기능성 변비 환자에서 Agave Tequilana Weber Azul 대 Psyllium Plantago의 보충제 평가 (SATWAVPP)

이것은 기능성 변비가 있는 피험자에서 블루 아가베 프럭탄 테킬라나 웨버 섭취의 3상 효능을 결정하기 위한 전향적, 무작위, 통제 및 단일 맹검 연구입니다.

이를 달성하기 위해 기능적 변비에 대한 포함 기준 로마 III 기준뿐만 아니라 WHO를 충족하는 18세 이상의 환자를 포함할 계획입니다. (아래 표 참조).

우리 연구의 단계는 PHASE III 연구를 정의하는 연구에서 건강에 관한 일반법 규정의 "약리학 연구" 2장의 66조에 따라 지정됩니다. 환자(일반적으로 외부)는 ITS 치료 유용성을 정의하고 약리학적 효과를 변경할 수 있는 부작용, 상호 작용 및 외부 요인을 식별합니다.

연구소의 환자는 변비 환자를 위한 프로토콜 배치에 참여하라는 초대를 받은 후 호출됩니다. 등록되지 않았으며 포함 기준을 충족하는 환자도 참여할 수 있습니다.

수행할 연구가 설명되고 읽혀질 것이며, 적절한 경우 '대상자에게 2개의 설문지가 제공되는 경우(부록 참조) 하나는 기능적 변비(FC)에 대한 ROME III 기준을 결정하기 위해 충족하고 다른 하나는 환자가 과민성 ROME III 장 증후군(IBS)에 대한 기준을 충족하지 않는 경우 ASSESS에 대한 기준선 호흡 검사가 수행될 것입니다.

추가로, 무작위화되기 최소 2개월 전에 중단되어야 하는 섬유 보조제 및 완하제의 이전 사용은 평가됩니다.

피험자는 완전한 신체 평가를 위해 두 번째 방문(방문 2)(환자가 완하제를 복용하는지 또는 섬유질 보충제를 복용하는지 여부에 따라 다름)로 돌아가고 섬유질 섭취 일지를 평가하여 식단에서 섬유질 섭취량을 결정합니다. 피난 일지와 SmartPill ©이 주어질 것입니다. 그러면 환자는 캡슐 피난 후 데이터를 등록하기 위해 병원으로 돌아갑니다.

환자는 1주일 후(방문 3) 12시간 단식으로 돌아올 것이며, 섬유질 섭취 및 배출 일지는 다시 평가될 것이며 영양사에 의해 다시 평가될 것입니다. 새로운 호흡 테스트가 수행됩니다. 피험자는 SF-36 삶의 질 설문지를 작성해야 합니다. ITS 분석을 위해 대변 샘플을 수집하고 공복 혈당, 당화혈색소 A1c, 인슐린 및 전체 지질 프로파일을 측정하기 위한 혈액 샘플을 추가로 수집합니다.

피험자는 Psyllium plantago 15g, blue agave Tequilana Weber fructans 5g, 10g, blue agave Tequilana Weber fructans 5g + 10g 첨가제(33 농도용 부형제) 중 하나를 받도록 무작위 배정됩니다. 블루 아가베 프럭탄 % 테킬라나 웨버.

무작위 배정은 참여 번호로 컴퓨터에서 생성되며 치료 할당은 연속적입니다.

제품은 동일한 병에 공급될 것입니다. 용기에 동일한 양의 분말이 들어 있습니다. 프로토콜 이름과 환자 번호로만 식별할 수 있습니다.

환자에게는 각 용량(각각 5, 10 및 15g)에 필요한 제품의 양을 투여하기 위한 계량 스푼 또는 계량된 정확한 양을 포함하는 봉투가 제공됩니다.

환자는 식이요법, 대피 일지 및 부작용을 평가하기 위한 시트를 작성하도록 지시받을 것입니다. 피험자는 12시간 금식으로 월말 ± 5일에 돌아올 것이며(방문 4) 그들의 순응도는 치료 할당에 따라 매일 필요한 그램 수를 뺀 용기 내 제품 중량에 의해 평가될 것입니다.

섬유 섭취 일지는 영양사에 의해 다시 평가될 것이며, 대피도 평가 일지가 될 것입니다. 질문 및 신체 평가를 포함하는 의학적 평가가 수행됩니다. 그 후 혈액 샘플을 통해 공복 혈당, 글리코실화 헤모글로빈 A1c, 인슐린 및 지질 프로파일을 결정하고 전체 배설물 샘플을 채취하여 SmartPill®을 제공합니다.

환자는 동일한 용기에 있는 보충제를 계속 복용하고 한 달 후에 일정을 잡습니다. 치료 종료 방문 방문(방문 5)에서 섬유질은 영양사에 의해 다시 평가 저널 소비가 될 것이고 대피도 평가 일지가 될 것입니다.

질문 및 신체 평가를 포함하는 의학적 평가가 수행되고 준수 여부는 용기에 담긴 제품의 무게를 측정하고 환자가 빈 봉투를 배달하는 치료 지정 또는 배달에 따라 매일 필요한 그램 수를 뺀 값으로 평가됩니다. 사용된.

그 후, 혈액 샘플은 공복 혈당, 글리코실화된 헤모글로빈 A1c, 인슐린 및 지질 프로필을 결정하기 위해 사용될 것이며 전체 샘플은 마지막에 대변 및 호흡 검사를 수집할 것입니다.

치료 중단 후 1개월 후에 수행될 방문 종료 시 평가 일지가 평가되고 대변 샘플이 수집되며 연구 부분의 개입이 종료됩니다. 합계 각 환자의 추적 기간은 3개월로, 사용할 섬유의 효과를 관찰하고 비교하기에 충분한 시간입니다. 같은 팀이 블루 아가베 테킬라나 웨버 프룩탄을 사용하여 수행한 최근 연구에서 장 통과에 미치는 영향이 섭취 첫 주부터 관찰되었으며 사실 이것이 연구에 집중해야 하는 이유 중 하나라는 점을 언급하는 것이 중요합니다. 기능성 변비 및 장 통과.

호흡 테스트:

방문 1 및 5에서 무작위 배정된 환자에서 이전에 호기된 수소 및 메탄 농도를 측정하기 위해 호흡 테스트를 수행할 것입니다.

호흡 테스트를 수행하기 위해 브랜드 Quintron® 호흡 추적기 가스 크로마토그래피 장비가 사용됩니다.

이를 위해 환자는 다음과 같은 질문을 받게 됩니다.

• 몇 주 전에는 항생제를 복용하지 말고 최소한 검사를 해보세요.
• 검사 24시간 전에 섬유질과 전분이 풍부한 음식 섭취를 중단하십시오.
• 술을 마시거나 담배를 피우지 말 것
• 최소 8시간 금식
• 테스트를 시작하기 전과 측정을 수행하는 동안 구강 위생을 수행하십시오.

이 테스트는 3시간 동안 지속되며, 그 동안 환자는 실험실 시설을 움직일 수 없고 말을 많이 하거나 잠을 잘 수 없습니다. 이 기간 동안 15분마다 내쉬는 공기 샘플을 채취합니다.

스마트필®:

SmartPill® 테스트는 방문 2 및 4에서 수행됩니다.

대장내시경:

새로 진단된 변비가 있는 55세 이상의 환자 또는 이 연령대에서 배변 습관의 변화가 관찰되는 환자를 대상으로 하는 도구입니다. 이 기본 목표는 잠재적으로 심각한 질병을 배제하고 연구 중에 이러한 질병의 진단을 지연시키지 않는 것입니다. 결장경 검사 1회는 변비가 있고 다음과 같은 특징이 있는 모든 환자를 대상으로 합니다.

1. 1년 미만의 변비 진단
2. 연구 시작 전 마지막 3년 동안 결장경 검사를 받지 않은 ≥55세 피험자
3. 만성이지만 경보 데이터가 있는 경우(: 설명할 수 없는 체중 감소, 최근 6개월 미만의 경직장 출혈, 최근 배변 패턴의 변화 예) 변비

환자에는 다음이 포함됩니다.

섬유질 보충제(Psyllium, Plums8)에 대한 연구는 그룹 간 차이점을 찾기 위해 그룹당 25~30명의 환자를 포함했습니다.

전체적으로 다음과 같이 무작위 배정된 60명의 환자를 포함할 계획입니다: 15명의 환자는 5g의 프럭탄 블루 아가베 테킬라나 웨버 용량을 투여받았고, 15명의 환자는 10g의 용량을 투여받았고, 15명의 환자는 5g의 아가베 프럭탄 블루 테킬라나 웨버의 용량을 투여받았습니다 + 10 g 부형제와 15명의 환자는 15g 질경이를 받았습니다.

기체 크로마토그래피: (단쇄 지방산 AGCC 측정)

이온 검출기 화염을 결정하기 위한 AGCC가 사용됩니다. 다음 단계가 수행됩니다.

1. 50 uL 에틸 부티레이트가 대변 1g에 첨가됩니다.
2. 1mL의 염산을 첨가하였다.
3. 3000g에서 10분간 원심분리한다. 상청액을 제거하였다.
4. 이어서 300uL N-메틸 디부틸 실릴트리플루오로아세트아미드(MTBSTFA)를 첨가한다.
5. 용액을 80°C에서 20분간 가열합니다.
6. 락트산의 완전한 유도체화를 보장하기 위해 실온에서 24시간 동안 그대로 두었습니다.
7. 특정 시료에 대해 개발된 방법에 따라 가스 크로마토그래피로 시료를 분석합니다.

대변에서 DNA 추출, PCR 증폭 및 세균 16S rRNA 시퀀싱:

RRNA 시퀀싱은 높은 분류학적 관계(젠더 업 레벨)를 결정하기 위한 선택 방법입니다. 16S rRNA 분자는 매우 가변적인 영역을 포함하고 있기 때문에 일반적으로 단일 종의 박테리아에 완전히 고유한 영역 20~30개의 염기를 찾는 것이 가능합니다.

분석을 수행하기 위해 멸균 플라스틱 용기인 배설물 표본을 수집합니다. 채취 직후 시료는 얼음통 2~8에 담아 실험실로 운반한 후 처리 전까지 -73°C에서 동결합니다.

DNA 추출은 자동화 프로세스 전에 간단한 초기 수정과 함께 자동화 방법 NucliSENS® easyMAG®(BioMerieux, Durham, NC, USA)의 지침에 따라 수행되었습니다. 각 샘플의 배설물 200mg을 칭량하고 0.3mL의 인산염 완충 식염수(8mM Na2HPO4, 137mM NaCl, 2.7mM KCl, 1.5mM KH2PO4 및)에 현탁시키고 30초 동안 격렬하게 교반한다. 100 ㎕의 현탁액을 끓는 물에 15분 동안 넣고 즉시 얼음 위에서 0 °C로 얼렸다. 박테리아 균질액을 10분 동안 13,000g에서 원심분리하고 상청액을 500μl 튜브에 수집합니다.

이 표본은 자동화 장비에서 DNA를 분리하는 데 사용됩니다. PCR 증폭 실시간 16S rRNA 박테리아는 Light Cycler-(Roche) 장비를 사용하여 이전 보고서에 기재된 바와 같이 수행된다.

1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria로 설명된 주요 범주에서 박테리아 문의 정량화. 전술한 프라이머 및 조건을 이용하여 실시간으로 정량적 PCR을 수행하는 방법으로, pR은 전술한 세균 16S rRNA 집단군의 특정 단편을 증폭한다. 바코드 967 F(CNACGCGAAGAACCTTANC) 및 1046R(CGACAGCCATGCANCACCT)이라는 프라이머를 사용하여 16S rRNA 조각 V6 박테리아 V6을 증폭합니다.

증폭된 단편의 시퀀싱 및 분석은 형광 시퀀싱 장비 터미네이터 3130/유전자 분석기(Applied Biosystems)에 의해 이루어진다.

PCR 제품은 시퀀싱 및 분석되었으며 종 식별을 위해 GenBank에 제출됩니다.

비피도박테리아와 락토바실러스 집단의 선택적인 성장과 대변에서 짧은 사슬 지방산의 발생이 예상되기 때문에 용설란 섬유의 프리바이오틱 효과를 입증하기 위해 사용되는 박테리아 DNA 추출 및 박테리아 종의 정량화.

따라서 기능적 특성과 변비에 미치는 영향 외에도 아가베 프럭탄의 프리바이오틱 효과를 확인할 수 있습니다.