Utvärdering av ett tillskott av Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago hos patienter med funktionell förstoppning (SATWAVPP)

Detta är en prospektiv, randomiserad, kontrollerad och singelblind studie för att fastställa fas III-effekten av Tequilana Weber-intaget av blå agavefruktaner hos personer med funktionell förstoppning.

För att uppnå detta är det planerat att inkludera över 18 år. Patienternas ålder. Uppfylla WHO samt inklusionskriterier Rom III-kriterierna för funktionell förstoppning. (Se tabellen nedan).

Fasen i vår studie är betecknad baserat på artikel 66 i kapitel II "Om farmakologisk forskning" i förordningen om den allmänna lagen om hälsa i forskning som definierar FAS III-studier Följer som: Det är administrering av ett forskningsläkemedel till stora grupper av Patienter (vanligtvis externa), för att definiera ITS terapeutisk användbarhet och identifiering identifiera biverkningar, interaktioner och externa faktorer som kan förändra den farmakologiska effekten.

Patienter vid institutet kommer att kallas efter inbjudningar att delta i utformningen av ett protokoll för patienter med förstoppning. Patienter som inte har registrerats och uppfyller inklusionskriterierna kan också delta.

Studien som ska genomföras kommer att förklaras och läsas och, där så är lämpligt', kommer det informerade samtycket att undertecknas av patienten. Under det första besöket (besök 1) av behörighet, där försökspersonen kommer att ges 2 frågeformulär (se bilagor), en De uppfyller för att avgöra om ROME III-kriterierna för funktionell förstoppning (FC) och en annan för att BEDÖMA om patienten inte uppfyller kriterierna för irritabelt ROME III-tarmsyndrom (IBS) och ett baseline-andningstest kommer att utföras.

Dessutom kommer den tidigare användningen av fibertillskott och laxermedel, som måste avbrytas minst 2 månader före randomisering, utvärderas.

Försökspersonen kommer att återvända till ett andra besök (besök 2) (vilket beror på om patienten tar laxermedel eller fibertillskott) för en fullständig fysisk utvärdering och fiberintagsdagboken kommer att bedömas för att bestämma mängden fiberintag i kosten samt evakueringsdagboken och SmartPill © kommer att ges och på så sätt kommer patienten att återvända till sjukhuset för att registrera data efter att kapseln har evakuerats.

Patienten kommer tillbaka en vecka senare (besök 3) på 12 timmars fasta, fiberintaget och evakueringsdagböckerna kommer att omvärderas och utvärderas igen av en nutritionist. Ett nytt utandningstest kommer att genomföras. Ämnet kommer att bli ombedd att fylla i SF-36 Quality of Life Questionnaire. Ett avföringsprov kommer att tas för ITS-analys utöver ett blodprov för bestämning av fasteglukos, glykosylerat hemoglobin A1c, insulin och full lipidprofil.

Försökspersonerna kommer att randomiseras för att få en av fyra behandlingar som kan vara Psyllium plantago 15g, blå agave Tequilana Weber fruktaner i doser på 5, 10 g och blå agave Tequilana Weber fruktaner i en dos av 5 g + 10 g hjälpämne för en koncentration av 33 % av blå agavefruktaner Tequilana Weber.

Randomiseringen kommer att vara datorgenererad med ett deltagarnummer och tilldelningen av behandlingen kommer att ske fortlöpande.

Produkten kommer att levereras i identiska flaskor med samma mängd pulver i en behållare som endast kommer att kunna identifieras med namnet på protokollet samt patientens nummer.

Patienten kommer att förses med en mätsked för att administrera den mängd produkt som är nödvändig för var och en av doserna (5, 10 respektive 15 g) eller med kuvert som innehåller de exakta vägda mängderna.

Patienten kommer att instrueras att föra en dagbok över kosten, över evakueringarna och ett blad för att BEDÖMA biverkningar. Försökspersonen kommer att återvända (besök 4) i slutet av en månad ± 5 dagar på en 12 timmars fasta och deras vidhäftning kommer att bedömas av produktens vikt i behållaren subtrahera antalet gram som krävs dagligen ENLIGT tilldelningen av behandlingen.

Fiberintagsdagböckerna utvärderas igen av nutritionisten, evakueringen kommer även att UTVÄRDERAS dagbok. En medicinsk utvärdering kommer att genomföras som inkluderar förhör och fysisk utvärdering. Därefter kommer ett blodprov att bestämma erhållet fasteglukos, glykosylerat hemoglobin A1c, insulin och lipidprofil och ett fullständigt prov av exkrementer kommer att erhållas och SmartPill® kommer att ges.

Patienten kommer att fortsätta med tillägget i samma behållare och kommer att planeras till en månad senare. I slutet av behandlingsbesöket (besök 5) kommer fibern att utvärderas journalförbrukning igen av en nutritionist och evakueringen kommer att utvärderas dagbok också.

En medicinsk utvärdering kommer att genomföras som inkluderar förhör och fysisk utvärdering och deras vidhäftning kommer att bedömas genom att väga produkten i behållaren, subtrahera antalet gram som den kräver dagligen ENLIGT behandlingsuppdraget eller leverans av patienten av de tomma kuverten Begagnade.

Därefter kommer ett blodprov att bestämma erhållen fasteglukos, glykosylerat hemoglobin A1c, insulin- och lipidprofil och ett fullständigt prov kommer att tas avföring och utandningstest i slutet kommer att utföras.

För avslutande av besöket, vilket kommer att utföras en månad efter avslutad behandling, kommer evakueringen att utvärderas dagbok och ett avföringsprov kommer att samlas in och med det avslutas interventionen i den del av studien. Totalt Uppföljningstiden för varje patient kommer att vara 3 månader, tillräckligt med tid för att observera och jämföra effekten av fibrerna som ska användas. Det är viktigt att nämna att i nyare studier utförda av samma team och med blå agave Tequilana Weber-fruktaner, har effekter på tarmtransit observerats från den första veckan av intag, i själva verket är detta en av anledningarna till att fokusera studien på funktionell förstoppning och tarmpassage.

Andningstest:

Ett utandningstest kommer att utföras för att mäta väte- och metankoncentrationer som tidigare andats ut hos patienter som randomiserats vid besök 1 och 5.

För att utföra utandningstestet kommer gaskromatografiutrustning att användas, märket Quintron® Breath-tracker.

För det kommer patienterna att tillfrågas:

• Att inte ta antibiotika tidigare veckor Åtminstone till testet.
• Stoppa intaget av mat rik på fibrer och stärkelse 24 timmar före testet.
• Att inte ta alkohol eller röka
• Ha minst 8 timmars fasta
• Utför munhygien innan du startar testet och under utförandet av mätningarna.

Detta test varar i 3 timmar, under vilken patienten inte kan lämna laboratoriets motilitet, kan inte prata för mycket eller sova. Utandningsluftprover tas var 15:e minut under denna period.

SmartPill®:

SmartPill®-test kommer att genomföras vid besök 2 och 4.

Koloskopi:

Är ett verktyg som kommer att bli föremål för granskning av patienter ≥55 år med nydiagnostiserad förstoppning eller de där förändringar i tarmvanor observerats i denna åldersgrupp. Detta grundläggande mål är att utesluta potentiellt allvarliga sjukdomar och att inte fördröja diagnosen av dessa under forskningsstudien. en koloskopisk studie kommer alla patienter som har förstoppning och någon av följande egenskaper att användas:

1. Diagnos av förstoppning mindre än 1 år
2. Försökspersoner ≥55 år som inte har genomgått koloskopisk utvärdering under de senaste 3 åren före studiestart
3. Kronisk men med larmdata (: Oförklarad viktminskning, nyligen genomförd transrektal blödning <6 månader, nyligen genomförda förändringar i exempel på avföringsmönstret) Förstoppning

Patienter inkluderar:

Studier med fibertillskott (Psyllium, Plums8) har inkluderat 25 till 30 patienter per grupp för att hitta skillnader mellan grupperna.

Totalt är det planerat att inkludera 60 patienter randomiserade enligt följande: 15 patienter får fruktan blå agave Tequilana Weber dos på 5 g, 15 patienter fick dosen 10 g, 15 patienter fick dosen 5 g agave fruktan blå Tequilana Weber + 10 g hjälpämne och 15 patienter fick 15 g plantago psyllium.

Gaskromatografi: (bestämning av kortkedjig fettsyra AGCC)

AGCC för bestämning av jondetektorflamma kommer att användas. Följande steg utförs:

1. 50 uL etylbutyrat tillsätts till 1 g avföring
2. 1 ml saltsyra tillsattes.
3. Den centrifugeras vid 3000 g under 10 minuter. Supernatanten avlägsnades.
4. Därefter tillsätts 300 ul N-metyldibutilsililtrifluoracetamid (MTBSTFA).
5. värm upp lösningen vid 80 ° C i 20 minuter.
6. Den lämnades ostörd i rumstemperatur i 24 timmar för att säkerställa fullständig derivatisering av mjölksyra.
7. analys av prover med gaskromatografi enligt metod som utvecklats för specifika prover kommer att utföras.

Extraktion av DNA från feces, PCR-amplifiering och bakteriell 16S rRNA-sekvensering:

RRNA-sekvensering är den valda metoden för att bestämma höga taxonomiska samband (kön upp nivå). Eftersom 16S rRNA-molekylen innehåller mycket variabla regioner är det vanligtvis möjligt att hitta regioner med 20 till 30 baser som är helt unika för en enda bakterieart.

För att utföra analysen, kommer att samla i fekala prover är sterila plastbehållare. Omedelbart efter insamling kommer proverna att transporteras till laboratoriet i ishink 2 till 8 och sedan frysas vid -73 ° C fram till bearbetning.

DNA-extraktion utfördes enligt instruktionerna för den automatiserade metoden NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Durham, NC, USA) med en kort initial modifiering före automatiserad process. Väges och suspenderas 200 mg fekalt material av varje prov i 0,3 ml fosfatbuffrad saltlösning-(8 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1,5 mM KH2PO4 och) kraftig omrörning under 30 sekunder. 100 ul av suspensionen placerades i kokande 15 minuter och frystes omedelbart vid 0°C på is. Bakteriehomogenat centrifugerades vid 13 000 g under 10 min och supernatanten samlas upp i rör 500 ul.

Detta prov kommer att användas för isolering av DNA på automatiserad utrustning. PCR-amplifiering i realtid av 16S rRNA-bakterier utföras som beskrivits av tidigare rapporter med användning av en Light Cycler-(Roche)-utrustning.

Kvantifiering av bakteriefyla i huvudkategorier som beskrivs: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria. Det kommer att utföras med metoden för kvantitativ PCR i realtid med användning av primers och betingelser som beskrivits tidigare, pR amplifierar specifika fragment av bakteriella 16S rRNA-populationsgrupper som beskrivits. Vi kommer att använda primrar som kallas streckkod 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) och 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) för att amplifiera 16S rRNA-fragmenten V6 bakteriell V6.

Sekvensering och analys av de amplifierade fragmenten sker med fluorescerande sekvenseringsutrustning terminator 3130 / genetisk analysator (Applied Biosystems).

PCR-produkterna sekvenserades och analyserades och kommer att skickas till GenBank för artidentifiering.

Extrahering av bakteriellt DNA och kvantifiering av bakteriearter används för att demonstrera den prebiotiska effekten av agavefiber, eftersom selektiv tillväxt av populationen av bifidobakterier och laktobaciller och förekomst av kortkedjiga fettsyror i avföring förväntas.

Så förutom de funktionella egenskaperna och deras effekter på förstoppning, kan du kontrollera den prebiotiska effekten av agavefruktaner.