Évaluation d'un supplément d'Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago chez des patients souffrant de constipation fonctionnelle (SATWAVPP)

Il s'agit d'une étude prospective, randomisée, contrôlée et en simple aveugle visant à déterminer l'efficacité de phase III de l'apport de fructanes d'agave bleu Tequilana Weber chez des sujets souffrant de constipation fonctionnelle.

Pour y parvenir, il est prévu d'inclure plus de 18 ans d'âge. Les patients remplissent les critères de l'OMS ainsi que les critères d'inclusion Les critères de Rome III pour la constipation fonctionnelle. (Voir le tableau ci-dessous).

La phase de notre étude est désignée sur la base de l'article 66 du chapitre II "Sur la recherche pharmacologique" du règlement de la loi générale sur la santé dans la recherche qui définit les études de la PHASE III S'en suit : Il s'agit de l'administration d'un médicament de recherche à de grands groupes de Les patients (généralement externes), pour définir l'utilité thérapeutique et l'identification des ITS, identifient les effets indésirables, les interactions et les facteurs externes susceptibles d'altérer l'effet pharmacologique.

Les patients de l'institut seront appelés après invitations à participer à la mise en place d'un protocole pour les patients constipés. Les patients qui n'ont pas été enregistrés et qui répondent aux critères d'inclusion peuvent également participer.

L'étude à réaliser sera expliquée et lue et, le cas échéant, le consentement éclairé sera signé par le patient lors de la visite initiale (visite 1) d'éligibilité, où le sujet recevra 2 questionnaires (voir annexes), un Ils se réunissent pour déterminer si les critères ROME III de la constipation fonctionnelle (FC) et un autre pour ÉVALUER si le patient ne répond pas aux critères du syndrome du côlon irritable ROME III (IBS) et un test respiratoire de base seront effectués.

De plus, l'utilisation antérieure de suppléments de fibres et de laxatifs, qui doit être suspendue au moins 2 mois avant la randomisation, sera ÉVALUÉE.

Le sujet reviendra à une deuxième visite (visite 2) (qui dépendra si le patient prend des laxatifs ou des suppléments de fibres) pour une évaluation physique complète et le journal de l'apport en fibres sera évalué pour déterminer la quantité d'apport en fibres dans le régime alimentaire ainsi que le journal des évacuations et le SmartPill © seront donnés et ainsi, le patient retournera à l'hôpital pour enregistrer les données après la capsule ayant évacué.

Le patient reviendra une semaine plus tard (Visite 3) sur un jeûne de 12 heures, les apports en fibres et les carnets d'évacuation seront ré-ÉVALUÉS et seront à nouveau ÉVALUÉS par un nutritionniste. Un nouveau test respiratoire sera effectué. Le sujet sera invité à remplir le questionnaire sur la qualité de vie SF-36. Un échantillon de selles sera prélevé pour analyse ITS en plus d'un échantillon de sang pour la détermination de la glycémie à jeun, de l'hémoglobine glycosylée A1c, de l'insuline et du profil lipidique complet.

Les sujets seront randomisés pour recevoir l'un des quatre traitements qui peuvent être Psyllium plantago 15g, agave bleu Tequilana Weber fructans aux doses de 5, 10g et agave bleu Tequilana Weber fructans à la dose de 5 g + 10 g d'excipient pour une concentration de 33 % de fructanes d'agave bleu Tequilana Weber.

La randomisation sera générée par ordinateur avec un numéro de participation et l'attribution du traitement sera consécutive.

Le produit sera fourni dans des flacons identiques Avec la même quantité de poudre dans un récipient qui ne sera identifiable qu'Avec le nom du protocole ainsi que le numéro du patient.

Le patient se verra remettre une cuillère doseuse pour administrer la quantité de produit nécessaire à chacune des doses (respectivement 5, 10 et 15g) ou des enveloppes Contenant les Quantités Pesées exactes.

Il sera demandé au patient de tenir un journal du régime, des évacuations et une fiche pour ÉVALUER les effets indésirables. Le sujet reviendra (Visite 4) au bout d'un mois ± 5 jours sur un jeûne de 12 heures et son adhésion sera évaluée par le poids du produit dans le contenant en soustrayant le nombre de grammes nécessaires quotidiennement SELON l'affectation du traitement.

Les journaux d'apport en fibres seront à nouveau ÉVALUÉS par le nutritionniste, le journal d'évacuation sera également ÉVALUÉ. Une évaluation médicale sera effectuée qui comprend un interrogatoire et une évaluation physique. Par la suite, un échantillon de sang sera pour déterminer la glycémie à jeun obtenue, l'hémoglobine glycosylée A1c, le profil d'insuline et de lipides et un échantillon complet d'excréments sera obtenu et SmartPill® sera donné.

Le patient continuera avec le supplément dans le même récipient et sera programmé pour un mois plus tard. Lors de la visite de fin de traitement (visite 5), la consommation de fibres sera à nouveau ÉVALUÉE par un nutritionniste et l'évacuation sera ÉVALUÉE également.

Une évaluation médicale sera effectuée qui comprend un interrogatoire et une évaluation physique et leur adhésion sera évaluée en pesant le produit dans le récipient, en soustrayant le nombre de grammes qu'il nécessite quotidiennement SELON l'affectation du traitement ou la livraison par le patient des enveloppes vides utilisé.

Par la suite, un échantillon de sang sera pour déterminer la glycémie à jeun obtenue, l'hémoglobine glycosylée A1c, le profil d'insuline et de lipides et un échantillon complet sera prélevé des selles et un test respiratoire à la fin sera effectué.

Pour la fin de la visite, qui sera effectuée un mois après l'arrêt du traitement, l'évacuation sera ÉVALUÉE journal et un échantillon de selles sera prélevé et avec lui l'intervention dans la partie de l'étude prendra fin. Total La durée de suivi pour chaque patient sera de 3 mois, le temps d'observer et de comparer l'effet des fibres à utiliser. Il est important de mentionner que dans des études récentes menées par la même équipe et avec des fructanes d'agave bleu Tequilana Weber, des effets sur le transit intestinal ont été observés dès la première semaine de prise, c'est d'ailleurs l'une des raisons d'axer l'étude sur constipation fonctionnelle et transit intestinal.

Examen respiratoire:

Un test respiratoire sera effectué afin de mesurer les concentrations d'hydrogène et de méthane précédemment expirées chez les patients randomisés lors des visites 1 et 5.

Pour effectuer le test respiratoire, un équipement de chromatographie en phase gazeuse sera utilisé, marque Quintron® Breath-tracker.

Pour cela, il sera demandé aux patients :

• Ne pas prendre d'antibiotiques semaines avant Au moins pour le test.
• Arrêter la prise d'aliments riches en fibres et amidons 24h avant le test.
• Ne pas prendre d'alcool, ni fumer
• Avoir un minimum de 8 heures de jeûne
• Effectuez une hygiène bucco-dentaire avant de commencer le test et pendant la réalisation des mesures.

Ce test dure 3 heures, pendant lesquelles le patient ne peut pas quitter les installations du laboratoire de motricité, ne peut pas trop parler ni dormir. Des échantillons d'air expiré sont prélevés toutes les 15 minutes pendant cette période.

SmartPill® :

Le test SmartPill® sera effectué lors des visites 2 et 4.

Coloscopie :

Est un outil qui fera l'objet d'un examen minutieux chez les patients de ≥ 55 ans souffrant de constipation nouvellement diagnostiquée ou chez ceux dont les habitudes intestinales ont changé dans ce groupe d'âge. Cet objectif fondamental, écarter les maladies potentiellement graves et ne pas retarder le diagnostic de celles-ci lors de l'étude de recherche. une étude coloscopique tous les patients qui souffrent de constipation et l'une des caractéristiques suivantes seront utilisés :

1. Diagnostic de constipation de moins de 1 an
2. Sujets ≥ 55 ans qui n'ont pas subi d'évaluation coloscopique au cours des 3 dernières années précédant l'entrée à l'étude
3. Chronique mais avec des données d'alarme ( : Perte de poids inexpliquée, saignement transrectal récent <6 mois, changements récents dans le schéma de défécation, exemple) Constipation

Les patients comprennent :

Des études avec des suppléments de fibres (Psyllium, Prunes8) ont inclus 25 à 30 patients par groupe pour trouver des différences entre les groupes.

Au total il est prévu d'inclure 60 patients randomisés comme suit : 15 patients reçoivent des fructanes d'agave bleu Tequilana Weber dose de 5 g, 15 patients ont reçu la dose de 10 g, 15 patients ont reçu la dose de 5g de fructanes d'agave bleu Tequilana Weber + 10 g d'excipient et 15 patients ont reçu 15 g de psyllium plantago.

Chromatographie en phase gazeuse : (détermination de l'acide gras à chaîne courte AGCC)

AGCC pour déterminer la flamme du détecteur d'ions sera utilisé. Les étapes suivantes sont effectuées :

1. 50 uL de butyrate d'éthyle sont ajoutés à 1 g de matières fécales
2. 1 ml d'acide chlorhydrique a été ajouté.
3. Il est centrifugé à 3000 g pendant 10 minutes. Le surnageant a été retiré.
4. Par la suite il est ajouté 300 µL de N-Méthyl dibutil sililtrifluoroacétamide (MTBSTFA).
5. solution à 80°C pendant 20 min chauffer.
6. Il est laissé intact à température ambiante pendant 24 heures pour assurer une dérivatisation complète de l'acide lactique.
7. l'analyse des échantillons par chromatographie en phase gazeuse selon la méthode développée pour des échantillons spécifiques sera effectuée.

Extraction d'ADN de fèces, amplification PCR et séquençage d'ARNr 16S bactérien :

Le séquençage d'ARNR est la méthode de choix pour déterminer les relations taxonomiques élevées (niveau de genre supérieur). Étant donné que la molécule d'ARNr 16S contient des régions très variables, il est généralement possible de trouver des régions de 20 à 30 bases qui sont complètement uniques à une seule espèce de bactérie.

Pour effectuer l'analyse, on recueillera dans les échantillons fécaux des récipients en plastique stériles. Immédiatement après le prélèvement, les échantillons seront transportés au laboratoire dans le seau à glace 2 à 8 puis congelés à -73°C jusqu'au traitement.

L'extraction de l'ADN a été réalisée en suivant les instructions de la méthode automatisée NucliSENS® easyMAG® (BioMérieux, Durham, NC, USA) avec une brève modification initiale avant le processus automatisé. On pèse et met en suspension 200 mg de matières fécales de chaque échantillon dans 0,3 mL de solution saline tamponnée au phosphate-(Na2HPO4 8 mM, NaCl 137 mM, KCl 2,7 mM, KH2PO4 1,5 mM) sous agitation vigoureuse pendant 30 secondes. 100 μl de la suspension sont mis à bouillir 15 min et immédiatement congelés à 0°C sur de la glace. L'homogénat bactérien est centrifugé à 13 000 g pendant 10 min et le surnageant sera recueilli dans des tubes de 500 μl.

Ce spécimen sera utilisé pour l'isolement de l'ADN sur un équipement automatisé. L'amplification par PCR en temps réel de l'ARNr 16S bactérien s'effectue comme décrit dans les rapports précédents à l'aide d'un équipement Light Cycler-(Roche).

Quantification des phylums bactériens dans les grandes catégories décrites : 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria. Elle sera réalisée par la méthode de la PCR quantitative en temps réel en utilisant les amorces et les conditions décrites précédemment, la pR amplifie des fragments spécifiques des groupes de population d'ARNr 16S bactériens décrits. Nous utiliserons des amorces appelées code-barres 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) et 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) pour amplifier les fragments d'ARNr 16S V6 bactérien V6.

Le séquençage et l'analyse des fragments amplifiés se font par un équipement de séquençage fluorescent terminateur 3130 / analyseur génétique (Applied Biosystems).

Les produits de PCR ont été séquencés et analysés et seront soumis à GenBank pour l'identification des espèces.

Extraction de l'ADN bactérien et quantification des espèces bactériennes utilisées pour démontrer l'effet prébiotique de la fibre d'agave, car une croissance sélective de la population de bifidobactéries et de lactobacilles et la présence d'acides gras à chaîne courte dans les selles sont attendues.

Ainsi en plus des propriétés fonctionnelles et de leurs effets sur la constipation, on peut vérifier l'effet prébiotique des fructanes d'agave.