Avaliação de um Suplemento de Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago em Pacientes com Constipação Funcional (SATWAVPP)

Este é um estudo prospectivo, randomizado, controlado e simples cego para determinar a eficácia da fase III da ingestão de frutanos agave azul Tequilana Weber em indivíduos com constipação funcional.

Para conseguir isso, planeja-se incluir pacientes com mais de 18 anos de idade Cumprir a OMS, bem como os critérios de inclusão Os critérios de Roma III para constipação funcional. (Veja a tabela abaixo).

A fase de nosso estudo é designada com base no artigo 66 do capítulo II "Da pesquisa farmacológica" do Regulamento da Lei Geral de Saúde em Pesquisa que define os estudos de FASE III a seguir: É a administração de um medicamento de pesquisa a grandes grupos de Pacientes (geralmente externos), para definir a utilidade terapêutica e identificação do ITS identificam reações adversas, interações e fatores externos que podem alterar o efeito farmacológico.

Os pacientes do instituto serão chamados após convites para participar da implantação de um protocolo para pacientes com constipação. Pacientes que não foram cadastrados e atendem aos critérios de inclusão também podem participar.

O estudo a ser realizado será explicado e lido e, quando apropriado, o consentimento informado será assinado pelo paciente Durante a visita inicial (Visita 1) de elegibilidade, Onde o sujeito receberá 2 questionários (ver anexos), um Eles atendem para determinar se os critérios ROME III para constipação funcional (FC) e outro para AVALIAR se o paciente não atende aos critérios para síndrome do intestino irritável ROME III (IBS) e um teste respiratório basal será realizado.

Além disso, será AVALIADO o uso prévio de suplementos de fibras e laxantes, que devem ser suspensos pelo menos 2 meses antes da randomização.

O sujeito retornará a uma segunda visita (consulta 2) (que dependerá se o paciente está tomando laxantes ou suplementos de fibras) para uma avaliação física completa e o diário de ingestão de fibras será avaliado para determinar a quantidade de ingestão de fibras na dieta assim como o diário de evacuações e o SmartPill © serão entregues e assim, o paciente retornará ao hospital para registrar os dados após a cápsula ter evacuado.

O paciente retornará uma semana depois (consulta 3) em jejum de 12 horas, a ingestão de fibras e os diários de evacuação serão reavaliados e serão novamente AVALIADOS por uma nutricionista. Um novo teste respiratório será realizado. O sujeito será solicitado a preencher o Questionário de Qualidade de Vida SF-36. Uma amostra de fezes será coletada para análise de ITS, além de uma amostra de sangue para determinação de glicose em jejum, hemoglobina glicosilada A1c, insulina e perfil lipídico completo.

Os indivíduos serão randomizados para receber um dos quatro tratamentos que podem ser Psyllium plantago 15g, frutanos agave azul Tequilana Weber nas doses de 5, 10g e frutosanos agave azul Tequilana Weber na dose de 5 g + 10 g de excipiente para uma concentração de 33 % de frutanos de agave azul Tequilana Weber.

A randomização será gerada por computador com um número de participação e a atribuição do tratamento será consecutiva.

O produto será fornecido em frascos idênticos Com a mesma quantidade de pó em um recipiente Que só será identificável Com o nome do protocolo bem como o número do paciente.

O paciente receberá uma colher medidora para administrar a quantidade de produto necessária para cada uma das doses (5, 10 e 15g respectivamente) ou envelopes contendo as exatas quantidades pesadas.

O paciente será orientado a manter um diário da dieta, das evacuações e uma ficha para AVALIAR efeitos adversos. O sujeito retornará (Visita 4) ao final de um mês ± 5 dias em jejum de 12 horas e sua adesão será avaliada pelo peso do produto no recipiente subtraindo o número de gramas necessários diariamente DE ACORDO com a atribuição do tratamento.

Os diários de ingestão de fibras serão AVALIADOS novamente pela nutricionista, o diário de evacuação também será AVALIADO. Será realizada uma avaliação médica que inclui questionamento e avaliação física. Posteriormente, uma amostra de sangue será obtida para determinar a glicose em jejum obtida, a hemoglobina glicosilada A1c, a insulina e o perfil lipídico e uma amostra completa de excremento será obtida e o SmartPill® será administrado.

O paciente continuará com o suplemento no mesmo recipiente e será agendado para um mês depois. Na visita de final de tratamento (consulta 5), ​​será AVALIADO novamente o consumo diário de fibras por nutricionista e AVALIADO também diário de evacuação.

Será realizada uma avaliação médica que inclui questionamento e avaliação física e sua adesão será avaliada pesando o produto no recipiente, subtraindo o número de gramas que requer diariamente DE ACORDO com a atribuição do tratamento ou entrega pelo paciente dos envelopes vazios usado.

Posteriormente, será realizada uma amostra de sangue para determinar a glicemia de jejum obtida, hemoglobina glicosilada A1c, insulina e perfil lipídico e uma amostra completa será coletada as fezes e ao final será realizado o teste respiratório.

Para o final da visita, que será realizada um mês após a interrupção do tratamento, será AVALIADA a evacuação diária e uma amostra de fezes será coletada e com ela terminará a intervenção na parte do estudo. Total O tempo de acompanhamento de cada paciente será de 3 meses, tempo suficiente para observar e comparar o efeito das fibras a serem utilizadas. É importante mencionar que em estudos recentes realizados pela mesma equipe e com frutanos de agave azul Tequilana Weber, efeitos no trânsito intestinal foram observados desde a primeira semana de ingestão, de fato, esta é uma das razões para focar o estudo em constipação funcional e trânsito intestinal.

Teste de respiração:

Um teste respiratório será realizado para medir as concentrações de hidrogênio e metano previamente exaladas em pacientes randomizados nas visitas 1 e 5.

Para a realização do teste respiratório será utilizado equipamento de cromatografia gasosa da marca Quintron® Breath-tracker.

Para isso, será perguntado aos pacientes:

• Não tomar antibióticos semanas antes Pelo menos para o teste.
• Interromper a ingestão de alimentos ricos em fibras e amidos 24 horas antes do teste.
• Não tomar álcool, ou fumar
• Ter um mínimo de 8 horas de jejum
• Realize a higiene oral antes de iniciar o teste e durante a realização das medições.

Este teste dura 3 horas, durante as quais o paciente não pode sair das instalações do laboratório de mobilidade, não pode falar muito ou dormir. Amostras de ar exalado são coletadas a cada 15 minutos durante esse período.

SmartPill®:

O teste SmartPill® será realizado nas visitas 2 e 4.

Colonoscopia:

É uma ferramenta que estará sujeita a escrutínio em doentes ≥55 anos com diagnóstico recente de obstipação ou naqueles em que se observaram alterações dos hábitos intestinais nesta faixa etária. Este objetivo fundamental, descartar doenças potencialmente graves e não atrasar o diagnóstico destas durante o estudo de pesquisa. um estudo colonoscópico todos os pacientes que têm constipação e qualquer uma das seguintes características serão usadas:

1. Diagnóstico de constipação há menos de 1 ano
2. Sujeitos ≥55 anos que não tiveram avaliação colonoscópica nos últimos 3 anos antes da entrada no estudo
3. Crônica, mas com dados de alarme (: perda de peso inexplicável, sangramento transretal recente <6 meses, exemplo de alterações recentes no padrão de defecação) Prisão de ventre

Os pacientes incluem:

Estudos com suplementos de fibras (Psyllium, Plums8) incluíram 25 a 30 pacientes por grupo para encontrar diferenças entre os grupos.

No total está prevista a inclusão de 60 pacientes randomizados da seguinte forma: 15 pacientes receberam a dose de 5 g de frutanos agave azul Tequilana Weber, 15 pacientes receberam a dose de 10 g, 15 pacientes receberam a dose de 5g de frutanos agave azul Tequilana Weber + 10 g de excipiente e 15 pacientes receberam 15 g de plantago psyllium.

Cromatografia gasosa: (determinação de ácidos graxos de cadeia curta AGCC)

O AGCC para determinar a chama do detector de íons será usado. As seguintes etapas são executadas:

1. 50 uL de butirato de etila são adicionados a 1 g de fezes
2. 1 mL de ácido clorídrico foi adicionado.
3. Centrifugou-se a 3000 g durante 10 minutos. O sobrenadante foi removido.
4. Em seguida, adiciona-se 300 uL de N-Metil dibutil sililtrifluoroacetamida (MTBSTFA).
5. solução a 80 ° C por 20 min de aquecimento.
6. Deixou-se inalterado à temperatura ambiente durante 24 horas para assegurar a derivatização completa do ácido láctico.
7. serão realizadas análises de amostras por cromatografia gasosa de acordo com método desenvolvido para amostras específicas.

Extração de DNA de fezes, amplificação por PCR e sequenciamento de 16S rRNA bacteriano:

O sequenciamento de RRNA é o método de escolha para determinar relações taxonômicas altas (nível superior de gênero). Como a molécula de rRNA 16S contém regiões altamente variáveis, geralmente é possível encontrar regiões de 20 a 30 bases que são completamente exclusivas de uma única espécie de bactéria.

Para realizar a análise, serão coletadas amostras fecais em recipientes plásticos estéreis. Imediatamente após a coleta, as amostras serão transportadas para o laboratório em balde de gelo 2 a 8 e posteriormente congeladas a -73°C até o processamento.

A extração de DNA foi realizada seguindo as instruções do método automatizado NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Durham, NC, EUA) com uma breve modificação inicial antes do processo automatizado. Pesam-se e suspendem-se 200 mg de matéria fecal de cada amostra em 0,3 mL de solução salina tamponada com fosfato - (8 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1,5 mM KH2PO4 e) agitação vigorosa por 30 segundos. 100 µl da suspensão foram colocados em fervura por 15 min e imediatamente congelados a 0 °C em gelo. O homogenato bacteriano foi centrifugado a 13.000 g por 10 min e o sobrenadante será coletado em tubos de 500 µl.

Este espécime será utilizado para o isolamento de DNA em equipamento automatizado. A amplificação por PCR em tempo real de bactérias 16S rRNA será realizada conforme descrito em relatórios anteriores usando um equipamento Light Cycler-(Roche).

Quantificação dos filos bacterianos nas principais categorias descritas: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria. Será conduzido pelo método de PCR quantitativo em tempo real utilizando os primers e condições descritas anteriormente, pR amplificará fragmentos específicos de grupos populacionais de rRNA 16S bacterianos descritos. Utilizaremos primers denominados barcode 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) e 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) para amplificar os fragmentos 16S rRNA V6 bacteriano V6.

O sequenciamento e análise dos fragmentos amplificados é feito por equipamento de sequenciamento fluorescente terminador 3130/analisador genético (Applied Biosystems).

Os produtos de PCR foram sequenciados e analisados ​​e serão encaminhados ao GenBank para identificação das espécies.

A extração de DNA bacteriano e a quantificação de espécies bacterianas serviram para demonstrar o efeito prebiótico da fibra de agave, uma vez que é esperado o crescimento seletivo da população de bifidobactérias e lactobacilos e a ocorrência de ácidos graxos de cadeia curta nas fezes.

Assim, além das propriedades funcionais e seus efeitos sobre a constipação, você pode verificar o efeito prebiótico dos frutanos do agave.