Evaluering af et tilskud af Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago hos patienter med funktionel obstipation (SATWAVPP)

Dette er et prospektivt, randomiseret, kontrolleret og enkeltblindt studie for at bestemme fase III-effektiviteten af ​​Tequilana Weber-fruktaner af blå agave hos personer med funktionel obstipation.

For at opnå dette er det planlagt at inkludere over 18 år Patienters alder Opfylde WHO samt inklusionskriterier Rom III kriterierne for funktionel obstipation. (Se tabel nedenfor).

Fasen af ​​vores undersøgelse er udpeget baseret på artikel 66 i kapitel II "Om farmakologisk forskning" i forordningen om den generelle lov om sundhed i forskning, der definerer FASE III undersøgelser Følger som: Det er administration af et forskningslægemiddel til store grupper af Patienter (normalt eksterne), for at definere ITS terapeutisk nytte og identifikation identificere bivirkninger, interaktioner og eksterne faktorer, der kan ændre den farmakologiske virkning.

Patienter på instituttet vil blive tilkaldt efter invitationer til at deltage i at placere en protokol for patienter med forstoppelse. Patienter, der ikke er blevet registreret og opfylder inklusionskriterierne, kan også deltage.

Undersøgelsen, der skal udføres, vil blive forklaret og læst, og, hvor det er relevant', vil det informerede samtykke blive underskrevet af patienten Under det indledende besøg (besøg 1) for berettigelse, hvor forsøgspersonen vil få udleveret 2 spørgeskemaer (se bilag), en De opfylder for at afgøre, om ROME III-kriterierne for funktionel obstipation (FC) og en anden for at VURDERE, om patienten ikke opfylder kriterierne for irritabel ROME III-tarmsyndrom (IBS), og en baseline-åndedrætstest vil blive udført.

Derudover vil den tidligere brug af fibertilskud og afføringsmidler, som skal suspenderes mindst 2 måneder før randomisering, blive EVALUERET.

Forsøgspersonen vil vende tilbage til et andet besøg (besøg 2) (som vil afhænge af, om patienten tager afføringsmidler eller fibertilskud) for en fuldstændig fysisk evaluering, og fiberindtagelsesdagbogen vil blive vurderet for at bestemme mængden af ​​fiberindtag i kosten samt evakueringsdagbogen og SmartPill © vil blive givet, og på den måde vil patienten vende tilbage til hospitalet for at registrere data efter kapslen Efter at have evakueret.

Patienten vender tilbage en uge senere (besøg 3) på en 12 timers faste, fiberindtaget og evakueringsdagbøgerne vil blive revurderet og vil blive EVALUERET De igen af ​​en ernæringsekspert. En ny udåndingstest vil blive udført. Emnet vil blive bedt om at udfylde SF-36 livskvalitetsspørgeskemaet. En afføringsprøve vil blive indsamlet til ITS-analyse i tillæg til en blodprøve til bestemmelse af fastende glukose, glykosyleret hæmoglobin A1c, insulin og fuld lipidprofil.

Forsøgspersonerne vil blive randomiseret til at modtage en af ​​fire behandlinger Det kan være Psyllium plantago 15g, blå agave Tequilana Weber fructans i doser på 5, 10g og blå agave Tequilana Weber fructans i en dosis på 5 g + 10 g hjælpestof til en koncentration på 33 % af blå agavefruktaner Tequilana Weber.

Randomiseringen vil være computergenereret med et deltagernummer, og tildelingen af ​​behandlingen vil være fortløbende.

Produktet vil blive leveret i identiske flasker med samme mængde pulver i en beholder, der kun vil kunne identificeres med navnet på protokollen samt patientens nummer.

Patienten vil blive forsynet med en måleske til at indgive den nødvendige mængde produkt for hver af doserne (henholdsvis 5, 10 og 15 g) eller med kuverter, der indeholder de nøjagtige vejede mængder.

Patienten vil blive instrueret i at føre en dagbog over diæten, over evakueringerne og et ark for at VURDERE bivirkninger. Forsøgspersonen vil vende tilbage (besøg 4) i slutningen af ​​en måned ± 5 dage på en 12 timers faste, og deres overholdelse vil blive vurderet ved produktvægt i beholderen fratrukket det antal gram, der kræves dagligt I HENHOLD TIL tildelingen af ​​behandlingen.

Fiberindtagelsesdagbøgerne vil blive VURDERT igen af ​​ernæringseksperten, evakueringen vil også blive VURDERT dagbog. Der vil blive foretaget en lægelig evaluering, der inkluderer afhøring og fysisk evaluering. Efterfølgende vil en blodprøve være til bestemmelse af fastende glukose opnået, glykosyleret hæmoglobin A1c, insulin og lipidprofil og en fuld prøve af ekskrementer vil blive opnået og SmartPill® vil blive givet.

Patienten vil fortsætte med tilskuddet i samme beholder og vil blive planlagt til en måned senere. I det afsluttende behandlingsbesøg (besøg 5), vil fiberen blive EVALUERET journalforbrug igen af ​​en ernæringsekspert, og evakueringen vil også blive EVALUERET dagbog.

Der vil blive udført en medicinsk evaluering, som omfatter forespørgsel og fysisk evaluering, og deres overholdelse vil blive vurderet ved at veje produktet i beholderen, fratrække det antal gram, det kræver dagligt I henhold til behandlingstildelingen eller patientens levering af de tomme kuverter Brugt.

Efterfølgende vil en blodprøve være til at bestemme fastende glukose Opnået, glykosyleret hæmoglobin A1c, insulin og lipid profil og en fuld prøve vil blive indsamlet afføring og udåndingstest i slutningen vil blive udført.

Til afslutning af besøget, som vil blive udført en måned efter ophør af behandlingen, vil evakueringen blive EVALUERET dagbog og en afføringsprøve vil blive indsamlet, og dermed afsluttes interventionen i den del af undersøgelsen. I alt Opfølgningsvarigheden for hver patient vil være 3 måneder, nok tid til at observere og sammenligne effekten af ​​de fibre, der skal bruges. Det er vigtigt at nævne, at i nyere undersøgelser udført af det samme hold og med blå agave Tequilana Weber-fruktaner, er effekter på tarmpassage blevet observeret fra den første uges indtagelse, faktisk er dette en af ​​grundene til at fokusere undersøgelsen på funktionel obstipation og intestinal transit.

Åndedrætstest:

En udåndingstest vil blive udført for at måle brint- og metankoncentrationer tidligere udåndet hos patienter randomiseret i besøg 1 og 5.

For at udføre udåndingstesten vil der blive brugt gaskromatografiudstyr, mærket Quintron® Breath-tracker.

Til det vil patienterne blive spurgt:

• Ikke at tage antibiotika tidligere uger I det mindste til testen.
• Stop indtagelsen af ​​mad rig på fibre og stivelse 24 timer før testen.
• Ikke at tage alkohol eller ryge
• Hav minimum 8 timers faste
• Udfør mundhygiejne før testen påbegyndes og under udførelsen af ​​målinger.

Denne test varer 3 timer, hvor patienten ikke kan forlade laboratoriefaciliteterne motilitet, kan ikke tale for meget eller sove. Udåndingsluftprøver tages hvert 15. minut i denne periode.

SmartPill®:

SmartPill®-testen vil blive udført på besøg 2 og 4.

Koloskopi:

Er et værktøj, der vil blive undersøgt patienter ≥55 år med nydiagnosticeret forstoppelse eller dem, hvor ændringer i afføringsvaner observeres i denne aldersgruppe. Dette grundlæggende mål er at udelukke potentielt alvorlige sygdomme og ikke at forsinke diagnosen af ​​disse under forskningsstudiet. en koloskopisk undersøgelse vil alle patienter, der har forstoppelse og nogen af ​​følgende karakteristika, blive brugt:

1. Diagnose af forstoppelse mindre end 1 år
2. Forsøgspersoner ≥55 år, som ikke har fået koloskopisk evaluering inden for de sidste 3 år før studiestart
3. Kronisk, men med alarmdata (: Uforklaret vægttab, nylig transrektal blødning <6 måneder, nylige ændringer i afføringsmønsteret eksempel) Forstoppelse

Patienterne omfatter:

Undersøgelser med fibertilskud (Psyllium, Plums8) har inkluderet 25 til 30 patienter pr. gruppe for at finde forskelle mellem grupper.

I alt er det planlagt at inkludere 60 patienter randomiseret som følger: 15 patienter får fructans blå agave Tequilana Weber dosis på 5 g, 15 patienter fik dosen på 10 g, 15 patienter fik dosen på 5 g agave fructans blå Tequilana Weber + 10 g hjælpestof og 15 patienter fik 15 g plantago psyllium.

Gaschromatografi: (bestemmelse af kortkædet fedtsyre AGCC)

AGCC til bestemmelse af iondetektorflamme vil blive brugt. Følgende trin udføres:

1. 50 uL ethylbutyrat tilsættes til 1 g fæces
2. 1 ml saltsyre blev tilsat.
3. Det centrifugeres ved 3000 g i 10 minutter. Supernatanten blev fjernet.
4. Efterfølgende tilsættes 300 µl N-methyldibutilsililtrifluoracetamid (MTBSTFA).
5. opløsning ved 80 ° C i 20 min. opvarm.
6. Den efterlod uforstyrret ved stuetemperatur i 24 timer for at sikre fuldstændig derivatisering af mælkesyre.
7. analysering af prøver ved gaskromatografi i overensstemmelse med metode udviklet til specifikke prøver vil blive udført.

Ekstraktion af DNA fra fæces, PCR-amplifikation og bakteriel 16S rRNA-sekventering:

RRNA-sekventering er den foretrukne metode til at bestemme høje taksonomiske forhold (køn op niveau). Fordi 16S rRNA-molekylet indeholder meget variable regioner, er det normalt muligt at finde regioner på 20 til 30 baser, der er helt unikke for en enkelt bakterieart.

For at udføre analysen, vil indsamle i fækale prøver er sterile plastikbeholdere. Umiddelbart efter indsamling vil prøverne blive transporteret til laboratoriet i isspand 2 til 8 og derefter frosset ved -73 °C indtil forarbejdning.

DNA-ekstraktion blev udført efter instruktionerne fra den automatiserede metode NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Durham, NC, USA) med en kort indledende modifikation før automatiseret proces. Vejes og suspenderes 200 mg fækalt materiale af hver prøve i 0,3 ml phosphatbufret saltopløsning - (8 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1,5 mM KH2PO4 og) kraftig omrøring i 30 sekunder. 100 µl af suspensionen blev anbragt i kogende 15 minutter og straks frosset ved 0°C på is. Bakteriehomogenat blev centrifugeret ved 13.000 g i 10 minutter, og supernatanten vil blive opsamlet i rør på 500 µl.

Denne prøve vil blive brugt til isolering af DNA på automatiseret udstyr. PCR-amplifikation i realtid 16S rRNA-bakterier udføres som beskrevet i tidligere rapporter ved brug af et Light Cycler-(Roche)-udstyr.

Kvantificering af bakteriephyla i hovedkategorier beskrevet: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria. Det vil blive udført ved metoden med kvantitativ PCR i realtid under anvendelse af de tidligere beskrevne primere og betingelser, pR amplificerer specifikke fragmenter af bakterielle 16S rRNA-populationsgrupper beskrevet. Vi vil bruge primere kaldet stregkode 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) og 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) til at amplificere 16S rRNA-fragmenterne V6 bakterielle V6.

Sekventering og analyse af de amplificerede fragmenter er ved hjælp af fluorescerende sekventeringsudstyr terminator 3130 / genetisk analysator (Applied Biosystems).

PCR-produkterne blev sekventeret og analyseret og vil blive indsendt til GenBank til artsidentifikation.

Udvinding af bakterielt DNA og kvantificering af bakteriearter brugt til at demonstrere den præbiotiske virkning af agavefibre, da selektiv vækst af populationen af ​​bifidobakterier og lactobaciller og forekomst af kortkædede fedtsyrer i afføring forventes.

Ud over de funktionelle egenskaber og deres indvirkning på forstoppelse kan du derfor kontrollere den præbiotiske effekt af agavefruktaner.