Az Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago kiegészítésének értékelése funkcionális székrekedésben szenvedő betegeknél (SATWAVPP)

Ez egy prospektív, randomizált, kontrollált és egyszeri vak vizsgálat a kék agave fruktánok Tequilana Weber bevitelének III. fázisú hatékonyságának meghatározására funkcionális székrekedésben szenvedő betegeknél.

Ennek elérése érdekében a tervek szerint szerepel a 18 év feletti betegek életkora. Teljesítik a WHO előírásait, valamint a funkcionális székrekedés Róma III kritériumait. (Lásd az alábbi táblázatot).

Vizsgálatunk szakaszát az Egészségügyi Kutatások Általános törvénye rendelet II. „A farmakológiai kutatásról” című fejezetének 66. cikke alapján jelöljük ki, amely meghatározza a III. FÁZIS vizsgálatokat. A betegek (általában külsőleg) az ITS terápiás hasznosságának meghatározásához és azonosításához azonosítják azokat a mellékhatásokat, kölcsönhatásokat és külső tényezőket, amelyek megváltoztathatják a farmakológiai hatást.

Az intézet betegeit felkérés után hívják, hogy vegyenek részt székrekedéses betegek jegyzőkönyvének felállításában. Olyan betegek is részt vehetnek, akik nem regisztráltak és megfelelnek a felvételi kritériumoknak.

Az elvégzendő vizsgálatot el kell magyarázni és elolvasni, és adott esetben” a tájékozott beleegyezést a beteg aláírja a jogosultság kezdeti vizitje (1. vizit) során, ahol az alanynak 2 kérdőívet adnak ki (lásd a mellékleteket), Az egyiknek eleget kell tennie annak meghatározására, hogy a funkcionális székrekedés (FC) ROME III kritériumai-e, a másiknak pedig annak ELÉRTÉKELÉSE, ha a beteg nem felel meg az irritábilis ROME III bélszindróma (IBS) kritériumainak, és kiindulási légzési tesztet kell végezni.

Ezen túlmenően, a rostkiegészítők és hashajtók korábbi használatát, amelyet legalább 2 hónappal a randomizálás előtt fel kell függeszteni, ÉRTÉKELNI kell.

Az alany visszatér egy második vizitre (2. vizit) (amely attól függ, hogy a beteg hashajtót vagy rostpótlót szed-e) teljes fizikai kivizsgálás céljából, és a rostbeviteli naplót értékelik, hogy meghatározzák az étrendben bevitt rost mennyiségét. valamint a kiürítések naplója és a SmartPill © is megadásra kerül és így a beteg a kapszula kiürítése után visszatér a kórházba, hogy regisztrálja az adatokat.

A páciens egy héttel később (3. vizit) 12 órás koplalással tér vissza, a rostbevitelt és a kiürítési naplókat újraértékelik, és újra egy táplálkozási szakértő értékeli. Új légzéstesztet kell végezni. Az alanynak fel kell töltenie az SF-36 életminőség kérdőívet. Az éhomi glükóz, a glikozilált hemoglobin A1c, az inzulin és a teljes lipidprofil meghatározására szolgáló vérminta mellett ITS-elemzés céljából székletmintát vesznek.

Az alanyokat véletlenszerűen besorolják, hogy megkapják a négy kezelés egyikét, amelyek lehetnek Psyllium plantago 15g, blue agave Tequilana Weber fruktánok 5, 10g dózisban és kék agave Tequilana Weber fruktánok 5g dózisban + 10g segédanyag 33g koncentrációban. % kék agave fruktánok Tequilana Weber.

A véletlenszerű besorolást számítógéppel generálják részvételi számmal, és a kezelés kijelölése egymás után történik.

A terméket azonos palackokban szállítjuk. Ugyanannyi porral egy tartályban, amely csak a protokoll nevével, valamint a beteg számával lesz azonosítható.

A betegnek egy mérőkanalat biztosítunk, amellyel beadhatja az egyes adagokhoz (5, 10 és 15 g-os) szükséges készítménymennyiséget, vagy olyan borítékokat, amelyek a pontos lemért mennyiséget tartalmazzák.

A pácienst arra utasítják, hogy vezessen naplót az étrendről, a kiürítésekről és egy lapot a káros hatások ÉRTÉKELÉSÉRE. Az alany egy hónap végén ± 5 napon belül 12 órás koplalással tér vissza (4. látogatás), és tapadását a tartályban lévő termék tömege alapján értékeljük, levonva a napi szükséges grammok számát, A kezelés kijelölése szerint.

A rostbeviteli naplókat ismét ÉRTÉKELI a táplálkozási szakember, a kiürítést is ÉRTÉKELÉS napló. Orvosi értékelést végeznek, amely magában foglalja a kikérdezést és a fizikai értékelést. Ezt követően vérmintát vesznek a nyert éhgyomri glükóz, a glikozilált hemoglobin A1c, az inzulin és a lipidprofil meghatározására, valamint teljes ürülékmintát vesznek, és SmartPill®-et adnak be.

A beteg ugyanabban a tartályban folytatja a kiegészítést, és egy hónappal későbbre ütemezi. A kezelés végi vizit látogatáson (5. vizit) a rost ÉRTÉKELÉSE folyóiratok fogyasztását ismét táplálkozási szakértő és a kiürítést is ÉRTÉKELÉS naplója.

Orvosi kivizsgálásra kerül sor, amely magában foglalja a kikérdezést és a fizikális vizsgálatot, és ezek betartását a tartályban lévő termék lemérésével értékelik, levonva a napi szükséges grammok számát, A kezelési megbízás szerint vagy az üres borítékok beteg általi kiszállításával. használt.

Ezt követően vérmintát vesznek a kapott éhomi glükóz, glikozilált hemoglobin A1c, inzulin- és lipidprofil meghatározására, és teljes mintát vesznek. Székletgyűjtést és a végén légvételi tesztet kell végezni.

A kezelés befejezését követő egy hónapon belüli vizit végére a kiürítést ÉRTÉKELŐ napló és székletminta vétele és ezzel a vizsgálati rész beavatkozása befejeződik. Összesen A nyomon követés időtartama minden beteg esetében 3 hónap lesz, elegendő idő a felhasználandó rostok hatásának megfigyelésére és összehasonlítására. Fontos megemlíteni, hogy a közelmúltban, ugyanazon csapat által és kék agavé Tequilana Weber fruktánokkal végzett vizsgálatokban a bélrendszeri áthaladásra gyakorolt ​​hatást a bevétel első hetétől figyelték meg, valójában ez az egyik oka annak, hogy a vizsgálatot a vizsgálat középpontjába helyezzük. funkcionális székrekedés és intestinalis tranzit.

Légzési teszt:

Kilégzési tesztet kell végezni a hidrogén és metán koncentrációjának mérésére az 1. és 5. viziten véletlenszerűen kiválasztott betegeknél.

A kilégzési teszt elvégzéséhez Quintron® Breath-tracker márkájú gázkromatográfiás berendezést használnak.

Ehhez a betegeket a következőkre kérdezik:

• Ne szedjen antibiotikumot az előző hetekben, legalább a vizsgálatig.
• A vizsgálat előtt 24 órával hagyja abba a rostokban és keményítőben gazdag élelmiszerek fogyasztását.
• Ne igyon alkoholt vagy dohányozzon
• Legyen legalább 8 óra böjt
• Végezzen szájhigiéniát a vizsgálat megkezdése előtt és a mérések végrehajtása közben.

Ez a vizsgálat 3 óráig tart, amely alatt a beteg nem hagyhatja el a laboratóriumi létesítményeket, nem tud túl sokat beszélni vagy aludni. Ebben az időszakban 15 percenként történik a kilélegzett levegő mintavétele.

SmartPill®:

A SmartPill® tesztet a 2. és 4. vizit alkalmával végezzük el.

Kolonoszkópia:

Ez egy olyan eszköz, amelyet az 55 év feletti, újonnan diagnosztizált székrekedésben szenvedő betegek vizsgálatának vetnek alá, vagy akiknél ebben a korcsoportban a székelési szokások megváltoztak. Ez az alapvető cél, hogy kizárja a potenciálisan súlyos betegségeket, és ne késleltesse ezek diagnosztizálását a kutatás során. egy kolonoszkópiás vizsgálatban minden olyan beteget használnak, akinek székrekedése van, és az alábbi jellemzők bármelyike ​​fennáll:

1. 1 évnél rövidebb székrekedés diagnózisa
2. 55 év feletti alanyok, akiknél nem végeztek kolonoszkópos értékelést a vizsgálatba való belépés előtti utolsó 3 évben
3. Krónikus, de riasztási adatokkal (: Megmagyarázhatatlan fogyás, közelmúltban 6 hónap alatti transzrektális vérzés, a székelési minta legutóbbi változásai, példa) Székrekedés

A betegek közé tartozik:

Rost-kiegészítőkkel végzett vizsgálatok (Psyllium, Pums8) Csoportonként 25-30 beteget vontak be, hogy különbségeket találjanak a csoportok között.

A tervek szerint összesen 60 beteget randomizáltak az alábbiak szerint: 15 beteg kapott 5 g-os fruktán kék agavé Tequilana Weber adagot, 15 beteg 10 g-os adagot, 15 beteg pedig 5 g agave fruktán kék Tequilana Weber + 10 adagot kapott. g segédanyagot, 15 beteg pedig 15 g plantago psylliumot kapott.

Gázkromatográfia: (rövid szénláncú zsírsav AGCC meghatározása)

AGCC-t kell használni az iondetektor lángjának meghatározásához. A következő lépéseket hajtják végre:

1. 50 ul etil-butirátot adunk 1 g széklethez
2. 1 ml sósavat adunk hozzá.
3. 3000 g-vel 10 percig centrifugáljuk. A felülúszót eltávolítottuk.
4. Ezt követően hozzáadunk 300 ul N-metil-dibutil-szilil-trifluor-acetamidot (MTBSTFA).
5. Az oldatot 80 °C-on 20 percig melegítjük.
6. Szobahőmérsékleten 24 órán át zavartalanul hagyjuk, hogy biztosítsuk a tejsav teljes származékképződését.
7. a minták gázkromatográfiás elemzése a konkrét mintákra kidolgozott módszer szerint történik.

DNS kinyerése székletből, PCR amplifikáció és bakteriális 16S rRNS szekvenálás:

Az RRNS-szekvenálás a választott módszer a magas taxonómiai kapcsolatok meghatározására (gender up level). Mivel a 16S rRNS-molekula nagyon variábilis régiókat tartalmaz, általában lehetséges olyan 20-30 bázisú régiókat találni, amelyek teljesen egyediek egyetlen baktériumfaj számára.

Az elemzés elvégzéséhez a székletmintákat steril műanyag tartályokba kell gyűjteni. Közvetlenül a gyűjtés után a mintákat 2-8 jégvödörben szállítják a laboratóriumba, majd a feldolgozásig -73 °C-on lefagyasztják.

A DNS-kivonás a NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Durham, NC, USA) automatizált módszer utasításait követve, az automatizált folyamat előtti rövid kezdeti módosítással történt. Minden mintából 200 mg székletet mérünk le és szuszpendálunk 0,3 ml foszfáttal pufferolt sóoldatban (8 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4 és) 30 másodpercig erőteljesen keverjük. A szuszpenzió 100 ul-ét 15 percre forraljuk, és azonnal 0 °C-on jégen lefagyasztjuk. A bakteriális homogenizátumot 13 000 g-vel centrifugáltuk 10 percig, és a felülúszót 500 ul-es csövekbe gyűjtöttük.

Ezt a mintát a DNS automatizált berendezésen történő izolálására fogják használni. A valós idejű 16S rRNS bakteriális PCR amplifikációt a korábbi jelentések szerint végezzük Light Cycler (Roche) berendezés használatával.

A bakteriális törzsek számszerűsítése a következő főbb kategóriákban: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacteriumok, 4) Proteobaktériumok. Valós idejű kvantitatív PCR módszerrel hajtjuk végre a korábban leírt primerek és körülmények alkalmazásával, a pR amplifikálja a leírt bakteriális 16S rRNS populációcsoportok specifikus fragmentumait. A 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) és 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) vonalkódú primereket fogjuk használni a V6 bakteriális V6 16S rRNS-fragmensek amplifikálására.

Az amplifikált fragmensek szekvenálása és elemzése fluoreszcens szekvenáló berendezéssel, terminátor 3130 / genetikai analizátor (Applied Biosystems) történik.

A PCR-termékeket szekvenálták és elemezték, majd benyújtják a GenBank-hoz fajok azonosítása céljából.

Az agavé rost prebiotikus hatásának kimutatására használt bakteriális DNS kinyerése és a baktériumfajok mennyiségi meghatározása, mivel a bifidobaktériumok és laktobacillusok populációjának szelektív növekedése, valamint a székletben a rövid szénláncú zsírsavak megjelenése várható.

Így a funkcionális tulajdonságain és székrekedésre gyakorolt ​​hatásán kívül ellenőrizheti az agave fruktánok prebiotikus hatását is.