Ocena suplementu Agave Tequilana Weber Azul vs Psyllium Plantago u pacjentów z funkcjonalnymi zaparciami (SATWAVPP)

Jest to prospektywne, randomizowane, kontrolowane badanie z pojedynczą ślepą próbą, mające na celu określenie skuteczności fazy III spożycia niebieskich fruktanów z agawy Tequilana Weber u osób z funkcjonalnymi zaparciami.

Aby to osiągnąć, planowane jest włączenie pacjentów w wieku powyżej 18 lat. Spełniają kryteria WHO, a także kryteria włączenia Rzymskie III kryteria zaparć czynnościowych. (Zobacz tabelę poniżej).

Faza naszego badania jest wyznaczona na podstawie artykułu 66 rozdziału II „O badaniach farmakologicznych” Rozporządzenia Ogólnego Prawa o Zdrowiu w Badaniach, które definiuje badania FAZA III wygląda następująco: Jest to podawanie badanego leku dużym grupom Pacjenci (zwykle zewnętrzni), aby określić użyteczność terapeutyczną ITS i zidentyfikować reakcje niepożądane, interakcje i czynniki zewnętrzne, które mogą zmienić efekt farmakologiczny.

Pacjenci Instytutu będą wzywani po zaproszeniach do Uczestnictwa w Umieszczaniu protokołu dla Pacjentów z zaparciami. Pacjenci, którzy nie zostali zarejestrowani i spełniają kryteria włączenia, również mogą uczestniczyć.

Badanie, które ma zostać przeprowadzone, zostanie wyjaśnione i przeczytane oraz, w stosownych przypadkach, świadoma zgoda zostanie podpisana przez Pacjenta Podczas pierwszej wizyty (Wizyta 1) kwalifikacji, podczas której pacjent otrzyma 2 kwestionariusze (patrz załączniki), jedno z nich spotyka się w celu ustalenia, czy spełniają kryteria ROME III zaparcia czynnościowego (FC), a drugie w celu OCENY, czy pacjent nie spełnia kryteriów zespołu jelita drażliwego ROME III (IBS) i zostanie przeprowadzony wyjściowy test oddechowy.

Ponadto OCENIONE zostanie wcześniejsze stosowanie suplementów błonnika i środków przeczyszczających, które należy zawiesić na co najmniej 2 miesiące przed randomizacją.

Pacjent wróci na drugą wizytę (Wizyta 2) (która będzie zależała od tego, czy pacjent przyjmuje środki przeczyszczające, czy suplementy błonnika) w celu pełnej oceny fizycznej, a dzienniczek spożycia błonnika zostanie oceniony w celu określenia ilości spożycia błonnika w diecie jak również dzienniczek ewakuacji i SmartPill © zostaną podane iw ten sposób pacjent wróci do szpitala, aby zarejestrować dane po ewakuacji kapsułki.

Pacjent wróci tydzień później (Wizyta 3) na 12-godzinnym poście, spożycie błonnika i dzienniki wypróżnień zostaną ponownie OCENIONE i ponownie OCENIONE przez dietetyka. Zostanie przeprowadzony nowy test oddechu. Pacjent zostanie poproszony o wypełnienie Kwestionariusza Jakości Życia SF-36. Próbka kału zostanie pobrana do analizy ITS oprócz próbki krwi w celu oznaczenia glukozy na czczo, glikozylowanej hemoglobiny A1c, insuliny i pełnego profilu lipidowego.

Pacjenci zostaną losowo przydzieleni do jednego z czterech zabiegów, którymi mogą być Psyllium plantago 15 g, niebieska agawa Tequilana Weber fructans w dawkach 5, 10 g i niebieska agawa Tequilana Weber fructans w dawce 5 g + 10 g substancji pomocniczej dla stężenia 33 % fruktanów z niebieskiej agawy Tequilana Weber.

Randomizacja zostanie wygenerowana komputerowo z numerem uczestnictwa, a przydział leczenia będzie następował po sobie.

Produkt będzie dostarczany w identycznych butelkach Z taką samą ilością proszku w pojemniku, który będzie można zidentyfikować jedynie za pomocą nazwy protokołu oraz numeru pacjenta.

Pacjent otrzyma łyżkę miarową do podania ilości produktu potrzebnej do podania każdej z dawek (odpowiednio 5, 10 i 15 g) lub koperty zawierające dokładne odważone ilości.

Pacjent zostanie poinstruowany, aby prowadził dzienniczek diety, ewakuacji oraz arkusz do OCENY działań niepożądanych. Pacjent powróci (Wizyta 4) pod koniec miesiąca ± 5 dni na 12-godzinnym poście i Jego przestrzeganie zostanie ocenione na podstawie wagi produktu w pojemniku, odejmując liczbę gramów wymaganych dziennie ZGODNIE z przypisanym leczeniem.

Dzienniki spożycia błonnika zostaną ponownie OCENIONE przez dietetyka, ewakuacja również zostanie OCENIONY. Zostanie przeprowadzona ocena medyczna, która obejmuje przesłuchanie i ocenę fizyczną. Następnie zostanie pobrana próbka krwi w celu określenia otrzymanej glukozy na czczo, glikozylowanej hemoglobiny A1c, insuliny i profilu lipidowego oraz zostanie pobrana pełna próbka kału i zostanie podany SmartPill®.

Pacjent będzie kontynuował przyjmowanie suplementu w tym samym pojemniku i zostanie zaplanowany na miesiąc później. Podczas wizyty kończącej leczenie (wizyta 5) błonnik zostanie ponownie OCENIONY przez dietetyka, a ewakuacja również zostanie OCENIONA w dzienniku.

Zostanie przeprowadzona ocena medyczna, która obejmuje przesłuchanie i ocenę fizyczną, a ich przestrzeganie zostanie ocenione poprzez zważenie produktu w pojemniku, odjęcie liczby gramów, których potrzebuje dziennie ZGODNIE z przypisanym leczeniem lub dostarczeniem przez pacjenta pustych kopert używany.

Następnie zostanie pobrana próbka krwi w celu oznaczenia otrzymanej glukozy na czczo, glikozylowanej hemoglobiny A1c, insuliny i profilu lipidowego oraz zostanie pobrana pełna próbka kału i na koniec zostanie przeprowadzony test oddechowy.

Na koniec wizyty, która zostanie przeprowadzona po miesiącu od zakończenia leczenia, zostanie sporządzony dzienniczek ewakuacji i pobrana zostanie próbka kału, na której zostanie zakończona interwencja w części badania. Ogółem Okres obserwacji każdego pacjenta wynosi 3 miesiące, co jest wystarczającą ilością czasu na obserwację i porównanie działania zastosowanych włókien. Należy wspomnieć, że w ostatnich badaniach przeprowadzonych przez ten sam zespół i z niebieską agawą Tequilana Weber fructans obserwowano wpływ na pasaż jelitowy od pierwszego tygodnia przyjmowania, w rzeczywistości jest to jeden z powodów, dla których należy skoncentrować się na badaniu czynnościowe zaparcia i pasaż jelitowy.

Test oddechu:

Przeprowadzony zostanie test oddechowy w celu pomiaru stężeń wodoru i metanu w wydychanym powietrzu u pacjentów zrandomizowanych na wizytach 1 i 5.

Do przeprowadzenia testu oddechowego wykorzystany zostanie sprzęt do chromatografii gazowej marki Quintron® Breath-tracker.

W tym celu pacjenci zostaną zapytani:

• Nie brać antybiotyków przed tygodniami Przynajmniej na próbę.
• Na 24 godziny przed badaniem zaprzestać spożywania pokarmów bogatych w błonnik i skrobię.
• Nie pić alkoholu ani nie palić
• Miej co najmniej 8 godzin na czczo
• Higienę jamy ustnej należy wykonać przed przystąpieniem do badania oraz w trakcie wykonywania pomiarów.

Badanie to trwa 3 godziny, podczas których pacjent nie może opuszczać laboratorium ruchowego, nie może za dużo mówić ani spać. W tym okresie co 15 minut pobierane są próbki wydychanego powietrza.

SmartPill®:

Test SmartPill® zostanie przeprowadzony na wizycie 2 i 4.

Kolonoskopia:

Jest narzędziem, które zostanie poddane badaniu pacjentów w wieku ≥55 lat ze świeżo rozpoznanymi zaparciami lub u których zaobserwowano zmiany w rytmie wypróżnień w tej grupie wiekowej. Ten podstawowy cel to wykluczenie potencjalnie poważnych chorób i nie opóźnianie ich rozpoznania w trakcie badania naukowego. w jednym badaniu kolonoskopowym zostaną wykorzystani wszyscy pacjenci z zaparciami i jedną z poniższych cech:

1. Rozpoznanie zaparć mniej niż 1 rok
2. Pacjenci w wieku ≥55 lat, którzy nie mieli wykonanej kolonoskopii w ciągu ostatnich 3 lat przed włączeniem do badania
3. Przewlekłe, ale z danymi alarmowymi (: niewyjaśniona utrata masy ciała, niedawne krwawienie z odbytu <6 miesięcy, ostatnie zmiany w schemacie wypróżnień, przykład) Zaparcia

Pacjenci obejmują:

Badania z suplementami błonnika (Psyllium, Plums8) Obejmowały od 25 do 30 pacjentów na grupę, aby znaleźć różnice między grupami.

W sumie planuje się objąć 60 pacjentów zrandomizowanych w następujący sposób: 15 pacjentów otrzymało fruktany blue agave Tequilana Weber w dawce 5 g, 15 pacjentów otrzymało dawkę 10 g, 15 pacjentów otrzymało dawkę 5 g fruktanów agawy blue Tequilana Weber + 10 g substancji pomocniczej, a 15 pacjentów otrzymało 15 g babki płesznik.

Chromatografia gazowa: (oznaczanie krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych AGCC)

AGCC zostanie użyte do określenia płomienia detektora jonów. Wykonywane są następujące kroki:

1. Do 1 g kału dodaje się 50 ul maślanu etylu
2. Dodano 1 ml kwasu chlorowodorowego.
3. Wiruje się przy 3000 g przez 10 minut. Supernatant usunięto.
4. Następnie dodaje się 300 ul N-metylodibutylosililotrifluoroacetamidu (MTBSTFA).
5. roztwór w temperaturze 80°C przez 20 min nagrzewać.
6. Pozostawiono go w spokoju w temperaturze pokojowej na 24 godziny, aby zapewnić całkowitą derywatyzację kwasu mlekowego.
7. zostanie przeprowadzona analiza próbek metodą chromatografii gazowej według metody opracowanej dla poszczególnych próbek.

Ekstrakcja DNA z kału, amplifikacja PCR i sekwencjonowanie bakteryjnego 16S rRNA:

Sekwencjonowanie RRNA jest metodą z wyboru do określania wysokich zależności taksonomicznych (wyższy poziom płci). Ponieważ cząsteczka 16S rRNA zawiera wysoce zmienne regiony, zwykle możliwe jest znalezienie regionów od 20 do 30 zasad, które są całkowicie unikalne dla jednego gatunku bakterii.

Do wykonania analizy próbki kału zostaną pobrane w sterylnych plastikowych pojemnikach. Natychmiast po pobraniu próbki zostaną przetransportowane do laboratorium w pojemnikach z lodem od 2 do 8, a następnie zamrożone w temperaturze -73°C do czasu przetworzenia.

Ekstrakcję DNA przeprowadzono zgodnie z instrukcjami zautomatyzowanej metody NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Durham, NC, USA) z krótką wstępną modyfikacją przed zautomatyzowanym procesem. Odważa się i zawiesza 200 mg kału z każdej próbki w 0,3 ml roztworu soli buforowanej fosforanami (8 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1,5 mM KH2PO4 i) energicznie mieszając przez 30 sekund. 100 μl zawiesiny umieszczono we wrzącej wodzie na 15 minut i natychmiast zamrożono w lodzie w temperaturze 0°C. Homogenat bakteryjny odwirowywano przy 13000 g przez 10 minut i zbierano supernatant do probówek 500 μl.

Ta próbka zostanie użyta do izolacji DNA na zautomatyzowanym sprzęcie. Amplifikację PCR bakteryjnego 16S rRNA w czasie rzeczywistym przeprowadza się w sposób opisany we wcześniejszych raportach, stosując sprzęt Light Cycler-(Roche).

Opisano ilościowe gromadzenie bakterii w głównych kategoriach: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria. Zostanie on przeprowadzony metodą ilościowego PCR w czasie rzeczywistym z wykorzystaniem opisanych wcześniej starterów i warunków, amplifikacji pR określonych fragmentów opisanych grup populacji 16S rRNA bakterii. Użyjemy starterów o kodzie kreskowym 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) i 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT) do amplifikacji fragmentów 16S rRNA V6 bakterii V6.

Sekwencjonowanie i analiza zamplifikowanych fragmentów odbywa się za pomocą urządzenia do sekwencjonowania fluorescencyjnego terminator 3130/analizator genetyczny (Applied Biosystems).

Produkty PCR zostały zsekwencjonowane i przeanalizowane i zostaną przesłane do GenBank w celu identyfikacji gatunku.

Ekstrakcja bakteryjnego DNA i oznaczenie ilościowe gatunków bakterii wykorzystane do wykazania prebiotycznego działania błonnika agawy, ponieważ spodziewany jest selektywny wzrost populacji bifidobakterii i pałeczek kwasu mlekowego oraz występowanie krótkołańcuchowych kwasów tłuszczowych w kale.

Zatem oprócz właściwości użytkowych i ich wpływu na zaparcia można sprawdzić prebiotyczne działanie fruktanów z agawy.