Оценка добавки Agave Tequilana Weber Azul по сравнению с Psyllium Plantago у пациентов с функциональным запором (SATWAVPP)

Это проспективное, рандомизированное, контролируемое и одиночное слепое исследование для определения эффективности III фазы приема фруктанов голубой агавы Tequilana Weber у пациентов с функциональными запорами.

Для этого планируется включить возраст пациентов старше 18 лет. Соответствовать критериям ВОЗ, а также критериям включения Римские критерии III для функционального запора. (см. таблицу ниже).

Фаза нашего исследования обозначена на основании статьи 66 главы II «О фармакологических исследованиях» Регламента Общего закона о здравоохранении в исследованиях, которая определяет исследования ФАЗА III. Далее следует следующее: Это введение исследовательского препарата большим группам Пациенты (обычно внешние) для определения терапевтической полезности ИТС и идентификации выявляют побочные реакции, взаимодействия и внешние факторы, которые могут изменить фармакологический эффект.

Пациенты института будут вызваны после приглашения принять участие в размещении протокола для пациентов с запорами. Пациенты, которые не были зарегистрированы и соответствуют критериям включения, также могут участвовать.

Исследование, которое необходимо провести, будет объяснено и прочитано, и, при необходимости, информированное согласие будет подписано пациентом. один из них соответствует критериям функционального запора (FC) ROME III, а другой - ОЦЕНКЕ, если пациент не соответствует критериям синдрома раздраженного кишечника ROME III (IBS), и будет выполнен базовый дыхательный тест.

Кроме того, будет ОЦЕНЕН предыдущее использование добавок с клетчаткой и слабительных средств, которое должно быть приостановлено по крайней мере за 2 месяца до рандомизации.

Субъект вернется ко второму посещению (посещение 2) (которое будет зависеть от того, принимает ли пациент слабительные средства или добавки с клетчаткой) для полной физической оценки, и дневник потребления клетчатки будет оценен для определения количества потребления клетчатки в рационе. а также дневник эвакуаций и SmartPill © будут даны и Таким образом, пациент вернется в больницу для регистрации данных после эвакуации капсулы.

Пациент вернется через неделю (посещение 3) на 12-часовом голодании, потребление клетчатки и дневники эвакуации будут повторно ОЦЕНЕНЫ, и они снова будут ОЦЕНЕНЫ диетологом. Будет проведен новый дыхательный тест. Субъекту будет предложено заполнить анкету качества жизни SF-36. Образец стула будет собран для анализа ITS в дополнение к образцу крови для определения уровня глюкозы натощак, гликозилированного гемоглобина A1c, инсулина и полного профиля липидов.

Субъекты будут рандомизированы для получения одного из четырех видов лечения. Это может быть Psyllium plantago 15 г, фруктаны голубой агавы Tequilana Weber в дозах 5, 10 г и фруктаны голубой агавы Tequilana Weber в дозе 5 г + 10 г наполнителя для концентрации 33. % фруктанов голубой агавы Текилана Вебер.

Рандомизация будет сгенерирована компьютером с номером участника, и назначение лечения будет последовательным.

Продукт будет поставляться в идентичных флаконах с таким же количеством порошка в контейнере, который можно будет идентифицировать только по названию протокола и номеру пациента.

Пациенту будет предоставлена ​​мерная ложка для введения количества продукта, необходимого для каждой из доз (5, 10 и 15 г соответственно), или конверты, содержащие точное взвешенное количество.

Пациент будет проинструктирован вести дневник диеты, эвакуации и лист для ОЦЕНКИ побочных эффектов. Субъект вернется (посещение 4) в конце месяца ± 5 дней на 12-часовое голодание, и его приверженность будет оцениваться по весу продукта в контейнере за вычетом количества граммов, необходимых ежедневно, В СООТВЕТСТВИИ с назначением лечения.

Дневники потребления клетчатки будут снова ОЦЕНЕНЫ диетологом, дневник эвакуации также будет ОЦЕНЕН. Будет проведено медицинское освидетельствование, включающее опрос и физическую оценку. Впоследствии будет взят образец крови для определения уровня глюкозы натощак, гликозилированного гемоглобина A1c, инсулина и профиля липидов, а также будет получен полный образец экскрементов и будет выдана SmartPill®.

Пациент будет продолжать принимать добавку в том же контейнере и будет назначен на месяц позже. Во время визита в конце лечения (посещение 5) диетолог снова ОЦЕНИТ потребление клетчатки, а также дневник эвакуации.

Будет проведена медицинская оценка, которая включает опрос и физическую оценку, а их приверженность будет оцениваться путем взвешивания продукта в контейнере, вычитания количества граммов, которое требуется ежедневно, В СООТВЕТСТВИИ с назначением лечения или доставкой пациентом пустых конвертов. использовал.

Впоследствии будет взят образец крови для определения уровня глюкозы натощак, гликозилированного гемоглобина A1c, инсулина и профиля липидов, а также будет собран полный образец стула, и в конце будет проведен дыхательный тест.

В конце визита, который будет проведен через месяц после прекращения лечения, будет ОЦЕНЕН дневник эвакуации и взят образец стула, и на этом вмешательство в часть исследования закончится. Итого Продолжительность наблюдения за каждым пациентом составит 3 месяца, достаточного времени для наблюдения и сравнения эффекта используемых волокон. Важно отметить, что в недавних исследованиях, проведенных той же командой и с фруктанами голубой агавы Tequilana Weber, влияние на кишечный транзит наблюдалось с первой недели приема, на самом деле это одна из причин сосредоточить исследование на функциональные запоры и кишечный транзит.

Дыхательный тест:

Будет проведен дыхательный тест для измерения концентраций водорода и метана, ранее выдыхавшихся у пациентов, рандомизированных при посещениях 1 и 5.

Для проведения дыхательного теста будет использоваться газохроматографическое оборудование марки Quintron® Breath-tracker.

Для этого пациентов спросят:

• Не принимать антибиотики до недели хотя бы до теста.
• Прекратите прием пищи, богатой клетчаткой и крахмалом, за 24 часа до теста.
• Не принимать алкоголь или курить
• голодать не менее 8 часов
• Выполняйте гигиену полости рта перед началом теста и во время выполнения измерений.

Этот тест длится 3 часа, в течение которых больной не может покидать лабораторные помещения, моторику, не может слишком много говорить или спать. Пробы выдыхаемого воздуха в этот период берутся каждые 15 минут.

СмартПилл®:

Тест SmartPill® будет проводиться во время 2 и 4 визитов.

Колоноскопия:

Это средство, которое подлежит тщательному изучению у пациентов ≥55 лет с впервые диагностированным запором или у тех, у кого в этой возрастной группе наблюдаются изменения в работе кишечника. Эта основная цель – исключить потенциально серьезные заболевания и не откладывать их диагностику во время исследования. одно колоноскопическое исследование будет использовано у всех пациентов с запорами и любой из следующих характеристик:

1. Диагностика запоров менее 1 года
2. Субъекты ≥55 лет, которые не проходили колоноскопию в течение последних 3 лет до включения в исследование.
3. Хронический, но с тревожными данными (: необъяснимая потеря веса, недавнее трансректальное кровотечение <6 месяцев, недавние изменения в образце дефекации, например) Запор

Среди пациентов:

Исследования с добавками клетчатки (Psyllium, Plums8) включали от 25 до 30 пациентов в группу для выявления различий между группами.

Всего планируется включить 60 пациентов, рандомизированных следующим образом: 15 пациентов получали фруктаны голубой агавы Текилана Вебер в дозе 5 г, 15 пациентов получали дозу 10 г, 15 пациентов получали дозу 5 г фруктанов агавы голубого Текилана Вебер + 10 г вспомогательного вещества и 15 пациентов получили 15 г подорожника подорожника.

Газовая хроматография: (определение короткоцепочечной жирной кислоты AGCC)

AGCC для определения пламени детектора ионов будет использоваться. Выполняются следующие шаги:

1. 50 мкл этилбутирата добавляют к 1 г фекалий.
2. Добавляли 1 мл соляной кислоты.
3. Центрифугируют при 3000 g в течение 10 минут. Супернатант удаляли.
4. Затем добавляют 300 мкл N-метилдибутилсилилтрифторацетамида (MTBSTFA).
5. раствор при 80°С в течение 20 мин нагревают.
6. Его оставляли в покое при комнатной температуре на 24 часа для обеспечения полной дериватизации молочной кислоты.
7. анализ образцов методом газовой хроматографии по методу, разработанному для конкретных образцов.

Выделение ДНК из фекалий, ПЦР-амплификация и секвенирование бактериальной 16S рРНК:

Секвенирование рРНК является методом выбора для определения высоких таксономических отношений (уровень пола вверх). Поскольку молекула 16S рРНК содержит высоковариабельные области, обычно можно найти области от 20 до 30 оснований, полностью уникальные для одного вида бактерий.

Для проведения анализа собирают образцы кала в стерильные пластиковые контейнеры. Сразу после сбора пробы будут доставлены в лабораторию в ведерках со льдом от 2 до 8, а затем заморожены при температуре -73°C до обработки.

Экстракцию ДНК проводили в соответствии с инструкциями автоматизированного метода NucliSENS® easyMAG® (BioMerieux, Дарем, Северная Каролина, США) с краткой начальной модификацией перед автоматизированным процессом. Взвешивают и суспендируют 200 мг фекалий каждого образца в 0,3 мл забуференного фосфатом физиологического раствора (8 мМ Na2HPO4, 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, 1,5 мМ KH2PO4 и) энергичное перемешивание в течение 30 секунд. 100 мкл суспензии помещали в кипящую 15 мин и сразу же замораживали при 0°С на льду. Бактериальный гомогенат центрифугируют при 13000 g в течение 10 мин и надосадочную жидкость собирают в пробирки на 500 мкл.

Этот образец будет использоваться для выделения ДНК на автоматизированном оборудовании. ПЦР-амплификацию 16S рРНК бактерий в реальном времени проводят, как описано в предыдущих отчетах, с использованием оборудования Light Cycler-(Roche).

Количественная оценка типов бактерий в основных описанных категориях: 1) Firmicutes, 2) Bacteroidetes, 3) Actinobacterias, 4) Proteobacteria. Он будет проводиться методом количественной ПЦР в режиме реального времени с использованием праймеров и условий, описанных ранее, pR амплифицируют специфические фрагменты описанных групп популяций бактериальной 16S рРНК. Мы будем использовать праймеры, называемые штрих-кодом 967 F (CNACGCGAAGAACCTTANC) и 1046R (CGACAGCCATGCANCACCT), для амплификации фрагментов 16S рРНК V6 бактериального V6.

Секвенирование и анализ амплифицированных фрагментов проводят на оборудовании флуоресцентного секвенирования терминатор 3130/генетический анализатор (Applied Biosystems).

Продукты ПЦР были секвенированы и проанализированы и будут отправлены в GenBank для идентификации видов.

Экстракция бактериальной ДНК и количественный анализ видов бактерий используются для демонстрации пребиотического эффекта волокна агавы, поскольку ожидается избирательный рост популяции бифидобактерий и лактобацилл и появление короткоцепочечных жирных кислот в стуле.

Таким образом, в дополнение к функциональным свойствам и их влиянию на запор, вы можете проверить пребиотический эффект фруктанов агавы.