Evaluatie van een supplement van Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago bij patiënten met functionele constipatie (SATWAVPP)

Dit is een prospectieve, gerandomiseerde, gecontroleerde en enkelblinde studie om de fase III-werkzaamheid te bepalen van de inname van Tequilana Weber met blauwe agave fructanen bij proefpersonen met functionele constipatie.

Om dit te bereiken, is het de bedoeling om patiënten van meer dan 18 jaar op te nemen. (Zie onderstaande tabel).

De fase van ons onderzoek is aangewezen op basis van artikel 66 van hoofdstuk II "Over farmacologisch onderzoek" van de verordening van de algemene wet op de gezondheid bij onderzoek die FASE III-onderzoeken definieert. Volgt als: Het is de toediening van een onderzoeksgeneesmiddel aan grote groepen van Patiënten (meestal extern), om het therapeutische nut en de identificatie van ITS te definiëren, identificeren bijwerkingen, interacties en externe factoren die het farmacologische effect kunnen veranderen.

Patiënten van het instituut worden gebeld na uitnodigingen om mee te doen aan het plaatsen van een protocol voor patiënten met obstipatie. Patiënten die niet zijn geregistreerd en voldoen aan de inclusiecriteria, mogen ook deelnemen.

Het uit te voeren onderzoek zal worden uitgelegd en gelezen en, indien van toepassing, zal de geïnformeerde toestemming worden ondertekend door de patiënt tijdens het eerste bezoek (bezoek 1) van geschiktheid, waarbij de proefpersoon 2 vragenlijsten krijgt (zie bijlagen), één Ze voldoen om te bepalen of de ROME III-criteria voor functionele constipatie (FC) en een andere om te BEOORDELEN of de patiënt niet voldoet aan de criteria voor het prikkelbare ROME III-darmsyndroom (PDS) en er zal een baseline-ademtest worden uitgevoerd.

Bovendien zal het eerdere gebruik van vezelsupplementen en laxeermiddelen, dat ten minste 2 maanden voorafgaand aan randomisatie moet worden opgeschort, worden GEËVALUEERD.

De proefpersoon keert terug naar een tweede bezoek (bezoek 2) (wat afhangt van het feit of de patiënt laxeermiddelen of vezelsupplementen gebruikt) voor een volledige fysieke evaluatie en het vezelinnamedagboek zal worden beoordeeld om de hoeveelheid vezelinname in het dieet te bepalen evenals het dagboek van evacuaties en de SmartPill © zal worden gegeven en op die manier zal de patiënt terugkeren naar het ziekenhuis om de gegevens te registreren nadat de capsule is geëvacueerd.

De patiënt komt een week later terug (Bezoek 3) op een vastenperiode van 12 uur, de vezelinname en de evacuatiedagboeken zullen opnieuw worden GEËVALUEERD en opnieuw worden GEËVALUEERD door een voedingsdeskundige. Er wordt een nieuwe ademtest afgenomen. De proefpersoon wordt gevraagd de SF-36 Quality of Life-vragenlijst in te vullen. Er wordt een ontlastingsmonster afgenomen voor ITS-analyse naast een bloedmonster voor de bepaling van nuchtere glucose, geglycosyleerd hemoglobine A1c, insuline en het volledige lipidenprofiel.

De proefpersonen worden gerandomiseerd om een ​​van de vier behandelingen te krijgen. Dat kunnen Psyllium plantago 15 g, blauwe agave Tequilana Weber fructanen in doses van 5, 10 g en blauwe agave Tequilana Weber fructanen in een dosis van 5 g + 10 g hulpstof voor een concentratie van 33 zijn. % blauwe agave fructanen Tequilana Weber.

De randomisatie zal computergegenereerd zijn met een deelnamenummer en de toewijzing van de behandeling zal opeenvolgend zijn.

Het product wordt geleverd in identieke flessen met dezelfde hoeveelheid poeder in een container die alleen identificeerbaar is met de naam van het protocol en het patiëntnummer.

De patiënt krijgt een maatlepel om de hoeveelheid product toe te dienen die nodig is voor elk van de doses (respectievelijk 5, 10 en 15 g) of enveloppen met de exacte afgewogen hoeveelheden.

De patiënt zal worden geïnstrueerd om een ​​dagboek bij te houden van het dieet, van de evacuaties en een blad om bijwerkingen te BEOORDELEN. De proefpersoon zal terugkeren (bezoek 4) aan het einde van een maand ± 5 dagen op een vastenperiode van 12 uur en hun therapietrouw zal worden beoordeeld aan de hand van het gewicht van het product in de container, waarbij het aantal dagelijks benodigde grammen wordt afgetrokken VOLGENS de toewijzing van de behandeling.

De vezelinnamedagboeken worden opnieuw GEËVALUEERD door de voedingsdeskundige, ook de evacuatie wordt GEËVALUEERD. Er zal een medische evaluatie worden uitgevoerd, inclusief ondervraging en lichamelijk onderzoek. Vervolgens zal er een bloedmonster worden genomen om de nuchtere glucose te bepalen, het geglycosyleerde hemoglobine A1c, het insuline- en lipidenprofiel en een volledig monster van de uitwerpselen zal worden verkregen en SmartPill® zal worden gegeven.

De patiënt gaat verder met het supplement in dezelfde container en wordt een maand later ingepland. Bij het bezoek aan het einde van de behandeling (bezoek 5) zal de vezel opnieuw door een voedingsdeskundige worden geëvalueerd en de consumptie zal ook worden geëvalueerd.

Er zal een medische evaluatie worden uitgevoerd die ondervraging en fysieke evaluatie omvat en hun therapietrouw zal worden beoordeeld door het product in de container te wegen, het aantal gram af te trekken dat het dagelijks nodig heeft VOLGENS de behandelingsopdracht of levering door de patiënt van de lege enveloppen gebruikt.

Vervolgens zal een bloedmonster worden genomen om nuchtere glucose te bepalen. Verkregen, geglycosyleerd hemoglobine A1c, insuline en lipidenprofiel en een volledig monster zal worden verzameld ontlasting en aan het einde zal een ademtest worden uitgevoerd.

Voor het einde van het bezoek, dat zal worden uitgevoerd een maand na het stoppen van de behandeling, zal de evacuatie worden geëvalueerd en zal een ontlastingsmonster worden verzameld en daarmee zal de interventie in het deel van de studie eindigen. Totaal De follow-upduur voor elke patiënt zal 3 maanden zijn, voldoende tijd om het effect van de te gebruiken vezels te observeren en te vergelijken. Het is belangrijk om te vermelden dat in recente onderzoeken, uitgevoerd door hetzelfde team en met blauwe agave Tequilana Weber-fructanen, effecten op de darmtransit zijn waargenomen vanaf de eerste week van inname, in feite is dit een van de redenen om de studie te concentreren op functionele obstipatie en darmtransit.

Ademtest:

Er zal een ademtest worden uitgevoerd om de waterstof- en methaanconcentraties te meten die eerder zijn uitgeademd bij patiënten gerandomiseerd in bezoeken 1 en 5.

Voor het uitvoeren van de ademtest wordt gebruik gemaakt van gaschromatografieapparatuur van het merk Quintron® Breath-tracker.

Daarvoor zullen de patiënten worden gevraagd:

• Voorafgaande weken geen antibiotica nemen. Tenminste voor de test.
• Stop 24 uur voor de test met de inname van voedsel dat rijk is aan vezels en zetmeel.
• Geen alcohol gebruiken of roken
• Minimaal 8 uur vasten
• Voer mondhygiëne uit voordat u met de test begint en tijdens het uitvoeren van metingen.

Deze test duurt 3 uur, gedurende welke de patiënt de motiliteit van de laboratoriumfaciliteiten niet kan verlaten, niet te veel kan praten of kan slapen. Gedurende deze periode worden om de 15 minuten uitgeademde luchtmonsters genomen.

SmartPill®:

De SmartPill®-test wordt uitgevoerd tijdens bezoeken 2 en 4.

colonoscopie:

Is een hulpmiddel dat zal worden onderworpen aan nauwkeurig onderzoek bij patiënten van ≥55 jaar met nieuw gediagnosticeerde constipatie of patiënten bij wie veranderingen in de stoelgang in deze leeftijdsgroep worden waargenomen. Dit fundamentele doel is om potentieel ernstige ziekten uit te sluiten en de diagnose hiervan tijdens het onderzoek niet uit te stellen. één colonoscopisch onderzoek zal worden gebruikt bij alle patiënten met constipatie en een van de volgende kenmerken:

1. Diagnose van constipatie minder dan 1 jaar
2. Proefpersonen ≥55 jaar die geen colonoscopische evaluatie hebben ondergaan in de laatste 3 jaar voorafgaand aan deelname aan de studie
3. Chronisch maar met alarmgegevens (: onverklaarbaar gewichtsverlies, recente transrectale bloeding <6 maanden, recente veranderingen in het defecatiepatroon voorbeeld) Obstipatie

Patiënten zijn onder meer:

Studies met vezelsupplementen (Psyllium, Plums8) Hebben 25 tot 30 patiënten per groep geïncludeerd om verschillen tussen groepen te vinden.

In totaal is het de bedoeling om 60 patiënten op te nemen, gerandomiseerd als volgt: 15 patiënten kregen fructans blue agave Tequilana Weber dosis van 5 g, 15 patiënten kregen de dosis van 10 g, 15 patiënten kregen de dosis van 5 g agave fructans blue Tequilana Weber + 10 g hulpstof en 15 patiënten kregen 15 g plantago psyllium.

Gaschromatografie: (bepaling van korteketenvetzuur AGCC)

AGCC voor het bepalen van de ionendetectorvlam zal worden gebruikt. De volgende stappen worden uitgevoerd:

1. Aan 1 g feces wordt 50 µl ethylbutyraat toegevoegd
2. Er werd 1 ml zoutzuur toegevoegd.
3. Het wordt gedurende 10 minuten bij 3000 g gecentrifugeerd. Het supernatant werd verwijderd.
4. Vervolgens wordt 300 µl N-methyldibutilsililtrifluoracetamide (MTBSTFA) toegevoegd.
5. oplossing bij 80°C gedurende 20 min opwarmen.
6. Het bleef 24 uur ongestoord bij kamertemperatuur om volledige derivatisering van melkzuur te verzekeren.
7. monsters worden geanalyseerd door gaschromatografie volgens een methode die voor specifieke monsters is ontwikkeld.

Extractie van DNA uit feces, PCR-amplificatie en bacteriële 16S rRNA-sequencing:

RRNA-sequencing is de voorkeursmethode om hoge taxonomische relaties te bepalen (gender up level). Omdat het 16S-rRNA-molecuul zeer variabele regio's bevat, is het meestal mogelijk om regio's van 20 tot 30 basen te vinden die volledig uniek zijn voor een enkele bacteriesoort.

Om de analyse uit te voeren, worden in fecesmonsters steriele plastic containers verzameld. Direct na afname worden de stalen in ijsemmer 2 tot 8 naar het laboratorium getransporteerd en vervolgens ingevroren bij -73°C tot verwerking.

DNA-extractie werd uitgevoerd volgens de instructies van de geautomatiseerde methode NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Durham, NC, VS) met een korte eerste wijziging vóór het geautomatiseerde proces. Er wordt gewogen en 200 mg ontlasting van elk monster gesuspendeerd in 0,3 ml fosfaatgebufferde zoutoplossing (8 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1,5 mM KH2PO4 en) krachtig schudden gedurende 30 seconden. 100 µl van de suspensie werd gedurende 15 minuten aan de kook gebracht en onmiddellijk op ijs bij 0°C ingevroren. Bacterieel homogenaat werd gedurende 10 minuten bij 13.000 g gecentrifugeerd en het supernatant wordt verzameld in buisjes van 500 µl.

Dit exemplaar zal worden gebruikt voor de isolatie van DNA op geautomatiseerde apparatuur. PCR-amplificatie real-time 16S rRNA-bacterieel wordt uitgevoerd zoals beschreven in eerdere rapporten met behulp van een Light Cycler- (Roche) -apparatuur.

Kwantificering van bacteriële phyla in de belangrijkste beschreven categorieën: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacteriën, 4) Proteobacteriën. Het zal worden uitgevoerd door de methode van kwantitatieve PCR in realtime met behulp van de eerder beschreven primers en omstandigheden, pR amplificeert specifieke fragmenten van beschreven bacteriële 16S rRNA-populatiegroepen. We zullen primers genaamd barcode 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) en 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) gebruiken om de 16S rRNA-fragmenten V6 bacterieel V6 te versterken.

Sequentiebepaling en analyse van de geamplificeerde fragmenten is door fluorescerende sequencingapparatuur terminator 3130 / genetische analysator (Applied Biosystems).

De PCR-producten werden gesequenced en geanalyseerd en zullen worden ingediend bij GenBank voor soortidentificatie.

Extractie van bacterieel DNA en kwantificering van bacteriesoorten die worden gebruikt om het prebiotische effect van agavevezels aan te tonen, aangezien selectieve groei van de populatie van bifidobacteriën en lactobacillen en het voorkomen van vetzuren met een korte keten in de ontlasting wordt verwacht.

Dus naast de functionele eigenschappen en hun effecten op constipatie, kunt u het prebiotische effect van agave fructanen controleren.