research Space, LRI. Séra budou uložena v kryozkumavkách, přičemž všechny kryozkumavky budou označeny číslem studie účastníka, číslem návštěvy a datem odběru ve Research Space, LRI. Vzorky budou až do odeslání skladovány zmrazené při -80 oC. Jedna sada kryozkumavek bude odeslána do referenční laboratoře WHO v Melbourne, jakmile budou odebrány všechny vzorky. Druhá sada kryozkumavek bude uložena jako bezpečnostní opatření pro případ problémů s přepravou. Se souhlasem účastníka budou všechny nepoužité vzorky séra uloženy pro budoucí eticky schválený výzkum a sdíleny s dalšími výzkumnými spolupracovníky v jiných akademických institucích a průmyslovými partnery ve Velké Británii i mimo ni pro budoucí výzkum. Sérum bude použito pro testy inhibice hemaglutinace a mikroneutralizace a jakmile budou všechny vzorky zpracovány, výsledky budou zaslány zpět výzkumnému týmu v Leicesteru.

Testy inhibice hemaglutinace (HAI) a mikroneutralizace (MN) spolu se sekvenováním viru chřipky budou prováděny ve spolupracujícím centru WHO pro referenční a výzkum chřipky (VIDRL), Peter Doherty Institute for Infection and Immunity, 792 Elizabeth Street, Melbourne, VIC 3000, Austrálie.