機能性便秘患者におけるアガベ・テキーラナ・ウェーバー・アズールとオオバコのサプリメントの評価 (SATWAVPP)

これは、機能性便秘の被験者におけるブルー アガベ フルクタン テキーラナ ウェーバー摂取の第 III 相有効性を判断するための前向き、無作為化、対照、単一盲検試験です。

これを達成するために、18 歳以上の患者の年齢を含めることが計画されています。 (下の表を参照)。

私たちの研究の段階は、研究における健康に関する一般法規則の第II章「薬理学的研究について」の第66条に基づいて指定されており、これは第III相研究を定義しています。患者（通常は外部）は、ITSの治療的有用性を定義し、薬理効果を変える可能性のある有害反応、相互作用、および外部要因を特定します。

施設の患者は、便秘患者のためのプロトコル作成に参加するよう招待された後に呼び出されます。 登録されておらず、選択基準を満たす患者も参加できます。

実施される研究は説明され、読み上げられ、必要に応じて'、インフォームドコンセントは、適格性の最初の訪問（訪問1）中に患者によって署名されます。 1つは機能性便秘（FC）のROME III基準を満たしているかどうかを判断するために会い、もう1つは患者が過敏性ROME III腸症候群（IBS）の基準を満たしていない場合に評価し、ベースラインの呼気検査が行われます。

さらに、無作為化の少なくとも2か月前に中断する必要がある繊維サプリメントと下剤の以前の使用が評価されます。

被験者は、完全な身体評価のために2回目の訪問（訪問2）（患者が下剤または繊維サプリメントを服用しているかどうかによって異なります）に戻り、繊維摂取日誌を評価して、食事中の繊維摂取量を決定します避難日誌だけでなく、SmartPill©が与えられ、カプセルが避難した後、患者はデータを登録するために病院に戻ります。

患者は 1 週間後 (来院 3) に 12 時間の断食で戻り、繊維摂取量と避難日誌が再評価され、栄養士によって再び評価されます。 新しい呼気検査が実施されます。 対象者は、SF-36 生活の質アンケートに記入するよう求められます。 空腹時グルコース、グリコシル化ヘモグロビンA1c、インスリン、および全脂質プロファイルを決定するための血液サンプルに加えて、ITS分析のために便サンプルが収集されます。

被験者は無作為に割り付けられ、オオバコ15g、5、10gの用量のブルーアガベテキーラナウェーバーフルクタン、および5gの用量のブルーアガベテキーラナウェーバーフルクタン+ 33の濃度の賦形剤10gの4つの治療のいずれかを受ける青いリュウゼツラン フルクタン テキーラナ ウェーバーの %。

無作為化は参加番号を使用してコンピューターで生成され、治療の割り当ては連続します。

製品は同一のボトルで提供され、同じ量の粉末が容器に入っています。これは、プロトコルの名前と患者番号でのみ識別できます。

患者には、各用量 (それぞれ 5、10、および 15g) に必要な量の製品を投与するための計量スプーン、または正確な計量量が入った封筒が提供されます。

患者は、食事の日記、避難の日記、および悪影響を評価するためのシートを保管するように指示されます。 被験者は、12時間の断食で月末±5日に戻り（訪問4）、治療の割り当てに従って毎日必要なグラム数を差し引いた容器内の製品重量によって、彼らの順守が評価されます。

繊維摂取日誌は栄養士によって再度評価され、避難も評価日誌になります。 質問と身体的評価を含む医学的評価が実施されます。 その後、血液サンプルを採取して空腹時血糖値、グリコシル化ヘモグロビン A1c、インスリンおよび脂質プロファイルを測定し、排泄物の全サンプルを採取して SmartPill® を投与します。

患者は同じ容器のサプリメントを継続し、1 か月後に予定されます。 治療終了時の訪問 (訪問 5) では、繊維は栄養士によって再び EVALUATED 日誌の消費となり、避難も EVALUATED 日誌となります。

質問と身体的評価を含む医学的評価が実施され、容器内の製品の重量を量ることによって評価され、グラム数を差し引いて、治療割り当てまたは空の封筒の患者による配達に従って毎日必要とされる使用済み。

続いて、血液サンプルは、得られた空腹時グルコース、グリコシル化ヘモグロビンA1c、インスリンおよび脂質プロファイルを決定するためのものであり、完全なサンプルが収集され、最後に呼気検査が実施される.

治療を中止してから1か月後に実施される訪問の終わりに、避難が評価され、便のサンプルが収集され、それとともに研究の一部への介入が終了します。 合計 各患者のフォローアップ期間は 3 か月で、使用する繊維の効果を観察して比較するのに十分な時間です。 言及することは重要です 同じチームによって実行され、ブルーアガベテキーラナウェーバーフルクタンを使用して実施された最近の研究では、摂取の最初の週から腸内輸送への影響が観察されており、実際、これは研究に焦点を当てる理由の1つです機能性便秘と腸管通過。

呼気試験:

訪問1および5で無作為化された患者で以前に吐き出された水素およびメタン濃度を測定するために、呼気検査が実施されます。

呼気試験を実施するために、Quintron® Breath-tracker ブランドのガスクロマトグラフィー装置が使用されます。

そのために、患者は尋ねられます：

• 数週間前に抗生物質を服用しないでください 少なくともテストまで。
• テストの 24 時間前に、繊維とでんぷんが豊富な食品の摂取を停止します。
• アルコールや喫煙をしない
• 最低8時間は断食する
• テストを開始する前と測定の実行中に口腔衛生を実行します。

この検査は 3 時間続きます。その間、患者は実験施設の運動能力を離れることはできず、あまり話すことも眠ることもできません。 この間、呼気サンプルを 15 分ごとに採取します。

SmartPill®:

SmartPill® テストは、来院 2 および 4 で実施されます。

大腸内視鏡検査:

新たに便秘と診断された 55 歳以上の患者、またはこの年齢層で排便習慣の変化が観察された患者を精査するツールです。 この基本的な目的は、潜在的に深刻な病気を除外し、調査研究中にこれらの診断を遅らせないことです。 1回の大腸内視鏡検査では、便秘を持ち、次のいずれかの特徴を持つすべての患者が使用されます。

1. 1年未満の便秘の診断
2. -過去3年間に大腸内視鏡検査を受けていない55歳以上の被験者 研究への参加
3. 慢性的だが警告データあり (: 原因不明の体重減少、6 か月未満の最近の経直腸出血、最近の排便パターンの変化の例) 便秘

患者には以下が含まれます：

繊維サプリメント（オオバコ、プラム8）を使用した研究では、グループ間の違いを見つけるために、グループごとに25〜30人の患者が含まれています.

合計で、次のように無作為化された 60 人の患者を含める予定です: 15 人の患者が 5 g のフルクタン ブルー アガベ テキーラナ ウェーバーの投与を受け、15 人の患者が 10 g の投与を受け、15 人の患者が 5 g のアガベ フルクタン ブルー テキーラナ ウェーバー + 10 の投与を受けましたgの賦形剤と15人の患者が15gのオオバコオオバコを受け取りました。

ガスクロマトグラフィー：（短鎖脂肪酸AGCCの測定）

イオン検出器のフレームを決定するための AGCC が使用されます。 次の手順が実行されます。

1. 1gの糞便に50uLの酪酸エチルを加える
2. 塩酸1mLを加えた。
3. 3000 g で 10 分間遠心分離します。 上澄みを除去した。
4. 続いて、３００μＬのＮ－メチルジブチルシリルトリフルオロアセトアミド（ＭＴＢＳＴＦＡ）を添加する。
5. 80℃で20分間溶液を加熱します。
6. 室温で 24 時間静置して、乳酸の完全な誘導体化を確実にしました。
7. 特定のサンプル用に開発された方法に従って、ガスクロマトグラフィーによるサンプルの分析が行われます。

糞便からの DNA の抽出、PCR 増幅、および細菌の 16S rRNA 配列決定:

RRNA シーケンシングは、高い分類学的関係 (ジェンダー アップ レベル) を決定するための最適な方法です。 16S rRNA 分子には可変性の高い領域が含まれているため、通常、1 つの細菌種に完全に固有の 20 ～ 30 塩基の領域を見つけることができます。

分析を実行するには、無菌のプラスチック容器である糞便検体を収集します。 収集後すぐに、サンプルは 2 ～ 8 の氷のバケツで実験室に運ばれ、処理されるまで -73 ° C で凍結されます。

DNA抽出は、自動化プロセスの前に簡単な初期変更を加えて、自動化された方法NucliSENS®easyMAG®（BioMerieux、Durham、NC、USA）の指示に従って実行されました。 各サンプルの 200 mg の糞便を秤量し、0.3 mL のリン酸緩衝生理食塩水 (8 mM Na2HPO4、137 mM NaCl、2.7 mM KCl、1.5 mM KH2PO4 および) に懸濁し、30 秒間激しく攪拌します。 １００μｌの懸濁液を１５分間沸騰させ、直ちに氷上で０℃で凍結させた。 細菌ホモジネートを１３，０００ｇで１０分間遠心分離し、上清を５００μｌのチューブに集める。

この標本は、自動化された装置での DNA の分離に使用されます。 Light Cycler-(Roche) 装置を使用して、以前のレポートに記載されているように細菌の PCR 増幅リアルタイム 16S rRNA を実行します。

説明されている主要なカテゴリの細菌門の定量化: 1) Firmicutes、2) Bacteroidetes、3) Actinobacterias、4) Proteobacteria。 これは、前述のプライマーおよび条件を使用したリアルタイムでの定量的 PCR の方法によって行われ、pR は、前述の細菌 16S rRNA 集団グループの特定のフラグメントを増幅します。 バーコード 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) および 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) と呼ばれるプライマーを使用して、16S rRNA フラグメント V6 バクテリア V6 を増幅します。

増幅断片の配列決定および分析は、蛍光配列決定装置ターミネーター 3130 / 遺伝子分析装置 (Applied Biosystems) による。

PCR産物は配列決定および分析され、種の同定のためにGenBankに提出されます。

ビフィズス菌と乳酸菌の集団の選択的増殖と便中の短鎖脂肪酸の発生が予想されるため、アガベ繊維のプレバイオティクス効果を実証するために使用される細菌DNAの抽出と細菌種の定量。

したがって、機能特性と便秘への影響に加えて、アガベ フルクタンのプレバイオティクス効果を確認できます。